肖淑賢等

摘要[目的]研究黨參種子的檢驗(yàn)方法及質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)。[方法]從山西、甘肅和陜西3省6縣共收集和調(diào)查27份黨參種子，并參照《農(nóng)作物種子檢驗(yàn)規(guī)程》GB/T 3543.1-7，1995對(duì)其凈度分析、千粒重、發(fā)芽率、生活力測(cè)定、含水率等指標(biāo)的檢驗(yàn)方法進(jìn)行研究，制定黨參種子最佳質(zhì)量檢驗(yàn)方法。并根據(jù)制定的檢驗(yàn)方法和規(guī)程，對(duì)不同產(chǎn)區(qū)的27份黨參種子樣品進(jìn)行質(zhì)量檢驗(yàn)，采用K類中心聚類法制定種子質(zhì)量分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)。[結(jié)果]黨參種子喜涼不喜熱，適合栽培在天氣涼爽的地區(qū)，發(fā)芽的最適溫度應(yīng)是25 ℃，最適發(fā)芽床是紗布床；最適宜染色條件為染色溫度40 ℃，TTC濃度0.5%，染色時(shí)間4 h；在聚類分析基礎(chǔ)上，將凈度、千粒重、含水率、活力、發(fā)芽率5項(xiàng)指標(biāo)作為質(zhì)量分級(jí)指標(biāo)，將黨參種子質(zhì)量可分為3級(jí)標(biāo)準(zhǔn)，活力和發(fā)芽率差異明顯，成為分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)的最重要因素，其次是凈度、千粒重和含水率。[結(jié)論]該研究為黨參規(guī)范化栽培和產(chǎn)業(yè)化發(fā)展提供了重要依據(jù)。

關(guān)鍵詞 黨參（RADIX CODONOPSIS）；種子；檢驗(yàn)規(guī)程；分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)

中圖分類號(hào)S567文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼A文章編號(hào)0517-6611（2014）14-04286-05

The Study of Seed Testing Method and Quality Standard on Codonopsis pilosula

XIAO Shuxian et al （Shanxi Zhendong Genuine Medicinal Materials Development Co. Ltd， Changzhi， Shanxi 047100）

Abstract[Objective] To study inspection method and quality standard of Codonopsis pilosula seeds. [Method] 27 Codonopsis pilosula seeds were collected and investigated in six counties of Shanxi， Gansu and Shaanxi Province. This article research the test methods of the moisture content， 1 000grain weight， germination rate， determination of life force according to the crop seed inspection procedures of GB/T 3543.1 7 1995 in order to formulate C. pilosula seeds best quality inspection methods. And according to the test methods and regulations， test quality of C. pilosula seeds of the 27 different regions was conducted. It is used to establish seed quality classification standard with K class center clustering method in order to provide important basis for C. pilosula standardization cultivation and industrialization development. [Result] The optimal germination temperature of C. pilosula seeds is 25 ℃， the optimal germination bed is etamine bed； the optimal dyeing condition is temperature 40℃， TTC concentration 0.5%， time 4 h； On the basis of clustering analysis， cleanliness， 1000 grain weight， moisture content， germination rate， vitality were used as quality classification index， the quality of C. pilosula seeds were divided into 3 level standard， germination rate and life force are the most important factors， purity， 1 000grain weight and moisture content rank the second place. [Conclusion] The study can provide important basis for C. pilosula standardization cultivation and industrialization development.

Key words Codonopsis pilosula； Seeds； Inspection procedures； The classification standard

