摘要 [目的]研究烤煙主栽品種對主要煙草病害的抗性， 為不同的病害流行地區(qū)、不同地塊選擇合適的烤煙品種提供依據(jù)。[方法]采用田間病圃人工接種誘發(fā)鑒定方法，鑒定了9個烤煙主栽品種對煙草黑脛病、煙草赤星病、TMV、南方根結線蟲病的抗病性。[結果]2008～2012年的抗病性鑒定結果表明，云煙201、YH05和PVH19抗TMV，云煙100和PVH19對煙草赤星病的抗性為抗-中抗，云煙97、云煙98和云煙201抗煙草黑脛病，云煙97、云煙201和YH05對南方根結線蟲的抗病性為抗-中抗。[結論]在TMV病害較重的地區(qū)可選擇云煙201、YH05、PVH19，在赤星病較重的地區(qū)可選擇云煙100和PVH19，試驗所述主栽品種對煙草黑脛病的抗性均較好，而在南方根結線蟲病較重的地區(qū)可選擇云煙97、云煙99、云煙201、YH05。

關鍵詞 烤煙;抗病性;鑒定

中圖分類號 S435.72 "文獻標識碼

A "文章編號 0517-6611（2014）32-11332-03

The Resistance Evaluation of Fluecured Tobacco Cultivars to Several Major Disease

YU Haiqin1，2 "（1. National Tobacco Genetic Engineering Research Center， Key Laboratory of Tobacco Biotechnological Breeding， Yunnan Academy of Tobacco Agricultural Sciences， Kunming， Yunnan 650021; 2. Yunnan Key Laboratory of Biotechnology， Kunming， Yunnan 650021）

Abstract [Objective] To research the resistance of fluecured tobacco cultivars to major diseases and to provide the evidence for tobacco varieties selection in different epidemic area and fields. [Method] The identification and evaluation of 9 tobacco varieties resistant to Black shank， Brown spot， Tobacco mosaic virus （TMV） and Southern rootknot nematode were done by artificial inoculation in the field. [Result] From 2008 to 2012， the results indicated that Yunyan 201， YH05 and PVH19 is resistant to TMV， the resistance of Yunyan 100 and PVH19 to Brown spot were RMR， Yunyan 97， Yunyan 98， Yunyan 201 resistant to Black shank， and the resistance of Yunyan 97， Yunyan 201 and YH05 to southern rootknot nematode were RMR. [Conclusion] The varieties of Yunyan 201， YH05， PVH19 can be chosen in the areas of heavy TMV， in the areas of heavy Brown spot we can choose Yunyan100 and PVH19， the resistance of all of the varieties of tobacco is good to Black shank， while the southern rootknot nematode in areas of heavy clouds can choose Yunyan 97， Yunyan99 ，Yunyan201 and YH05 can be chosen in the area of heavy Southern rootknot nematode.

Key words Fluecured tobacco; Resistance; Identification

基金項目 云南省煙草公司項目（2011YN06，2012BB006）;云南省科技廳項目（2011CT135）。

作者簡介 于海芹（1979- ），女，山東濰坊人，助理研究員，碩士，從事煙草新品種選育工作。

收稿日期 20141010

全面、正確、準確地鑒定作物品種或品種資源的抗病性是作物育種工作的重要內容。近幾年我國自主選育和引進了大量的烤煙新品種，但因為對新品種的抗病性了解甚少，故植煙區(qū)（特別是病害流行區(qū)）在選擇品種時比較盲目。生產(chǎn)上因病害流行造成嚴重的經(jīng)濟損失，如煙草病毒病，自20世紀50年代以來該病先后在日本、美國、我國等世界主產(chǎn)煙區(qū)大面積暴發(fā)流行，給煙草生產(chǎn)造成巨大的經(jīng)濟損失[1-3]，在病害流行的年份由病毒病造成的煙葉產(chǎn)量損失可達30%～50%，個別地塊甚至絕產(chǎn)[4]。據(jù)統(tǒng)計，2003年屬我國煙草病毒病輕發(fā)年，但發(fā)生總面積仍達17.470萬hm2，估計產(chǎn)量損失為5 619.185萬kg，產(chǎn)值損失為50 419.459萬元[5]。因此，研究鑒定烤煙品種的抗病性具有重大意義。

近幾年來中國農業(yè)科學院煙草研究所采用人工接種的方法對922份煙草種質資源進行了CMV的室內苗期抗病性鑒定，篩選出16份高抗種質，165份中抗種質，未發(fā)現(xiàn)免疫種質[6]。中國煙草育種研究南方中心采用人工接種的方法篩選出一批TMV、黑脛病等主要病害的抗性資源，如抗黑脛病的筑波1號、津引1號、落地黃、CokerTobacco、安選791、OX414、H80A432和革新3號等，推薦給育種者選擇利用[7]。陜西省煙草研究所采用溫室苗期接種鑒定的方法對16份煙草種質進行了TMV和CMV的抗病性鑒定，結果表明不同的煙草品種對TMV和CMV的抗病性存在較大差異，對TMV表現(xiàn)免疫的有牛耳煙、8301、臺煙7號、 三生NN，表現(xiàn)抗病的有吉煙5號、雙抗70、大護脖香、秦煙95 4份材料[8]。上述研究多是針對種質資源的抗病性進行鑒定，近幾年我國選育了大量的烤煙新品種，但這些新品種抗病性的綜合評價鮮見報道。為此，筆者采用田間人工接種的方法，鑒定了9個烤煙主栽品種對煙草黑脛病、煙草赤星病、TMV、南方根結線蟲病的抗病性，以期為不同的病害流行地區(qū)、不同地塊選擇品種提供理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 材料

