秦慶芳，楊新平，李勇軍，李 麗 ，李勇文，容明智

(1.廣西柳州食品藥品檢驗(yàn)所， 廣西 柳州 545006；2.桂林醫(yī)學(xué)院，廣西 桂林 541004；3.柳州化工股份有限公司，廣西 柳州 545002)

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蟬翼藤莖皮中甲基阿魏酸成分的提取分離鑒定

秦慶芳1，楊新平2*，李勇軍3，李 麗2，李勇文2，容明智2

(1.廣西柳州食品藥品檢驗(yàn)所， 廣西 柳州 545006；2.桂林醫(yī)學(xué)院，廣西 桂林 541004；3.柳州化工股份有限公司，廣西 柳州 545002)

目的：對(duì)蟬翼藤莖皮中有機(jī)酸成分進(jìn)行化學(xué)研究。方法：采用各種色譜技術(shù)進(jìn)行分離純化,根據(jù)理化性質(zhì)和光譜分析對(duì)蟬翼藤莖皮中的有機(jī)酸成分進(jìn)行結(jié)構(gòu)鑒定。結(jié)果：分離得到化合物Ⅰ～Ⅲ，其中化合物Ⅰ鑒定為甲基阿魏酸。結(jié)論：化合物甲基阿魏酸首次從該屬植物中分離得到。

蟬翼藤；有機(jī)酸；甲基阿魏酸；提取；結(jié)果鑒定

蟬翼藤(SecuridacaInappendiculataHassk)為遠(yuǎn)志科遠(yuǎn)志族五味藤屬攀援灌木，是廣西民族特色中草藥，廣西民間稱五味藤、丟了棒、一摩消等，為傳統(tǒng)名藥云香精、正骨水的主藥之一。其根莖味辛、甘、苦, 性微寒。 有祛風(fēng)濕、清熱利尿、活血化瘀、消腫止痛的功效，民間常用于治療急性黃疸性肝炎的濕熱黃疸等證[1]。藥理學(xué)研究表明，蟬翼藤具有較強(qiáng)的抗菌消炎、抗癌、抗病毒、抗HIV、免疫增強(qiáng)等多種活性，具有較好的研究?jī)r(jià)值和廣闊的開(kāi)發(fā)前景[2-5]。據(jù)報(bào)道蟬翼藤有機(jī)酸成分具有抗乙肝病毒的作用[6-7]。同時(shí)本課題組研究發(fā)現(xiàn)蟬翼藤有機(jī)酸成分對(duì)鴨乙肝病毒所致的鴨肝細(xì)胞損傷也有較好的保護(hù)作用，為進(jìn)一步明確蟬翼藤有機(jī)酸中具有保肝作用的活性成分，本課題組對(duì)蟬翼藤有機(jī)酸成分進(jìn)一步分離純化，得到三種白色結(jié)晶，利用小鼠急性肝損傷實(shí)驗(yàn)對(duì)三種化合物進(jìn)行活性篩選實(shí)驗(yàn)，證明Ⅰ結(jié)晶保肝作用最強(qiáng)。Ⅰ結(jié)晶經(jīng)結(jié)構(gòu)鑒定為甲基阿魏酸。

1 儀器與材料

蟬翼藤，經(jīng)廣西醫(yī)科大學(xué)天然藥物化學(xué)教研室李梅教授鑒定。高分辨質(zhì)譜儀：型號(hào)Exactive，美國(guó)賽默飛世爾科技；FTIR紅外光譜儀聯(lián)用設(shè)備：型號(hào)PE Spectrum One FT-IR Spectromete，美國(guó)PE公司；500MHz超導(dǎo)核磁共振波譜儀AVANCE AV500，瑞士Bruker 公司；Sephadex LH220柱層析硅膠， 青島海洋化工廠。

2 甲基阿魏酸提取分離[8]

蟬翼藤莖皮粉碎,95%乙醇回流提取,浸膏用100～200目硅膠拌樣，以氯仿回流洗脫。洗脫液減壓濃縮，中壓硅膠色譜CHCl3:乙醚(1∶0-0∶1) 梯度洗脫,分別收集含化合物Ⅰ～Ⅲ的部分,再經(jīng)重結(jié)晶和Sephadex LH220 凝膠柱色譜純化(甲醇洗脫),分別得到化合物Ⅰ～Ⅲ。