黨參（RADIX CODONOPSIS）為常用中藥，味甘性平，具有補(bǔ)中益氣和健脾益肺之功能，用于治療脾肺虛弱、氣短心悸、虛喘咳嗽、食少便搪和內(nèi)熱消渴等癥[1]，并常作為人參的替代品。中國(guó)藥典（2010版一部）收載有黨參[Codonopsis pilosula（Franch.）Nannf.]、川黨參（Codonopsis tangshen Oliv.）和素花黨參[Codonopsis pilosula Nannf.var.modesta （Nannf.）L.T. Shen][1]。黨參廣泛分布于全國(guó)各地，并有大量栽培，是中藥黨參最主要的植物來(lái)源，主產(chǎn)區(qū)為山西、甘肅和四川等[2-3]。素花黨參僅分布于四川、甘肅和陜西交界處，以栽培為主，絕大部分出口至東南亞一小部分內(nèi)銷[3]；川黨參主要分布于重慶和湖北西部。市場(chǎng)上缺乏種子質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)、種子質(zhì)量參差不齊，而種子檢驗(yàn)是保證種子質(zhì)量的重要措施。筆者參照《農(nóng)作物種子檢驗(yàn)規(guī)程》GB/T3543.2-7，1995對(duì)黨參種子的檢驗(yàn)方法及至質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行研究，以期為黨參人工種植和野生資源保護(hù)提供理論依據(jù)。

1材料與方法

1.1 材料

1.1.1 研究對(duì)象。供試材料為2012年11月份和2013年2月份在山西省、陜西省和甘肅省收集的黨參種子共27份。種子收集后采用紙袋包裝置陰涼干燥處備用，來(lái)源見(jiàn)表1。試驗(yàn)于2013年3月1日在山西振東道地藥材開發(fā)有限公司實(shí)驗(yàn)室內(nèi)進(jìn)行。

1.2方法

1.2.1 黨參種子凈度試驗(yàn)。按照《農(nóng)作物種子檢驗(yàn)規(guī)程》GB/T 3543.3中的凈度分析，先隨機(jī)選取3個(gè)不同產(chǎn)地的黨參種子9份，每個(gè)產(chǎn)地重復(fù)3次。種子凈度分析試驗(yàn)所需試樣量應(yīng)至少包含2 500粒種子（1.000 g左右），將稱重后的試樣借助篩子、放大鏡等在凈度分析臺(tái)上分離成干凈種子和一般雜質(zhì)兩種成分后分別稱重，以g表示，計(jì)算凈種子質(zhì)量百分率、雜質(zhì)質(zhì)量百分率。凈度分析后的增失差（凈度分離后的各成分之和與原始重量之差）不得超過(guò)5%，若超過(guò)允許誤差，必須重新進(jìn)行試驗(yàn)。按照此分析方法，對(duì)27份種子進(jìn)行凈度分析。

1.2.2 黨參種子千粒重試驗(yàn)。隨機(jī)選取3個(gè)產(chǎn)地的黨參種子9份，每個(gè)產(chǎn)地重復(fù)3次。先采用百粒法、五百粒法、千粒法進(jìn)行測(cè)定，即從已經(jīng)測(cè)定凈度的樣品中隨機(jī)數(shù)出100、500、1 000粒種子，進(jìn)行稱重，以g表示，即得百粒重、五百粒重、千粒重。種子的變異系數(shù)不超過(guò)4%，否則重新進(jìn)行試驗(yàn)。

1.2.3 黨參種子發(fā)芽試驗(yàn)。

1.2.3.1 發(fā)芽溫度的篩選。設(shè)置15、20、25和30 ℃ 4種溫度下處理，至恒溫箱內(nèi)光照培養(yǎng)，每個(gè)處理100粒種子，設(shè)3個(gè)重復(fù)[4]。發(fā)芽床采用規(guī)格一致的培養(yǎng)皿，112 ℃高壓滅菌后，皿底平鋪3層濾紙，沿培養(yǎng)皿邊緣加蒸餾水，以傾斜培養(yǎng)皿無(wú)水滲出為度。每隔12 h澆水1次，每隔24 h觀察記載發(fā)芽種子數(shù)，以胚根突破種皮1 mm作為種子發(fā)芽的標(biāo)準(zhǔn)，篩選出最適宜的發(fā)芽溫度[5]。

