游蓉麗 李明花 喬玉峰 韓佩蓮

（1山西振東制藥股份有限公司，山西 長治 047100；2山西振東泰盛制藥有限公司，大同 037300）

H PLC測定注射用阿魏酸鈉含量

游蓉麗1李明花1喬玉峰1韓佩蓮2

（1山西振東制藥股份有限公司，山西 長治 047100；2山西振東泰盛制藥有限公司，大同 037300）

目的：對高效液相色譜法（HPLC）測定注射用阿魏酸鈉含量的方法進(jìn)行研究。方法：色譜條件：C18柱，流動相為甲醇-水-醋酸（30∶69∶1.5），檢測波長為322 nm。結(jié)果：該方法的重復(fù)性RSD=0.13%，n=6。結(jié)論：該方法操作簡便、快捷、重復(fù)性好，可作為注射用阿魏酸鈉的含量測定方法。

高效液相色譜法；注射用阿魏酸鈉；含量

注射用阿魏酸鈉為無菌粉針劑產(chǎn)品，屬于抗血小板聚集藥。參照《中國藥典》2010年版二部[1]附錄藥品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)分析方法驗證指導(dǎo)原則及通過對注射用阿魏酸鈉含量測定進(jìn)行方法學(xué)研究，認(rèn)為該方法簡便、快捷、重現(xiàn)性好，結(jié)果準(zhǔn)確可靠。

1 儀器與試藥

1.1 儀器

高效液相色譜儀：島津 LC-20AT高壓二元泵，SPD-M20A二極管陣列檢測器以及LCsolution色譜工作站；電子分析天平（梅特勒AX105）、紫外-可見分光度計（島津UV2550）。

1.2 試劑

阿魏酸對照品，批號：110773-201012，規(guī)格：50 mg，來源：中國食品藥品檢定研究院（供含量測定用），含量：99.6%（使用前，置五氧化二磷減壓干燥12小時以上）。供試品：注射用阿魏酸鈉，規(guī)格：0.1 g，批號：1001291、1001301、1106301，來源：山西振東泰盛制藥有限公司。甲醇（色譜純）、醋酸（色譜純）。

2 色譜條件

色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗參照國家食品藥品監(jiān)督管理總局標(biāo)準(zhǔn)YBH07352006。

2.1波長選擇

取阿魏酸對照品適量，制成1 mL中含0.1 mg的溶液，在 190～ 360 nm進(jìn)行全波長掃描，在322 nm有最大吸收。

2.2 色譜柱選擇

色譜柱：C18柱（4.6 mm×250 mm；5 μm）；流動相：甲醇-水-醋酸（30∶69∶1.5）；檢測波長：322 nm；流速：1.0 mL/min；柱溫：25℃；進(jìn)樣量：20 μL。

3 方法學(xué)實驗

3.1 專屬性

注射用阿魏酸鈉為無菌粉針劑，未添加任何輔料，無輔料干擾。

3.2 線性關(guān)系測定

取阿魏酸對照品20 mg，精密稱定，置100 mL量瓶中，加流動相溶解并稀釋至刻度，搖勻，分別精密量取2，3，5，7，8 mL，分別置50 mL量瓶中，加流動相稀釋至刻度，搖勻，作為供試品溶液。取上述溶液各 20 μL，注入液相色譜儀，記錄色譜圖。

表1 阿魏酸含量線性關(guān)系測定

圖1 阿魏酸含量線性關(guān)系

對以上數(shù)據(jù)進(jìn)行線性回歸，得回歸方程為：y=474 40x-271 406，相關(guān)系數(shù)r=0.999 3。由結(jié)果可見，在8～ 32 μg/mL濃度范圍內(nèi)，供試品濃度與其峰面積線性關(guān)系良好。

