溫大科，徐曉華，陳旭光，李天宇

神經(jīng)元特異性烯醇化酶對(duì)手足口病重癥病例診斷的臨床意義

溫大科，徐曉華，陳旭光，李天宇

目的探討手足口?。╤and footand mouth disease,HFMD）患兒的血清神經(jīng)元特異性烯醇化酶（neuron-specific enolase,NSE）水平對(duì)重癥病例診斷的臨床意義。方法收集2011年4月—2012年11月在本院兒內(nèi)科治療的320例HFMD患兒的臨床資料，按臨床表現(xiàn)分為輕癥組（235例）和重癥組（85例）；按血清EV71抗體檢測(cè)結(jié)果分為陽(yáng)性組（89例）和陰性組（231例）。同時(shí)以在本院保健科體檢的75名健康兒童為對(duì)照組，應(yīng)用電化學(xué)發(fā)光法測(cè)定血清NSE水平。比較分析HFMD組和對(duì)照組、EV71抗體陽(yáng)性組和陰性組、輕癥組和重癥組、HFMD并發(fā)顱內(nèi)感染發(fā)病期和恢復(fù)期的NSE水平。結(jié)果血清NSE水平比較，HFMD組高于對(duì)照組；EV71抗體陽(yáng)性組明顯高于陰性組；重癥組明顯高于輕癥組；重癥顱內(nèi)感染患兒發(fā)病期高于恢復(fù)期（P均＜0.05）。結(jié)論HFMD患兒血清NSE水平升高，尤以EV71抗體陽(yáng)性組最為明顯。NSE水平越高，病情相對(duì)越重。NSE水平不僅是反應(yīng)HFMD病程的可靠指標(biāo)，也是判斷病情加重趨勢(shì)的有效指標(biāo)。

手足口病；磷酸丙酮酸水合酶；中樞神經(jīng)系統(tǒng)

手足口?。╤and,footandmouth disease,HFMD）是威脅兒童健康的常見傳染病之一，以5歲以下兒童發(fā)病居多[1-2]。HFMD由多種人類腸道病毒感染所致，如柯薩奇病毒A16型（coxsachievirus A16, CoxA16）、?？虏《竞虴V71等[3-4]，以EV71和CoxA16引起的HFMD最為常見[1-2]。多數(shù)患兒癥狀較輕，主要表現(xiàn)為發(fā)熱以及手、足、口、臀等部位出現(xiàn)皮疹；少數(shù)癥狀較重，病情發(fā)展迅速，并發(fā)顱內(nèi)感染，導(dǎo)致腎上腺素能神經(jīng)元功能先亢進(jìn)后衰竭，進(jìn)而發(fā)展為神經(jīng)源性肺水腫而死亡[3]。本文對(duì)HFMD患兒的臨床資料進(jìn)行回顧性分析，現(xiàn)將結(jié)果報(bào)道如下。

1 對(duì)象與方法

1.1 對(duì)象選取2011年4月—2012年11月在本院兒內(nèi)科治療的HFMD患兒320例（HFMD組），其中男185例，女135例，年齡7月齡～11歲，中位年齡3歲1個(gè)月。對(duì)照組為同期在本院保健科體檢的75名健康兒童，性別構(gòu)成（男/女）為43/32，年齡7月齡～4.5歲。HFMD組和對(duì)照組在性別構(gòu)成（χ2= 0.006，P=0.940）和年齡（t=0.602，P=0.549）上差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，具有可比性。

1.2 診斷標(biāo)準(zhǔn)HFMD的臨床治療、診斷和分型依據(jù)《手足口病診療指南（2010年版）》[5]。重癥HFMD診斷標(biāo)準(zhǔn)為有肌肉陣發(fā)性痙攣、心力衰竭、腦炎、肺水腫及急性弛緩性麻痹表現(xiàn)等。依據(jù)臨床表現(xiàn)分為輕癥組（235例）和重癥組（85例），重癥組中合并顱內(nèi)感染63例。所有患兒均行血清EV71抗體檢測(cè)，依據(jù)檢測(cè)結(jié)果分為陽(yáng)性組（89例）和陰性組（231例）。

1.3 方法

1.3.1 樣品采集和血清神經(jīng)元特異性烯醇化酶（neuron-specificenolase,NSE）水平測(cè)定HFMD組和對(duì)照組均在就診第1天抽取靜脈血3ml，用德國(guó)羅氏COBASE-601電化學(xué)發(fā)光儀行血清NSE水平測(cè)定，試劑盒采用德國(guó)羅氏診斷有限公司配套試劑。重癥顱內(nèi)感染者于治療第7天復(fù)查血清NSE水平。

1.3.2 EV71抗體檢測(cè)采集患兒血液標(biāo)本，采用ELISA法檢測(cè)EV71抗體，試劑盒由北京萬泰生物藥業(yè)公司提供。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理采用SAS 9.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。本研究均為計(jì)量資料，對(duì)各組計(jì)量資料數(shù)據(jù)先采用Shapiro-Wilk法和Levene法分別進(jìn)行正態(tài)性檢驗(yàn)和方差齊性檢驗(yàn)，符合正態(tài)分布和方差齊性。數(shù)據(jù)呈正態(tài)分布，用±s表示。2組間比較采用成組t檢驗(yàn)，治療前后比較采用自身配對(duì)t檢驗(yàn)。P＜0.05表示差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 HFMD組和對(duì)照組血清NSE水平比較HFMD組NSE水平顯著高于對(duì)照組（P＜0.05）。見表1。

