溫國(guó)封 王雙樂(lè) 李創(chuàng)偉 林炘 楊楚

【摘要】目的：檢測(cè)細(xì)胞周期素D1在喉癌組織中的表達(dá)以及與臨床特征之間的關(guān)系。方法：采用免疫組織化學(xué)染色SP法檢測(cè)46例喉癌組織標(biāo)本及20例聲帶息肉組織對(duì)照標(biāo)本中CyclinD1的表達(dá)，并應(yīng)用SPSS16.0統(tǒng)計(jì)軟件包進(jìn)行相關(guān)臨床和病理參數(shù)分析。結(jié)果：CyclinD1在喉癌組織及聲帶息肉組織中的高表達(dá)率分別為52.2%與5.0%，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P=0.001）。CyclinD1的表達(dá)與喉癌臨床分期、治療后有無(wú)復(fù)發(fā)或轉(zhuǎn)移密切相關(guān)，不同組別表達(dá)水平差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P值分別為0.012、0.027）。CyclinD1的表達(dá)與患者的年齡無(wú)相關(guān)性，不同組別表達(dá)水平的差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。結(jié)論：CyclinD1的高表達(dá)可促進(jìn)喉癌細(xì)胞的侵襲和轉(zhuǎn)移。

【中圖分類號(hào)】R-0 【文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼】B 【文章編號(hào)】1671-8801（2014）10-0344-01

喉癌是頭頸部常見(jiàn)惡性腫瘤。它的發(fā)生、發(fā)展、轉(zhuǎn)移是多基因共同作用的結(jié)果。CyclinD1作為G1期細(xì)胞周期素，促進(jìn)細(xì)胞分裂或轉(zhuǎn)化。CyclinD1表達(dá)失控，可導(dǎo)致腫瘤發(fā)生。本研究通過(guò)免疫組織化學(xué)SP法檢測(cè)喉鱗癌中CyclinD1的表達(dá)情況，分析CyclinD1在喉癌組織中的表達(dá)以及與臨床特征之間的關(guān)系，以期為臨床正確評(píng)估喉鱗癌患者的預(yù)后及指導(dǎo)治療提供客觀依據(jù)。

1 資料與方法

1.1 臨床資料

選取46例1999年～2005年間在我院接受治療的原發(fā)性喉鱗狀細(xì)胞癌患者。所有患者均有完整的臨床資料和病理資料。其中男性45例（97.83%），女性1例（2.17%）；發(fā)病年齡在43～70歲，發(fā)病年齡<50歲9例（19.57%），≥50歲37例（80.43%）。T1- T2期19例（41.30%），T3期22例（47.83%），T4期5例（10.87%）；治療前無(wú)頸淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移（N0）43例（93.48%），有頸淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移3例（6.52%）。治療后無(wú)復(fù)發(fā)或轉(zhuǎn)移28例（48.98%）、有復(fù)發(fā)或轉(zhuǎn)移18例（51.02%）。全部病例采用手術(shù)治療。

1.2 試劑與方法

兔抗人Cyclin D1單克隆抗體，購(gòu)自福州邁新生物技術(shù)開發(fā)有限公司。采用SP法，實(shí)驗(yàn)步驟按說(shuō)明書進(jìn)行。用20例聲帶息肉組織對(duì)照。

1.3 結(jié)果判斷

Cyclin D1陽(yáng)性顆粒主要定位于細(xì)胞核，呈棕黃色。參照半定量評(píng)分方法，分為低表達(dá)和高表達(dá)。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

應(yīng)用SPSS 16.0統(tǒng)計(jì)軟件包對(duì)所得實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。兩樣本率的比較采用行×列χ2檢驗(yàn)；以P值<0.05認(rèn)為存在統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