1.2.3.2 發(fā)芽床的篩選方法。按照試驗(yàn)篩選的最適宜的溫度，在濾紙床、紗布床、脫脂棉床、海綿床和砂床5個(gè)不同發(fā)芽床上對(duì)甘肅省定西市隴西縣首陽(yáng)鎮(zhèn)的種子進(jìn)行發(fā)芽試驗(yàn)[5]。每個(gè)處理100粒種子，設(shè)3次重復(fù)，至恒溫箱內(nèi)光照培養(yǎng)。培養(yǎng)過(guò)程中每隔12 h澆1次蒸餾水，每隔24 h記錄發(fā)芽種子數(shù)，直至發(fā)芽結(jié)束。

紙床是在規(guī)格一致的培養(yǎng)皿中鋪3層濾紙，并用蒸餾水濕潤(rùn)，按照均等的距離擺好種子；紗布床是在規(guī)格一致的培養(yǎng)皿中鋪3層紗布，并有蒸餾水濕潤(rùn)，按照均等的距離擺好種子；脫脂棉床是在規(guī)格一致的培養(yǎng)皿中鋪1 cm厚脫脂棉，并有蒸餾水濕潤(rùn)，按照均等的距離擺好種子；海綿床是在規(guī)格一致的培養(yǎng)皿中鋪1 cm厚海綿，并有蒸餾水濕潤(rùn)，按照均等的距離擺好種子；砂床是在規(guī)格一致的培養(yǎng)皿中鋪砂子，再加蒸餾水，砂子與水的比例是4∶1，按照均等的距離擺好種子。

2.3.3 黨參種子發(fā)芽率測(cè)定。由表2可知，11號(hào)（山西省長(zhǎng)治市平順縣杏城鎮(zhèn)玉峽關(guān)村）發(fā)芽率最高，為93.67%，2號(hào)、10號(hào)、20號(hào)和27號(hào)黨參種子不發(fā)芽。不同產(chǎn)地的黨參種子平均發(fā)芽率為72.58%。由表3可知，山西地區(qū)的種子的平均發(fā)芽率遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于甘肅省。山西省的種子最高發(fā)芽率為78.98%，最低是0，平均發(fā)芽率為78.97%，各地方種子的發(fā)芽率差異極顯著（P<0.01）。而甘肅省的種子其最高發(fā)芽率也高達(dá)87.39%，最低僅有6.15%，平均發(fā)芽率為55.59%，各地種子的發(fā)芽率差異明顯?；谏轿魇「拭C省兩地在種植過(guò)程中均噴灑了壯根靈[11]，所以造成山西地區(qū)（10、20號(hào)）、甘肅地區(qū)（2號(hào)）、陜西地區(qū)（27號(hào)）種子發(fā)芽率低且參差不齊的原因可能是因?yàn)槭占瘯r(shí)參雜了陳種子，或者是品種和當(dāng)?shù)貧夂虻仍蛟斐伞?/p>

2.4黨參種子活力測(cè)定 由表7可知，40 ℃下的黨參種子著色率明顯高于35和30 ℃下的著色率。溫度為40 ℃時(shí)，TTC濃度為0.5%時(shí)黨參種子著色率高于0.1%和1.0%濃度下的著色率。所以，黨參種子最適宜染色條件為：染色溫度40 ℃，TTC濃度0.5%，染色時(shí)間4 h。

由表2可知，不同產(chǎn)生黨參種子著色率不同，12號(hào)（山西省長(zhǎng)治市平順縣羊老巖鄉(xiāng)門樓嶺村）著色率最高，為94.84%，2號(hào)（甘肅省定西市臨洮縣陳家嘴鎮(zhèn)）著色率最低，為6.15%，平均著色率為69.20%。

2.5黨參種子含水率試驗(yàn) 選取甘肅省定西市隴西市首陽(yáng)鎮(zhèn)的黨參種子采用高溫烘干法測(cè)定含水率。由表8可知，在130 ℃溫度下測(cè)定的含水率高于105 ℃，而在130 ℃烘干所需要時(shí)間較短，故采用130 ℃烘干測(cè)定含水率。由表2可知，采用130 ℃恒重烘干法測(cè)定的不同產(chǎn)地的黨參種子含水率存在顯著差異。黨參種子含水率平均值為6.21%，11號(hào)（山西省長(zhǎng)治市平順縣杏城鎮(zhèn)玉峽關(guān)村）含水率最高，為6.79%；13號(hào)（山西省晉城市陵川縣六泉鄉(xiāng)六泉村）含水率最低，為5.64%。