表1 HFMD組和對(duì)照組血清NSE水平（±s，ng/m l）Table 1 Com parison of serum NSE level between HFMD group and the control group(±s,ng/m l)

表1 HFMD組和對(duì)照組血清NSE水平（±s，ng/m l）Table 1 Com parison of serum NSE level between HFMD group and the control group(±s,ng/m l)

項(xiàng)目nNSE水平HFMD組32017.75±7.01對(duì)照組759.13±3.54 t值10.338 P值0.000

2.2 EV71抗體陽(yáng)性組和陰性組血清NSE水平比較EV71抗體陽(yáng)性組血清NSE水平明顯高于陰性組（P＜0.05）。見表2。

表2 EV71抗體陽(yáng)性組和陰性組血清NSE水平（±s，ng/m l）Table 2 Comparison of serum NSE level between antibody EV71 positive group and negative group(±s,ng/m l)

表2 EV71抗體陽(yáng)性組和陰性組血清NSE水平（±s，ng/m l）Table 2 Comparison of serum NSE level between antibody EV71 positive group and negative group(±s,ng/m l)

項(xiàng)目nNSE水平陽(yáng)性組8920.64±7.43陰性組23114.29±4.15 t值9.665 P值0.000

2.3 輕癥組和重癥組血清NSE水平比較重癥組NSE水平明顯高于輕癥組（P＜0.05）。見表3。

表3 輕癥組和重癥組血清NSE水平（±s，ng/m l）Table 3 Comparison of serum NSE level between the m ild group and the severe group(±s,ng/m l)

表3 輕癥組和重癥組血清NSE水平（±s，ng/m l）Table 3 Comparison of serum NSE level between the m ild group and the severe group(±s,ng/m l)

項(xiàng)目nNSE水平輕癥組23513.52±4.18重癥組8524.40±5.99 t值18.189 P值0.000

2.4 重癥顱內(nèi)感染者發(fā)病期和恢復(fù)期血清NSE水平比較重癥顱內(nèi)感染恢復(fù)期血清NSE水平明顯低于發(fā)病期（P＜0.05）。見表4。

表4 重癥顱內(nèi)感染發(fā)病期和恢復(fù)期血清NSE水平（±s，ng/m l）Table 4 Com parison of serum NSE level between children w ith severe intracranial infection at the onset phase and at the convalescent phase(±s,ng/m l)

表4 重癥顱內(nèi)感染發(fā)病期和恢復(fù)期血清NSE水平（±s，ng/m l）Table 4 Com parison of serum NSE level between children w ith severe intracranial infection at the onset phase and at the convalescent phase(±s,ng/m l)

項(xiàng)目nNSE水平發(fā)病期6330.21±7.74恢復(fù)期6323.65±6.38差值d6.56±3.65 t值14.265 P值0.000

3 討論

我國(guó)HFMD發(fā)病率近年明顯升高，重癥患兒的構(gòu)成比有升高的趨勢(shì)，相應(yīng)病死率有所上升[6]，導(dǎo)致該現(xiàn)象的原因尚不明確。有研究表明，HFMD發(fā)病率的上升與個(gè)體遺傳的敏感性、易感人群的累積及病毒重組變異有關(guān)[7-9]。EV71是重癥HFMD的主要病原體，與其他類型腸道病毒相比，致病性更強(qiáng)。國(guó)外研究者對(duì)HFMD死亡病例進(jìn)行尸體解剖，結(jié)果發(fā)現(xiàn)EV71主要通過運(yùn)動(dòng)神經(jīng)通路感染中樞神經(jīng)，主要感染部位為下丘腦、腦干、脊髓和齒狀核。對(duì)病變組織進(jìn)行病理研究發(fā)現(xiàn)，在神經(jīng)元及神經(jīng)細(xì)胞軸突上存在EV71抗原，提示該病毒具有嗜神經(jīng)性，可引起神經(jīng)細(xì)胞凋亡或變性壞死，導(dǎo)致病變發(fā)生[10-11]。運(yùn)動(dòng)神經(jīng)通路為EV71傳播的主要通路，HFMD患兒被EV71感染后發(fā)生的肺部水腫亦為神經(jīng)源性肺水腫，提示重癥HFMD主要是因EV71對(duì)中樞神經(jīng)系統(tǒng)的損傷所致。

由于神經(jīng)系統(tǒng)受損程度的不同，損傷較輕者臨床上可無明顯神經(jīng)系統(tǒng)表現(xiàn)，較重者才出現(xiàn)顱內(nèi)感染、神經(jīng)源性肺水腫和肺出血等，但一旦出現(xiàn)重癥表現(xiàn)，后遺癥發(fā)生率及病死率則明顯上升。因此阻止HFMD病情發(fā)展的關(guān)鍵是盡早發(fā)現(xiàn)及確診是否存在顱內(nèi)感染，并進(jìn)行積極有效的早期干預(yù)治療[12]。