3.3 溶液的穩(wěn)定性試驗

避光操作，取阿魏酸對照品 20 mg，精密稱定，置100 mL量瓶中，加流動相溶解并稀釋至刻度，搖勻，精密量取5 mL置50 mL量瓶中，加流動相稀釋至刻度，搖勻，作為供試品溶液。分別于第0，2，4，6，8，10小時精密量取 20 μL注入液相色譜儀，記錄色譜圖。

由表2可見，其RSD值為0.35%，表明本品在配制后8小時內(nèi)較穩(wěn)定。

表2 阿魏酸溶液含量穩(wěn)定性試驗結(jié)果

3.4 重復(fù)性試驗

取批號為1001291的注射用阿魏酸鈉20 mg，精密稱定，置100 mL量瓶中，加流動相溶解并稀釋至刻度，搖勻，精密量取 5 mL置 50 mL量瓶中，加流動相稀釋至刻度，搖勻，作為供試品溶液。重復(fù)進(jìn)樣6次，記錄色譜圖。

由表 3可見，其 RSD值為 0.13%，表明本方法的重復(fù)性良好。

表3 阿魏酸重復(fù)性試驗結(jié)果

3.5 回收率試驗

因注射用阿魏酸鈉為無菌原料藥直接分裝的無菌粉針劑，處方中無任何輔料，采用模擬處方回收率進(jìn)行試驗。精密稱取阿魏酸鈉原料 16，20，24 mg各3份，分別置100 mL量瓶中，加流動相溶解并稀釋至刻度，搖勻，精密量取5 mL置50 mL量瓶中，加流動相稀釋至刻度，搖勻，作為供試品溶液。取上述溶液各20 μL分別注入液相色譜儀，記錄色譜圖，計算回收率。實驗結(jié)果見表4。

表4 阿魏酸回收率試驗結(jié)果

3.6 含量測定

分別取三批樣品（約相當(dāng)于阿魏酸20 mg），精密稱定，置100 mL量瓶中，加流動相溶解并稀釋至刻度，搖勻，精密量取此溶液5 mL，置50 mL量瓶中，加流動相稀釋至刻度，搖勻，精密量取20 μL注入液相色譜儀，記錄色譜圖。另取阿魏酸對照品，同法測定，按外標(biāo)法以峰面積計算，結(jié)果乘以1.298 8，即得供試品中阿魏酸鈉（C10H9NaO4）的含量。結(jié)果與法定檢測結(jié)果比較見表5。

表5 注射用阿魏酸鈉含量測定結(jié)果

4 討論

根據(jù)上述各項測定結(jié)果，說明注射用阿魏酸鈉的HPLC測定結(jié)果較準(zhǔn)確可靠，且此分析方法操作簡便、靈敏度高、快捷、重現(xiàn)性好，可作為注射用阿魏酸鈉的含量測定方法。

[1] 國家藥典委員會.中華人民共和國藥典（2010年版）二部[S].北京：中國醫(yī)藥科技出版社，2010.

Content Determination of Sodium Ferulate for Injection by HPLC

You Rongli1，Li Minghua1，Qiao Yufeng1，Han Peilian2
（1 Shanxi Zhendong Pharmaceutical Co.， Ltd， Shanxi Changzhi 047100，China；2 Shanxi Zhendong Taisheng Pharmaceutical Co.，Ltd，Datong 037300）

Objective:To research the method for the content determination of sodium ferulate for injection by HPLC.Methods:C18column was used with a mobile phase of methanol-water-acetic acid （30∶69∶1.5）.The detection wavelength was at 322 nm.Results:The recovery of the method was RSD=0.13% （n=6）.Conclusion:The method is simple，rapid and reproducible，which can be used for the content determination of sodium ferulate for injection.

HPLC；Sodium Ferulate for Injection；Content

10.3969/j.issn.1672-5433.2014.10.005

2014-06-05）

游蓉麗，女，博士。研究方向：藥效學(xué)。E-mail：sxzdyrl@163.com

韓佩蓮，女，主管藥師。研究方向：藥物分析技術(shù)。通訊作者E-mail：sxtshpl@163.com