CyclinD1在聲帶息肉組織中高表達(dá)率為5%（1/20）；在喉癌組織中高表達(dá)率為52.2%（24/46）。CyclinD1的表達(dá)水平在聲帶息肉組織與喉癌組織二者間比較，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P=0.001）；在喉癌患者臨床分期中， Ⅰ～Ⅱ期、Ⅲ、Ⅳ期中高表達(dá)率分別為26.2%、68.2%和80.0%，表達(dá)水平差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P=0.012）；在治療后有復(fù)發(fā)或轉(zhuǎn)移組中，其高表達(dá)率明顯高于無(wú)復(fù)發(fā)或轉(zhuǎn)移組，分別為35.7%和77.8%，表達(dá)水平差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P=0.027）。CyclinD1表達(dá)水平在患者年齡分組中的差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

3 討論

Cyclin D1是一種細(xì)胞周期素，在CDK4或CDK6的協(xié)助下，最終驅(qū)動(dòng)細(xì)胞由G1期進(jìn)入S期， 促進(jìn)細(xì)胞分裂或轉(zhuǎn)化。一旦Cyclin D1表達(dá)失控， 將引起細(xì)胞增殖周期失調(diào)， 從而導(dǎo)致腫瘤發(fā)生。國(guó)內(nèi)外眾多研究已證實(shí)Cyclin D1與惡性腫瘤演進(jìn)有密切的關(guān)系。郭艷萍[1]研究發(fā)現(xiàn)CychnD1蛋白可作為臨床診斷宮頸鱗癌的發(fā)展，早期診斷和科學(xué)評(píng)價(jià)腫瘤預(yù)后、指導(dǎo)臨床治療的生物學(xué)觀察指標(biāo)。Khoo等[2]研究表明，CyelinD1在甲狀腺乳頭狀癌中呈顯著過(guò)表達(dá)，并且與腫瘤的轉(zhuǎn)移及預(yù)后相關(guān)。Yu等[3]研究顯示在非小細(xì)胞肺癌、乳腺癌等腫瘤組織中CyclinD1的高表達(dá)增強(qiáng)了腫瘤組織的侵襲力及轉(zhuǎn)移能力。目前國(guó)內(nèi)外對(duì)CyclinD1的表達(dá)與腫瘤關(guān)系的研究仍較少。本實(shí)驗(yàn)的結(jié)果表明，CyclinD1表達(dá)在喉癌組織中與聲帶息肉組織相比，表達(dá)水平差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P=0.027）；在TNM臨床分期中，TNM分期越高CyclinD1表達(dá)水平就越高，Ⅰ～Ⅱ期、Ⅲ、Ⅳ期中高表達(dá)率分別為25.0%、34.6%和73.3%，表達(dá)水平差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P=0.026）；提示CyclinD1的表達(dá)可能與喉組織的惡性轉(zhuǎn)化及腫瘤的發(fā)展密切相關(guān)。在喉癌治療后有復(fù)發(fā)或轉(zhuǎn)移組中CyclinD1表達(dá)水平明顯高于無(wú)復(fù)發(fā)或轉(zhuǎn)移組，其高表達(dá)率分別為60.0%和29.2%，表達(dá)水平差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P=0.030），提示CyclinD1的表達(dá)在喉癌的侵襲和轉(zhuǎn)移中發(fā)揮重要作用。

參考文獻(xiàn)：

[1]郭艷萍.PTEN、CyclinD1蛋白在宮頸鱗癌中的表達(dá).中國(guó)實(shí)用醫(yī)藥，2011， 6：55-56.

[2]Khoo ML，Ezzat S，F(xiàn)reeman JL，et a1.CyclinD1 protein experssion predicts metastatic behavior in thyroid papillary microcarcinomas butis not associated wiht gene ampliifcations.J Clin Endocrinol Metab，2002， 87：1810-1813.

[3]Yu Z，Paul M，Weinberger PM，et a1.Cyclin D1 is avaluable prognostic marker in oropharyngeal squamous cell carcinoma.Clin Cancer Res，2005， 11：1160-1166.