NSE是一種酸性可溶性蛋白質(zhì)，分子量78 KD，具有穩(wěn)定的理化性質(zhì)，在腦組織中廣泛存在，不存在于非神經(jīng)組織中。NSE作為反映神經(jīng)元損傷程度的敏感性和特異性指標(biāo)，近年來受到廣泛關(guān)注。當(dāng)神經(jīng)細(xì)胞受到損傷、崩解或變性時(shí)，血腦屏障通透性加強(qiáng)，NSE進(jìn)入血液和腦脊液，血液及腦脊液NSE水平升高提示神經(jīng)系統(tǒng)可能發(fā)生了病理性改變。研究表明，血清NSE水平和腦脊液NSE水平成正相關(guān)，血清NSE和腦脊液NSE濃度與腦損傷程度呈正相關(guān)[13-14]。在臨床工作中由于不便取患者的腦脊液，因此常用靜脈血作為檢測(cè)樣本，血清NSE水平升高，提示可能存在顱內(nèi)感染。進(jìn)一步結(jié)合腦脊液檢查結(jié)果可對(duì)顱內(nèi)感染進(jìn)行早期診治，以減少重癥HFMD的并發(fā)癥，降低病死率。

本研究中HFMD組較對(duì)照組血清NSE水平升高，提示NSE水平對(duì)HFMD的病情評(píng)判是一個(gè)重要的實(shí)驗(yàn)室指標(biāo)。EV71抗體陽(yáng)性組較陰性組NSE水平高，表明EV71較其他感染病毒對(duì)中樞神經(jīng)系統(tǒng)有更明顯的傷害。HFMD重癥組較輕癥組NSE水平升高，提示NSE水平可作為衡量HFMD病情嚴(yán)重程度的重要指標(biāo)。重癥顱內(nèi)感染者恢復(fù)期血清NSE水平低于發(fā)病期，表明NSE水平與顱內(nèi)感染損傷程度呈正相關(guān)，是評(píng)判病情恢復(fù)情況的重要指標(biāo)。

綜上所述，血清NSE水平升高提示HFMD患者可能存在中樞神經(jīng)系統(tǒng)損傷，NSE水平變化和HFMD病情程度直接相關(guān)，血清NSE水平顯著上升可反映HFMD患者的愈后相對(duì)不良。由此可見，血清NSE水平可作為早期診斷、治療和病情程度判斷的重要指標(biāo)，如結(jié)合腦脊液檢查結(jié)果對(duì)顱內(nèi)感染進(jìn)行早期診治，對(duì)減少重癥HFMD的并發(fā)癥，降低病死率有十分重要的意義。

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（2013-07-23收稿 2013-10-03修回）

（責(zé)任編委 趙敏 本文編輯 陳玉琪）

Clinical significance ofmeasuring neuron-specific enolase in early diagnosis of severe hand,foot and mouth disease

WEN Da-ke,XU Xiao-hua,CHEN Xu-guang,LITian-yu*
Pediatric Department,Wuxi Children's Hospital,Wuxi,Jiangsu 214023,China
*Corresponding author,E-mail:wdkbaby@hotmail.com

Objective To evaluate clinical significance of the level ofneuron-specific enolase(NSE)in the diagnosis of children with severe hand,footandmouth disease(HFMD).M ethods The clinical data of 320 HFMD patients treated in the department of pediatrics of our hospital from Apr.2011 to Nov.2012 were collected.The patients were divided into a mild group(n=235)and a severe group(n=85)according to clinicalmanifestations,and an enterovirus(EV)71 antibody positive group(n=89)and an EV71 antibody negative group(n=231)according to the detection of antibodies against EV71.Seventy-five healthy children receiving physical examination in health care department of our hospital were selected as a control group.Chemiluminescence methods were used to detect serum NSE level in different groups,and the serum NSE levelwas compared between the HFMD group and the control group, between the EV71 antibody positive group and the EV71 antibody negative group,between themild group and the severe group,and between the onset phase and the recovery phase of HFMD complicated by intracranial infection.Results Serum NSE level in the HFMD group was significantly higher than that in the control group,that in the EV71 antibody positive group was significantly higher than that in the EV71 antibody negative group,that in the severe group was significantly higher than that in themild group,and that in the onset phase of HFMD complicated by intracranial infection was significantly higher than that in the recovery phase(P＜0.05).Conclusions The serum NSE level in HFMD children is significantly higher,especially in the EV71 antibody positive children.The higher the serum NSE level,the severer the condition.Serum NSE level is not only a reliable indicator reflecting the disease course of HFMD,but also an effective indicator predicting the severity of HFMD.

hand,foot and mouth disease;phosphopyruvate hydratase;central nervous system

R512.57；R345.5

A

1007-8134(2014)01-0035-03

214023，無錫市兒童醫(yī)院兒內(nèi)科（溫大科、徐曉華、陳旭光、李天宇）

李天宇，E-mail:wdkbaby@hotmail.com