齊向濤 許追 齊亞銀

（石河子大學動物科技學院，新疆石河子 832000）

豬附紅細胞體感染途徑的探討及臨床治療藥物的篩選

齊向濤 許追 齊亞銀*

（石河子大學動物科技學院，新疆石河子 832000）

為了探討豬附紅細胞體的感染途徑和臨床常用的幾種藥物對豬附紅細胞體的治療效果，本試驗利用幾種常用藥物對新疆石河子150團某豬場24頭感染豬附紅細胞體的仔豬進行臨床治療試驗，結(jié)果表明，在每組治療的6頭患病豬中，青鏈霉素治療組僅有2頭痊愈，長效土霉素治療組有5頭痊愈，1頭患病豬附紅細胞體的感染率為20%，強力霉素治療組6頭均痊愈，貝尼爾治療組有5頭痊愈，1頭患病豬附紅細胞體的感染率為60%，表明除青鏈霉素外，其他三種藥物治療效果差異不明顯，強力霉素治療效果略優(yōu)于長效土霉素和貝尼爾。另外，本試驗還采用5種不同感染途徑對小鼠進行感染試驗，結(jié)果表明靜脈注射組、傷口感染組、口服組、呼吸道感染組和皮下接種組的感染率分別為94%、91%、90%、78%、23%，表明附紅細胞體可通過上述5種途徑感染動物。小鼠感染后第30天血液鏡檢結(jié)果表明，附紅細胞體感染率降低了70%～80%，表明本試驗分離的附紅細胞體致病性較弱。

附紅細胞體；感染；治療

豬附紅細胞體病是由寄生于紅細胞表面或者游離于血漿的附紅細胞體引起豬的以發(fā)熱、貧血和黃疸為主要癥狀的人獸共患病，可造成仔豬的虛弱和貧血、母豬的繁殖障礙和育肥豬的生長緩慢[1-4]，嚴重影響?zhàn)B豬業(yè)的發(fā)展。該病多呈隱性感染，所以一般不表現(xiàn)出臨床癥狀，但當機體的抵抗力下降，其他病原菌混合感染時，可造成動物死亡[5-7]。由于各個年齡段、各種品種的豬均能感染豬附紅細胞體病，且仔豬由于免疫機能發(fā)育不全，抵抗力差，發(fā)病率高，死亡率也高。有些病豬自愈或治愈后生長受阻，成為僵豬。因此，如不能及時有效地控制該病的傳播，無疑會給養(yǎng)豬業(yè)帶來十分慘重的損失[5]。

近幾年來豬附紅細胞體病在石河子地區(qū)時常有發(fā)生，本病或者與本病混合感染等多重感染給生豬生產(chǎn)造成很大損失。筆者根據(jù)該病的流行情況、發(fā)病特點，對治療藥物進行了有效篩選；采用靜脈注射、皮下接種、傷口感染、口服和呼吸道感染等5種途徑感染小鼠，以確定附紅細胞體的傳播途徑；并提出了該病的綜合防治措施，為該地區(qū)豬附紅細胞體病的診斷和治療提供科學參考。

1 材料與方法

1.1 材料

病料組織：2013年8月5號新疆石河子150團某規(guī)模化豬場發(fā)現(xiàn)斷奶仔豬腹下和股內(nèi)有出血斑點，過幾天結(jié)痂，有的仔豬突然死亡，全身紅紫，經(jīng)過對該場部分仔豬抽血化驗，發(fā)現(xiàn)有的病豬抽血血流不止，有的仔豬四肢抽搐后死亡，注射氨芐西林、林克霉素、頭孢噻呋鈉發(fā)現(xiàn)病情并未好轉(zhuǎn)，6天內(nèi)死亡了8頭仔豬，還有24頭病豬未治愈。

1.2 方法

1.2.1 血液推片觀察

將從部分豬群身上采集的新鮮血液在載玻片上進行推片，待推片自然干燥后，滴加瑞氏染液，染色3分鐘，然后滴加等量的蒸餾水染色5分鐘，用蒸餾水沖洗，待干燥后用光學顯微鏡進行觀察。通過觀察顯微鏡視野下紅細胞形態(tài)以及紅細胞表面豬附紅細胞體的形態(tài)、大小、折光性并以百分率來表示感染率。

1.2.2 藥物治療試驗

將未治愈的24頭豬，根據(jù)病情嚴重程度及精神狀況平均分為4組，第1組使用長效土霉素進行治療；第2組使用強力霉素進行治療；第3組使用貝尼爾進行治療；第4組使用青鏈霉素進行治療。觀察4組病豬的治療情況。

1.2.3 小鼠感染豬附紅細胞體試驗

1.2.3.1 細胞液的制備

采集經(jīng)染色鏡檢鑒定為感染附紅細胞體的患病豬血液放入離心管中，經(jīng)1 500～1 800轉(zhuǎn)/分鐘離心8分鐘，棄去上清液，加入20%pH 7.2，0.01 mol/L PBS溶液，用吸管反復吹打混勻后保存?zhèn)溆谩?/p>

1.2.3.2 感染試驗

將預先準備的30只小鼠均勻分為6組，每組5只，進行感染豬附紅細胞體試驗。第一組為空白對照組，其他各組分別依次為靜脈注射組：尾根靜脈直接注射0.5mL/只的紅細胞液；皮下接種組：皮下注射0.5mL/只的紅細胞液；口服組：灌胃接種0.5 mL/只的紅細胞液；傷口感染組：體側(cè)薄皮部劃痕接種0.5 mL/只的紅細胞液；呼吸道感染組：5只小鼠和紅細胞液一并放置于密閉的通風櫥內(nèi)一側(cè)，其中將紅細胞液放置于冰盒上的平皿中7天，每6小時更換一次冰袋，感染后第9天從小鼠尾靜脈采集血液推片染色，在400倍光學顯微鏡下觀察并記錄、統(tǒng)計豬附紅細胞體在小鼠體內(nèi)的感染情況。