3結(jié)論與討論

通過(guò)對(duì)甘肅省、山西省、陜西省27個(gè)地區(qū)的黨參種子發(fā)芽最適條件研究，所得主要結(jié)論如下：黨參種子喜涼不喜熱，適合栽培在天氣涼爽的地區(qū)，發(fā)芽的最適溫度應(yīng)是25 ℃；最適發(fā)芽床都是紗布床；山西黨參種子平均發(fā)芽率比甘肅地區(qū)的黨參種子發(fā)芽率高出23.38%，但是現(xiàn)在山西地區(qū)黨參的種植量在逐年下降，所以為了提高黨參產(chǎn)量，應(yīng)該考慮發(fā)展山西的黨參種植。最適宜染色條件為染色溫度40 ℃，TTC濃度0.5%，染色時(shí)間4 h。

在聚類分析基礎(chǔ)上，將凈度、千粒重、含水率、活力、發(fā)芽率5項(xiàng)指標(biāo)作為質(zhì)量分級(jí)指標(biāo)，將黨參種子質(zhì)量可分為3級(jí)標(biāo)準(zhǔn)，活力和發(fā)芽率差異明顯，成為分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)的最重要因素，其次是凈度、千粒重、含水率。1級(jí)標(biāo)準(zhǔn)種子千粒重不小于0.31 g，發(fā)芽率不小于87%，活力不小于84%，凈度不小于94 g，含水率小于6.12%；2級(jí)標(biāo)準(zhǔn)種子千粒重0.29～0.30 g，發(fā)芽率81%～86%，活力73%～83%，凈度92～93 g，含水率6.13%～6.23%；3級(jí)標(biāo)準(zhǔn)種子千粒重0.26～0.28 g，發(fā)芽率50%～80%，活力60%～72%，凈度88～91 g，含水率6.13%～6.23%。

參考文獻(xiàn)

[1] 國(guó)家藥典委員會(huì).中國(guó)藥典.一部[S].北京：中國(guó)醫(yī)藥科技出版社，2010：264.

[2] 畢紅艷.黨參種質(zhì)資源的評(píng)價(jià)研究[D].北京：中國(guó)醫(yī)學(xué)科學(xué)院藥用植物研究所，2007：1-55.

[3] 何先元，陳媛媛，許晉芳，等.素花黨參多糖的超聲提取和含量測(cè)定[J].農(nóng)技服務(wù)，2009，26（11）：135.

[4] 孫年喜，彭銳，李隆云，等.川黨參種子發(fā)芽檢驗(yàn)規(guī)程的研究[J].中國(guó)中藥雜志，2008，33（11）：1246-1248.

[5] 蘇寧寧，張麗萍，王艷芳，等.黨參種子發(fā)芽率調(diào)查研究[J].中國(guó)農(nóng)學(xué)通報(bào)，2012，28（4）：294-298.

[6] 顏啟傳.種子檢驗(yàn)原理和技術(shù)[M].杭州：浙江大學(xué)出版社，2001：102-103.

[7] 蘇寧寧.黨參種子檢驗(yàn)方法及質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的研究制定[D].北京：北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院，2012.

[8] 李瑞.素花黨參種子種苗質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究[D].蘭州：甘肅農(nóng)業(yè)大學(xué)，2012.

[9] 李紅莉，徐有朋，李隆云，等.青蒿種子品種檢驗(yàn)及質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的研究[J].種子，2008，11（27）：1-4.

[10] 劉琰璐，張昭，戴靈超，等.黃檗種子質(zhì)量檢驗(yàn)規(guī)程及分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)研究[J].中國(guó)中藥雜志，2011，36（23）：3227-3231.

[11] 陳玉武，丁永輝，李成義，等.黨參壯根靈對(duì)黨參質(zhì)暈影響的研究[J].藥物分析雜志，2011，31（2）：254-257.