陳艷 郭天坤 王利華

【摘要】目的：酶聯(lián)免疫檢測(cè)的灰區(qū)應(yīng)該有一個(gè)可操作性“規(guī)定”，在沒(méi)有一個(gè)統(tǒng)一規(guī)定的情況下，我們的實(shí)驗(yàn)室如何去規(guī)范操作，是我們實(shí)驗(yàn)室應(yīng)該做的一件大事，不認(rèn)真對(duì)待灰區(qū)的出現(xiàn)，就會(huì)引發(fā)和滋生。方法：通過(guò)114292例酶聯(lián)免疫檢測(cè)，總結(jié)出來(lái)灰區(qū)出現(xiàn)如何處理的路子-方法。結(jié)果：根據(jù)總結(jié)的方法完成制度管理和SOP文件，按照?qǐng)?zhí)行這些方法和文件，讓我們?cè)诨覅^(qū)出現(xiàn)時(shí)能夠正確處理，近兩年來(lái)，我們按照科室制定的制度執(zhí)行操作，沒(méi)有在灰區(qū)的問(wèn)題上出現(xiàn)誤差和失誤。

【關(guān)鍵詞】灰區(qū)；復(fù)檢；標(biāo)本

【Abstract】objective： enzyme-linked immune detection of grey area should have a maneuverability ＼"rules＼"， in the absence of a unified regulation， how to standardize the operation， in our laboratory is one of the lab should do something， not serious about the grey area， will cause and breeding. Methods： 114292 cases by enzyme-linked immune detection， summarized out way - method of how to deal with the grey area. Results： the method to complete the system management according to the summary and SOP files， according to implement these methods and file， let us can correctly handle， in the presence of grey area in the past two years， we according to the system performs operations， the department did not have errors and mistakes in the grey area issues.

【key words 】gray area re-inspection specimens

【中圖分類(lèi)號(hào)】R722.12 【文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼】B【文章編號(hào)】1004-4949（2014）10-0021-02

酶聯(lián)免疫檢測(cè)，這個(gè)定性試驗(yàn)，經(jīng)過(guò)多年的實(shí)驗(yàn)室應(yīng)用，為檢驗(yàn)事業(yè)的發(fā)展、為免疫性疾病患者解決了不可磨滅的功勞，也為醫(yī)務(wù)工作者爭(zhēng)得了名譽(yù)。但對(duì)于檢驗(yàn)工作者，也帶來(lái)了一些不好解決的難題—灰區(qū)[1] [2] [3]問(wèn)題；酶聯(lián)免疫檢測(cè)結(jié)果報(bào)告，按照相關(guān)規(guī)定，只能出具陰性或者陽(yáng)性報(bào)告，模棱兩可的報(bào)告確實(shí)難倒了檢驗(yàn)工作者。用ELISA方法檢測(cè)的各種免疫試驗(yàn)，如乙肝兩對(duì)半、丙型肝炎、艾滋病、丁肝、戊肝、ANA、甲肝等，都存在著灰區(qū)的問(wèn)題，我們?nèi)绾卧诠ぷ魃希瑢?duì)這個(gè)問(wèn)題進(jìn)行分析處理，我們做了這方面的研究分析。

1、對(duì)象與方法

1.1、研究對(duì)象

選擇2012年至2013年，兩年在我院的乙肝表面抗原48997例、丙型肝炎抗體檢測(cè)29230例、艾滋病抗體檢測(cè)31034例、丁型肝炎抗體483例、戊型肝炎抗體檢測(cè)661例、甲型肝炎抗體檢測(cè)1110例，ANA2777人次，檢測(cè)樣本共計(jì)114292例。

1.2、方法

其中乙肝兩對(duì)半是用達(dá)安的時(shí)間分辨檢測(cè)的，灰區(qū)相對(duì)要少些；ANA采用歐蒙酶聯(lián)免疫檢測(cè)試劑盒；其他項(xiàng)目全部采用北京萬(wàn)泰的酶聯(lián)免疫檢測(cè)試劑盒。

2、結(jié)果

通過(guò)兩年的檢測(cè)，共檢測(cè)出灰區(qū)157例，其中乙型肝炎表面抗原36例，采用的是時(shí)間分辨檢測(cè)，檢測(cè)灰區(qū)值最高0.58，最低0.43。下面的項(xiàng)目采用的酶聯(lián)免疫檢測(cè)；HIV11例，丙型肝炎抗體測(cè)定12例，丁肝4例，戊肝6例，甲肝11例，ANA77例；檢測(cè)的SCO值最高1.1453，最低0.8571。