選用全國烤煙主栽品種9個，包括云煙97、云煙98、云煙99、云煙100、云煙105、云煙201、YH05、PVH19和FY119，依據(jù)國家標準：煙草品種抗病性鑒定GB/T 23224-2008 選用抗病性鑒定對照品種（表1）。

表1 抗病性鑒定對照品種

病害類型抗病對照中抗對照感病對照

TMVCoker176革新3號G140

赤星病 凈葉黃-G140

黑脛病 革新3號金星6007小黃金1025、紅花大金元

南方根結線蟲 NC95長脖黃

1.2 試驗設計 于2008～2012年在云南省煙草農業(yè)科學研究院研和基地田間病圃進行。每個品種設3次重復，每重復15株，隨機排列，田間管理參照優(yōu)質煙生產(chǎn)標準執(zhí)行。

1.3 抗病性鑒定方法

通過田間病圃人工接種誘發(fā)鑒定方法，對供試品種進行TMV、赤星病、黑脛病、南方根結線蟲病4種主要病害的抗性鑒定，得出各品種對不同病害的抗性評價。

1.3.1 TMV抗性鑒定方法及病情調查。

為了防止保存期病毒的致病性退化，在使用前15 d轉接復壯一次，備用。于煙苗4～5片真葉時進行噴槍接種，接種前在病毒汁液中加入1%金剛砂，高壓噴射（壓力為69～206 kPa），噴口距接種物20 cm，每株噴接0.5 s，接種后7 d未見發(fā)病再回接一次。煙株保持在25～28 ℃下生長。接種后第7、14、21天調查全部煙株發(fā)病情況[9-10]。

1.3.2 赤星病抗性鑒定方法及病情調查。

對照品種和參鑒品種煙株適當多施氮肥，一般打頂不采收，在全生育期內不使用殺菌劑，殺蟲劑的使用根據(jù)病圃內蟲害發(fā)生種類和程度而定。在發(fā)病較輕年份，進行人工輔助接種。人工接種鑒定在下部葉片開始成熟時進行，使用濃度為105cfu/ml的孢子懸浮液進行噴霧接種。接種后每10 d調查一次，連續(xù)調查3次。每處理定點調查5株，每株調查全部葉片[9-10]。

1.3.3 黑脛病抗性鑒定方法及病情調查。

煙草移至大田成活后（10～20 d）用菌谷接種。接種后若天氣干旱應灌水，以使田間土壤含水量處于飽和狀態(tài)。菌谷制作方法：將谷子煮至約50%谷粒開花，撈出，裝入三角瓶，高壓滅菌1 h。將已培養(yǎng)好的黑脛病菌種接種至滅菌后冷卻的谷子上，然后置于28～30 ℃下培養(yǎng)15～20 d即可。田間病圃采用莖基部菌谷接種法，于團棵期接種，接種量5 g/株，分別于旺長期、現(xiàn)蕾期、成熟期調查病情[9-10]。

1.3.4 南方根結線蟲病抗性鑒定方法及病情調查。

選擇根結線蟲連年危害較重的田塊，在自然發(fā)病條件下鑒定品種對根結線蟲的抗性，采烤末期拔根調查全部煙株的病情[9-10]。

1.4 數(shù)據(jù)處理 病害分級標準及抗性分級標準按國家行業(yè)標準YC/T39-1996規(guī)定執(zhí)行。通過計算鑒定材料群體中個體發(fā)病程度，確定每個鑒定材料的平均病情指數(shù)。計算方法如下：D=（Mi×Si）×100/（N×4）。式中，D為病情指數(shù);Si為病情為i的級值;i為病級數(shù);Mi為病情為i的株數(shù);N為調查總株/葉數(shù)。

根據(jù)病害嚴重度及對照品種的發(fā)病情況，按最后確定的病指，一般將病害分為以下級別：免疫（I），病指為0;抗?。≧），病指25以下;中抗（MR），病指在25.1～50.0;中感（MS），病指在50.1～75.0;感?。⊿），病指75以上。

