無論是當(dāng)今運(yùn)行速度最快的模塊式全自動(dòng)生化分析儀，還是手工操作用于比色的半自動(dòng)生化分析儀，其原理都是根據(jù)物質(zhì)在紫外、可見光區(qū)產(chǎn)生的特征吸收光譜和朗伯—比爾（Lambert—Beer）定理的原理，用未知濃度的樣品與已知濃度標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)比較或根據(jù)摩爾吸光系數(shù)方法進(jìn)行定量分析的儀器，因此全自動(dòng)生化分析儀相關(guān)的計(jì)量性能要求可采用半自動(dòng)生化分析儀計(jì)量性能要求。

1 探討測(cè)量方法應(yīng)在儀器正常工作條件下進(jìn)行

全自動(dòng)生化分析儀是大型精密檢驗(yàn)設(shè)備，操作復(fù)雜。設(shè)備經(jīng)廠家技術(shù)工程師調(diào)試好后，醫(yī)生就不再對(duì)設(shè)備硬件與軟件方面進(jìn)行實(shí)質(zhì)性的改動(dòng)，所以實(shí)際測(cè)量全自動(dòng)生化分析儀必須考慮上述情況，在儀器正常工作條件下進(jìn)行測(cè)量。

2 使用的標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)

探討測(cè)量方法測(cè)量全自動(dòng)生化分析儀使用中國計(jì)量院研制生產(chǎn)的二種標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)：第一種是生化分析儀檢定用溶液標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)（BW2025）、第二種是用于檢定全自動(dòng)生化分析儀的標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)。

3 測(cè)量項(xiàng)目

3.1示值誤差與重復(fù)性

此項(xiàng)測(cè)量用第二種標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)。在儀器正常工作條件下，分別選擇340nm和505nm波長，用1號(hào)或2號(hào)健康人血清標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)（用1.0ml二次水溶解）作為樣本測(cè)量丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶和葡萄糖各6次，計(jì)算測(cè)量結(jié)果的示值誤差（[ΔC]）和重復(fù)性（以相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差RSD表示）。

[RSD][=1Ii=1nIi-I2n-1×100%]

式中：[Ii]——單次測(cè)量值；[I]——測(cè)量平均值；[n]——測(cè)量次數(shù)。

技術(shù)要求參照全自動(dòng)生化分析儀標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)使用說明進(jìn)行。

3.2線性誤差

測(cè)量用第一種標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)。在儀器正常工作條件下，選擇505nm波長，將設(shè)備原有試劑倉中的試劑盒取出，將質(zhì)量濃度為2.0g/L的標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)放入干凈的試劑盒中作為測(cè)量用試劑（雙試劑用雙試劑盒），樣本盒中同樣加入2.0g/L的標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)，采用全自動(dòng)生化分析儀分析樣本時(shí)的工作程序測(cè)量標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的吸光度值，重復(fù)測(cè)量3次。由于全自動(dòng)生化分析儀的反應(yīng)原理是樣本與試劑充分反應(yīng)后在比色池中進(jìn)行比色，與相應(yīng)的標(biāo)準(zhǔn)值進(jìn)行比較。試劑與樣本是同一標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)，因此顯示的測(cè)量結(jié)果濃度值很小或負(fù)值。但我們不看濃度值，需要的是標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的吸光度值。全自動(dòng)生化分析儀選擇505nm波長采用的是終點(diǎn)法，讀取吸光度值需要在相應(yīng)的菜單里找尋，以AU640型全自動(dòng)生化分析儀為例：

點(diǎn)擊[[Reaction]→[Monitor]→[Normal]→[Routine]→date]，[date]為標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的樣本號(hào)，讀取反應(yīng)結(jié)束（終點(diǎn)）時(shí)的吸光度值。

測(cè)量結(jié)束后，按上述方法依次測(cè)量質(zhì)量濃度為4.0g/L、6.0g/L、8.0g/L、10.0g/L的標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的吸光度值，測(cè)量結(jié)果見表1。

[Δi=Ki-KK×100%]其中：[K=15i=15Aici=0.0754A]

一般進(jìn)口全自動(dòng)生化分析儀讀取吸光度值參照上述方法，國產(chǎn)全自動(dòng)生化分析儀讀取吸光度值在【反應(yīng)曲線】菜單中。時(shí)間——吸光度曲線如下圖所示：

[t1]時(shí)刻加入試劑，[t2]時(shí)刻加入樣本，然后攪拌并反應(yīng)，之后測(cè)量反應(yīng)液的吸光度，在[t3]時(shí)刻反應(yīng)達(dá)到終點(diǎn)，讀取[t3]時(shí)刻的吸光度值（注：有些全自動(dòng)生化分析儀的吸光度值是列表顯示）。

技術(shù)要求參照J(rèn)JG464—2011《半自動(dòng)生化分析儀》檢定規(guī)程中的線性誤差項(xiàng)進(jìn)行。

3.3樣品交叉污染率[C0]

按照全自動(dòng)生化分析儀標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)使用說明進(jìn)行樣品交叉污染率[C0]的測(cè)量，筆者認(rèn)為是不可行的：因?yàn)榘凑杖詣?dòng)生化分析儀標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)使用說明：選擇340nm波長測(cè)量葡萄糖濃度，按照葡萄糖己糖激酶法要求進(jìn)行。而醫(yī)院現(xiàn)不用葡萄糖己糖激酶法測(cè)量葡萄糖濃度，且不配備葡萄糖己糖激酶法的試劑?，F(xiàn)在醫(yī)院測(cè)量葡萄糖濃度選擇505nm波長，按照氧化酶法要求進(jìn)行，因此此項(xiàng)按全自動(dòng)生化分析儀標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)使用說明無法進(jìn)行測(cè)量。

測(cè)量方法：

此項(xiàng)測(cè)量用第二種標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)。在儀器正常工作條件下，選擇505nm波長，分別用二次水和3號(hào)健康人血清標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)（用1.0ml二次水溶解）作為樣本，交替測(cè)量二次水和葡萄糖濃度，先對(duì)二次水連續(xù)測(cè)量四次，接著對(duì)3號(hào)健康人血清標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)溶液連續(xù)測(cè)量四次，最后再對(duì)二次水連續(xù)測(cè)量四次，得到2組低值與1組高值共計(jì)3組測(cè)量值，按照全自動(dòng)生化分析儀標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)使用說明中的公式計(jì)算樣品交叉污染率[C0]。技術(shù)要求參照全自動(dòng)生化分析儀標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)使用說明進(jìn)行。

按照全自動(dòng)生化分析儀標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)使用說明，選擇340nm波長進(jìn)行摩爾吸光系數(shù)[ε]示值誤差的測(cè)量，筆者認(rèn)為是不可行的，原因與第3、3項(xiàng)樣品交叉污染率[C0]的測(cè)量相同。