3、討論

3.1、酶聯(lián)免疫法和時(shí)間分辨熒光分析法都存在灰區(qū)，灰區(qū)如何處置，我們通過(guò)檢測(cè)數(shù)據(jù)；把乙型肝炎表面抗原設(shè)定為0.425～0.575ng/L為灰區(qū)，乙肝表面抗原灰區(qū)的結(jié)果應(yīng)檢測(cè)其HBe抗體和HBc抗體，特別是后者，如果HBc抗體是陰性的，則HBsAg的陽(yáng)性基本不太可能，可以發(fā)陰性報(bào)告；如是陽(yáng)性，則：將標(biāo)本10000g，10min離心，然后復(fù)檢[4] [5]（如果離心機(jī)沒(méi)有g(shù)的標(biāo)注，用10000轉(zhuǎn)/min的高速離心也可達(dá)到這個(gè)目的）。如果高速離心后復(fù)檢為陰性，應(yīng)報(bào)告陰性結(jié)果，若仍為弱陽(yáng)性：應(yīng)換用另一款比較公認(rèn)的試劑，比如雅培Architect的化學(xué)發(fā)光法試劑，重新檢測(cè)；如果沒(méi)有這樣的進(jìn)口試劑，用其他廠家的HBsAg檢測(cè)一下，如果是陰性，可發(fā)陰性報(bào)告，如果也是陽(yáng)性，則需要慎重對(duì)待，可以進(jìn)行血清HBV PCR檢測(cè)，當(dāng)然PCR陽(yáng)性的話基本就可以發(fā)送HBsAg陽(yáng)性報(bào)告，而PCR陰性也不能排除HBsAg陽(yáng)性可能。所以，最后這種情形下確認(rèn)HBsAg確實(shí)比較復(fù)雜?？傊?，乙肝的診斷是一個(gè)很考驗(yàn)臨床知識(shí)的項(xiàng)目，要綜合考慮，不可過(guò)于匠氣，給患者帶來(lái)不必要的負(fù)擔(dān)。.

3.2、其他的酶聯(lián)免疫法設(shè)定為S/CO在0.85～1.15之間為灰區(qū)，在灰區(qū)內(nèi)的檢測(cè)數(shù)據(jù)進(jìn)行復(fù)查，根據(jù)復(fù)查結(jié)果進(jìn)行判斷，如果復(fù)查仍然在灰區(qū)，擔(dān)心標(biāo)本污染；為了嚴(yán)謹(jǐn)，保證結(jié)果質(zhì)量，體現(xiàn)全面質(zhì)量管理的理念。寫(xiě)上S/CO值，告訴臨床醫(yī)生一定要注意該病人了；模板：“該標(biāo)本檢測(cè)結(jié)果為弱陽(yáng)性，S/CO=*.**，建議結(jié)合臨床情況診斷或選擇其他方法做確認(rèn)試驗(yàn)。”不同項(xiàng)目也有不同的描述，如果是有診斷意義的指標(biāo)，備注后面可以說(shuō)明定期復(fù)查，建議一個(gè)月后復(fù)查之類(lèi)的。 門(mén)診患者，一是向患者說(shuō)明，重抽標(biāo)本復(fù)查。二是，如果患者不愿意重新采血復(fù)查，應(yīng)在檢驗(yàn)報(bào)告單上說(shuō)明三個(gè)月后或定期復(fù)查。

3.3、科室根據(jù)ISO15189 [6]的有關(guān)規(guī)定，制定了SOP文件，寫(xiě)清楚了3.1的內(nèi)容和復(fù)查操作規(guī)定。

綜上所述，按照?qǐng)?zhí)行這些方法和文件，讓我們?cè)诨覅^(qū)出現(xiàn)時(shí)能夠正確處理；近兩年來(lái)，我們按照科室制定的制度執(zhí)行操作，沒(méi)有在灰區(qū)的問(wèn)題上出現(xiàn)誤差和失誤。

參考文獻(xiàn)

[1] Kearney H， Schneider T， Yiannakas MC， Altmann DR，Wheeler-Kingshott CA， Ciccarelli O， Miller DH.J Neurol Neurosurg Psychiatry. 2014 Aug 5. pii： jnnp-2014-308241. doi： 10.1136/jnnp-2014-308241.

[2] Riera R， Becerro MA， Stuart-Smith RD， Delgado JD， Edgar GJ.Mar Pollut Bull. 2014 Aug 1. pii： S0025-326X（14）00450-0. doi： 10.1016/j.marpolbul.2014.07.014.

[3] Castellano G， Manzano ML.Gastroenterol Hepatol. 2014 Jul；37 Suppl 2：15-21. doi： 10.1016/S0210-5705（14）70064-0. Spanish.

[4] Leucht S， Helfer B， Hartung B.Cochrane Database Syst Rev. 2014 Jan 15；1：CD002832. doi： 10.1002/14651858.CD002832.pub3. Review.

[5] Hao Q， Shi X， Zhang X， Zhu J.Zhongguo Yi Liao Qi Xie Za Zhi. 2013 Sep；37（5）：373-5， 378. Chinese.