2 結果與分析

2.1 烤煙主栽品種對主要病害的抗病性鑒定

由表2可知，云煙201對1種病害免疫，抗1種病害，抗-中抗1種病害， PVH19抗1種病害，中抗2種病害，云煙97和YH05抗1

表2 主栽品種各年度抗病性鑒定結果

品種年份TMV病情指數(shù)抗性評價

赤星病病情指數(shù)抗性評價

黑脛病病情指數(shù)抗性評價

南方根結線蟲病病情指數(shù)抗性評價

云煙97200877.08S48.69MR8.33R15.74R

200975.00S97.91S13.33R47.92MR

201082.50S62.84MS23.33R40.77MR

云煙98200872.21MS97.44S23.60R32.14MR

200950.83MS59.42MS14.21R86.46S

云煙99200861.11MS67.01MS40.56MR26.04MR

200979.17S41.71MR20.00R31.25MR

201075.94S24.18R39.29MR43.57MR

云煙100200874.17MS18.60R76.25S43.01MR

200959.44MS18.33R29.17MR67.71MS

201082.20S30.33MR80.90S42.31MR

201182.58S20.88R63.10MS58.10MS

云煙105200838.18MR70.02MS27.59MR--

200984.38S44.33MR26.13MR98.13S

云煙2012008枯斑I66.20MS25.00R38.20MR

2009枯斑I55.60MS15.30R18.50R

2010枯斑I99.81S13.06R35.42MR

YH0520080R46.55MR8.30R8.30R

20092.78R94.75S22.22R15.63R

20100R65.51MS15.00R47.71MR

201115.00R74.96MS29.09MR27.43R

20128.33R53.00MS22.22R62.50MS

PVH19200815.69R47.24MR39.55MR--

20090R44.33MR29.17MR52.95MS

FY119200869.09MS90.48S33.45MR91.67S

200970.67MS70.67MS38.63MR--

201075.11S75.11S42.86MR56.90MS

種病害，抗-中抗1種病害，故云煙201、云煙97、YH05和PVH19的綜合抗性較好。從病害角度看，有1個品種對TMV表現(xiàn)為免疫，2個品種抗TMV;抗-中抗赤星病的品種有1個，中抗赤星病的品種有1個;抗煙草黑脛病的品種有3個，表現(xiàn)為抗-中抗的有2個，表現(xiàn)為中抗的有3個;抗-中抗南方根結線蟲病的品種有3個，中抗南方根結線蟲病的品種有1個，由此看主栽品種的煙草黑脛病抗性好，這可能是由于品種選育過程中，不同世代材料的選株田接種了煙草黑脛病菌的原因，對南方根結線蟲病的抗性次之，對TMV的抗性較好，而對煙草赤星病的抗性一般，故在煙草赤星病發(fā)病較重的煙區(qū)要慎重選擇合適的品種。

2.2 烤煙主栽品種抗病性綜合評價

由表3可知，云煙201、YH05和PVH19表現(xiàn)為抗TMV，其中云煙201對TMV表現(xiàn)為免疫;云煙100對煙草赤星病的抗性表現(xiàn)為抗-中抗， PVH19對煙草赤星病的抗性表現(xiàn)為中抗;云煙97、云煙98、云煙201抗煙草黑脛病，云煙99、YH05抗-中抗煙草黑脛病，云煙105、PVH19和FY119中抗煙草黑脛病;云煙97、云煙201對南方根結線蟲的抗性表現(xiàn)為抗-中抗，云煙99對南方根結線蟲的抗性表現(xiàn)為中抗。

表3 主栽品種抗病性綜合評價

品種TMV煙草赤星病煙草黑脛病南方根結線蟲病

云煙97SMSSRRMR

云煙98MSMSSRMRMS

云煙99MSSMRMSRMRMR

云煙100MSSRMRMRMSMRMS

云煙105MRSMRMSMRS

云煙201IMSSRRMR

YH05RMSSRMRRMR

PVH19RMRMRMS

FY119MSSMSSMRMSS

3 討論

該研究所用的9個品種是近幾年生產(chǎn)上推廣面積較大的品種[11]，通過對9個品種的抗病性進行集中鑒定和總結，為不同煙區(qū)選擇適宜品種提供了參考，特別是病害較重的煙區(qū)。試驗結果表明，大面積種植的品種對煙草黑脛病的抗性較好，同樣生產(chǎn)上大面積種植的云煙85、云煙87和云煙203對煙草黑脛病的抗性也表現(xiàn)為抗;上述3個品種對煙草赤星病的抗性表現(xiàn)為中感-感，上述結果與該試驗結果相同，即對煙草赤星病的抗性普遍較差;云煙85和云煙87中抗南方根結線蟲病，云煙203抗-中抗南方根結線蟲病，也與該試驗結果一致[12-14]。不同地區(qū)合理使用抗病品種的主要目的是充分發(fā)揮其抗病性的遺傳潛能，同時還要防止品種退化，推遲抗病性喪失現(xiàn)象的發(fā)生，延長抗病品種的使用年限[15]。該研究明確了主栽品種的抗病性差異，為植煙者選擇品種提供了參考，但大面積種植抗病品種會導致病原物的稀有小種上升為優(yōu)勢小種，使抗病品種逐漸失去抗性，故在重病區(qū)域應合理布局，延長抗病品種的使用年限，該方面有待于下一步研究。

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