林玲

摘要：目的：超聲波法提取漯河本地桑葚中的白藜蘆醇并測(cè)定其抗氧化能力。方法：抗氧化能力是測(cè)定提取物對(duì)DPPH·，·OH，O2·-三種自由基的清除能力。結(jié)果：桑葚白藜蘆醇對(duì)三種自由基都有很好的清除作用，并和濃度有依賴關(guān)系，但并非都是線性相關(guān)。結(jié)論：桑葚白藜蘆醇有很好的清除自由基能力，這為桑葚提取的進(jìn)一步研究提供了一定的理論依據(jù)。

關(guān)鍵詞：桑葚 白藜蘆醇 自由基 抗氧化

中圖分類號(hào)：R284 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A 文章編號(hào)：1672-5336（2014）06-0017-02

桑葚是?？粕僦参?，別名桑果。我國(guó)桑樹資源非常豐富，而果實(shí)桑葚含有人體所需要的多種營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)。在歷代中醫(yī)本草中都被認(rèn)為有黑發(fā)，補(bǔ)肝，延年，祛斑等作用。桑椹中含有人體必需的氨基酸，并含多種微量元素，營(yíng)養(yǎng)價(jià)值很高。王欣研究利用Sephadex LH-20等方法在桑葚乙醇提取物中分離得到15個(gè)化合物[1]。對(duì)桑葚多糖和黃酮的研究也都證明其有抗氧化活性[2]。還有研究表明，桑葚提取物花色苷對(duì)乳腺癌細(xì)胞株有一定抑制作用[3]。白藜蘆醇（resveratrol）是芪類結(jié)構(gòu)非黃酮類多酚化合物，是一種植物抗毒素，經(jīng)過(guò)深入動(dòng)物或細(xì)胞研究，目前認(rèn)為白藜蘆醇具有抗氧化，抗炎，抗癌，心血管保護(hù)，預(yù)防動(dòng)脈粥樣硬化等各種作用[4]。本研究旨在對(duì)漯河本地桑葚進(jìn)行提取，并分析其抗氧化能力，為桑葚的進(jìn)一步開發(fā)利用提供理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 材料及試劑

桑葚（購(gòu)自漯河市丹尼斯超市）；無(wú)水乙醇，乙酸乙酯，甲醇等試劑均為分析純，水為雙蒸水；DPPH（1，1- 二苯-2-苦肼基）、TPTZ（三吡啶三吖嗪）（Sigma公司）；各試劑盒均購(gòu)自南京建成生物有限公司。

1.2 儀器

752型紫外分光光度計(jì)（上海第三分析儀器廠）；旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀（上海申生科技有限公司）；超聲波提取儀（宿州歐倍科學(xué)儀器有限公司）；BT25S型電子天平（德國(guó)賽得利斯集團(tuán)）。

1.3 實(shí)驗(yàn)方法

（1）白藜蘆醇超聲波提取方法，具體參照葛亮方法進(jìn)行[5]。提取后將粗體物配置5個(gè)相同梯度的濃度，考察白藜蘆醇濃度對(duì)自由基清除能力的影響。

（2）清除DPPH·自由基的能力。利用分光光度法測(cè)定DPPH·自由基的清除能力。量取5個(gè)梯度的桑葚白藜蘆醇提取物稀釋液100ul，加入0.2mmol/L DPPH·自由基乙醇溶液2ml，使其充分混勻并反應(yīng)30min。以磷酸緩沖液作為空白對(duì)照，在520nm測(cè)定吸光度，以A520表示。

DPPH·自由基清除率=[1-A520樣品/A520空白]×100%

（3）清除羥自由基·OH的能力 具體參照余立梅方法[6]。

（4）清除超氧自由基O2·-能力 具體方法參照Xican Li方法進(jìn)行[7]。

1.4 數(shù)據(jù)處理

以上數(shù)據(jù)均采用excel進(jìn)行處理分析。

2 結(jié)果

（1）桑椹白藜蘆醇超聲波提取結(jié)果。測(cè)得白藜蘆醇含量為68.54ug/g。

（2）桑葚白藜蘆醇對(duì)DPPH·自由基，羥自由基·OH，超氧自由基O2·-的清除能力。具體見表1。

從表1可以看出，桑葚白藜蘆醇對(duì)DPPH·，·OH，O2·-三種自由基都有一定的清除作用，且隨著濃度的增加，清除能力逐漸增加，但并非都呈線性增加?？梢钥闯觯瑢?duì)·OH的清除能力對(duì)白藜蘆醇的濃度有劑量依賴性，而對(duì)DPPH·，O2·-兩種自由基的清除能力則隨著濃度增加增加比較緩慢。

3 結(jié)語(yǔ)

超聲波法提取桑葚中的白藜蘆醇其含量為68.54ug/g。而對(duì)其抗氧化能力的試驗(yàn)表明，桑葚中白藜蘆醇對(duì)DPPH·，·OH，O2·-三種自由基都有一定的清除能力，這說(shuō)明桑葚有很好的抗氧化能力。羅妲研究了桑葚提取液對(duì)D-半乳糖引起的衰老小鼠生化指標(biāo)表明，桑葚有很好的保護(hù)腎臟和抗氧化功能[8]。引起這種作用的原因可能是多方面的。一般認(rèn)為和桑葚中Vc，黃酮有關(guān)，本研究表明桑葚中的白藜蘆醇也具有一定的抗氧化能力。本研究結(jié)果和相關(guān)桑葚中的白藜蘆醇的研究結(jié)果不是很相同，這和提取方法有一定的關(guān)系，和桑葚的產(chǎn)地也有一定關(guān)系。機(jī)體代謝過(guò)程中因?yàn)樯镅趸饔?，不可避免?huì)產(chǎn)生自由基，而其中大多數(shù)為活性氧自由基，當(dāng)機(jī)體自由基增多后會(huì)對(duì)機(jī)體的正常細(xì)胞和組織產(chǎn)生破壞作用，并會(huì)導(dǎo)致衰老，癌癥，死亡。所以自由基的清除非常重要，本研究表明，桑葚白藜蘆醇對(duì)自由基有很好的清除作用。而研究表明桑葚黃酮，多糖同樣也有很好的清除自由基的作用。這也為以后的研究提供了一定的方向，應(yīng)該繼續(xù)深入研究三者之間的協(xié)同作用，為桑葚的更好開發(fā)提供理論依據(jù)。

參考文獻(xiàn)

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