3 化合物Ⅰ的結(jié)構(gòu)鑒定

化合物Ⅰ：白色針晶(乙酸乙酯)，熔點(diǎn)(179～180℃)UV(MeOH,nm,logε):220(3.09)，231(3.09)，288(3.11),314(3.13)。IR(KBr壓片): 3 300, 2 848, 1 700, 1 624, 1 597, 1 514, 1 457, 1 210, 1 128cm-1.1H NMR(DMSO-d6, 500MHz)δ:12.22 (1H, s, COOH), 7.51 (1H, d, J=16, =CH), 7.32 (1H, s, Ar-H), 7.20 (1H, d, J=8.5, Ar-H), 6.99 (1H, d, J=8.5, Ar-H) 6.43 (1H, d, J=16,=CH), 3.81 (3H, s, OCH3), 3.80 (3H, s, OCH3).13C NMR(DMSO-d6, 125MHz) δ: 173, 152, 150, 148, 127, 124, 115, 111,110, 56. MS z/m:209[M+H]+。綜合以上光譜數(shù)據(jù)并參照文獻(xiàn)[9]鑒定其為甲基阿魏酸?；衔颕相關(guān)圖譜見(jiàn)圖1、圖2、圖3、圖4。

圖1 化合物Ⅰ紅外光譜

圖2 化合物Ⅰ氫譜

圖3 化合物Ⅰ碳譜

圖4 化合物Ⅰ質(zhì)譜

[1] 中國(guó)科學(xué)院昆明植物研究所．云南植物志[M]．北京：科學(xué)出版社，1983：261．

[2] 李勇文,李麗,張士軍.含蟬翼藤大鼠血清的免疫調(diào)節(jié)作用[J].中國(guó)現(xiàn)代應(yīng)用藥學(xué),2007,24(6):452-456.

[3] 李勇文,李麗,李梅，等.蟬翼藤對(duì)小鼠脾細(xì)胞體外增殖和淋巴因子分泌水平的影響[J]. 中國(guó)中醫(yī)藥信息雜志,2006,13(5):43.

[4] 李勇文,李麗,李植飛.五味藤抗炎作用及其機(jī)制初探[J].中國(guó)中醫(yī)急癥,2006,15(8):898-900.

[5] 李麗，李勇文，唐愛(ài)存. 蟬翼藤氯仿提取物的抗炎和免疫增強(qiáng)作用[J].中藥藥理與臨床，2011，27(4)：62-64.

[6] 李勇文,李麗,唐愛(ài)存.甲基阿魏酸在HepG2.2.15細(xì)胞培養(yǎng)中對(duì)HBV DNA的抑制作用[J].中藥藥理與臨床,2010, 26 (6):39-41.

[7] 李麗,李勇文,唐愛(ài)存.甲基阿魏酸對(duì)HepG2.2.15細(xì)胞HBsAg和HBeAg的抑制作用[J].中藥藥理與臨床，2011,27(3): 14-16.

[8] 楊學(xué)東,徐麗珍,楊世林.蟬翼藤莖中有機(jī)酸成分的研究 [J].中國(guó)中藥雜志，2001,26(4):258-260.

[9] 陸敏儀,謝培德,庾石山,等.五味藤化學(xué)成分研究[J].中藥材，2002 ,25(4):259-260.

(責(zé)任編輯：宋勇剛)

2014-04-07

國(guó)家自然科學(xué)基金項(xiàng)目(81360497)；廣西醫(yī)科大學(xué)開(kāi)放實(shí)驗(yàn)室項(xiàng)目(KFJJ2011-09)

秦慶芳(1971-)，女，廣西柳州食品藥品檢驗(yàn)所副主任藥師，研究方向?yàn)槭称匪幤窓z測(cè)及質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)。

楊新平(1971-)，男，桂林醫(yī)學(xué)院講師，研究方向?yàn)樗幬锖铣杉疤烊凰幬锾崛》蛛x鑒定及結(jié)構(gòu)改造。

R284.2

A

1673-2197(2014)15-0020-02