2 結(jié)果

2.1 感染附紅細胞體豬臨床癥狀

感染附紅細胞體的病豬耳廓邊緣呈紫色，腹部及四肢末端明顯發(fā)紺（圖1、圖2）。

圖1 病豬耳廓邊緣呈紫色

圖2 病豬四肢明顯發(fā)紺

2.2 血液推片鏡檢結(jié)果

染色鏡檢發(fā)現(xiàn)，與正常豬群的紅細胞相比，患病豬的紅細胞邊緣不整，表面可見大小不等、形狀不一的紫紅色蟲體，即為附紅細胞體，附紅細胞體在鏡下有折光性。該病豬感染附紅細胞體較為嚴重，計算得到其感染率達到95%以上（圖3）。

圖3 感染附紅細胞體的紅細胞（左）與正常紅細胞（右）的比較

2.3 藥物治療試驗結(jié)果

通過對4組患病豬進行7天的連續(xù)治療后，采集其血液進行檢測，發(fā)現(xiàn)第1組中有5頭患病豬痊愈，附紅細胞體檢測為陰性，1頭患病豬紅細胞附紅細胞體的感染率為20%；第2組6頭患病豬均痊愈，附紅細胞體檢測為陰性；第3組中有5頭患病豬痊愈，附紅細胞體檢測為陰性，1頭患病豬紅細胞附紅細胞體的感染率為60%；第4組只有2頭患病豬痊愈，附紅細胞體檢測為陰性，其他4頭患病豬紅細胞附紅細胞體的感染率分別為40%、20%、40%和50%。

2.4 小鼠感染豬附紅細胞體試驗結(jié)果

通過靜脈注射、皮下接種、傷口感染、口服和呼吸道感染等5種途徑對小鼠進行附紅細胞體感染試驗發(fā)現(xiàn)，上述幾種方式均可以感染小鼠。在感染后第9天，采集小鼠血液、涂片、鏡檢觀察結(jié)果，其中靜脈注射組的感染效果最好，感染率高達94%，其次是傷口組感染率為91%，口服組感染率為90%，呼吸道組感染率為78%，皮下接種組的感染率較低，為23%。但是在感染后30天采血、鏡檢發(fā)現(xiàn)，高感染率組附紅細胞體感染率降低了70%～80%不等。

3 分析與討論

3.1 治療附紅細胞體感染的4種藥物的療效對比

對4種治療附紅細胞體的藥物的療效進行比較發(fā)現(xiàn)，除青鏈霉素外，長效土霉素、強力霉素、貝尼爾都能對豬附紅細胞體進行有效的治療，但是強力霉素臨床治療效果優(yōu)于長效土霉素和貝尼爾，該藥療效迅速，可以在短時間內(nèi)使病情趨于穩(wěn)定。長效土霉素是四環(huán)素類廣譜抗生素，該藥具有穩(wěn)定、副作用小、可以通過母體胎盤進入胎兒體內(nèi)循環(huán)系統(tǒng)等特點，已經(jīng)廣泛應用于附紅細胞體的防治。實踐證明，在飼料中添加土霉素可以降低附紅細胞體病的發(fā)病率，但是不能有效防止本病的發(fā)生。貝尼爾可以使發(fā)病動物貧血、黃疸、腹瀉等臨床癥狀恢復正常，但是該藥的副作用大，使用時應注意劑量和次數(shù)，對懷孕母豬使用該藥常常導致流產(chǎn)等，因此選擇該藥應慎重。

3.2 附紅細胞體的感染途徑

通過小鼠感染附紅細胞體試驗可知，豬附紅細胞體可以通過血液、傷口、口服、呼吸道及皮下注射等5種途徑傳播。由于該病為人畜共患病，人類同樣也可以經(jīng)過這5種途徑感染，因此獸醫(yī)工作者、屠宰場工作人員、飼養(yǎng)員等應加強自身防護。本研究發(fā)現(xiàn)，靜脈注射組、傷口感染組、口服組、呼吸道感染組和皮下接種組的附紅細胞體感染率分別為94%、91%、90%、78%、23%。附紅細胞體可以經(jīng)過上述途徑直接或者間接進入血液循環(huán)，由于進入血液循環(huán)的途徑不同，所以導致該病的感染速度不同。但是對感染30天后的小鼠進行采血、鏡檢發(fā)現(xiàn)，附紅細胞體感染率降低了70%～80%不等，表明本試驗分離的附紅細胞體致病性較弱，這與馮會權(quán)等[8]關(guān)于不同季節(jié)附紅細胞體的致病性也不同的研究結(jié)果基本相符。豬附紅細胞體病為季節(jié)性疾病，多發(fā)性季節(jié)為9、10月份[9]，但是本次發(fā)病為8月初，這可能與新疆晝夜溫差大的氣候條件有一定關(guān)系。

4 綜合防治措施

豬附紅細胞體是主要寄生于豬血液及骨髓中的一種微生物。在我國的大部分豬場豬體內(nèi)都可以檢測到附紅細胞體，只是感染比例不同。附紅細胞體類似于機體內(nèi)的正常菌群，在畜群健康的時候，它們在機體內(nèi)維持一個相對穩(wěn)定的平衡狀態(tài)；但當畜群自身的免疫能力下降或者受外界條件刺激，這種平衡狀態(tài)可能被破壞，附紅細胞體會大量繁殖，從而引起該病的發(fā)生。

豬附紅細胞體病沒有典型的病理變化和臨床癥狀，該病的診斷容易和豬瘟、仔豬副傷寒、豬弓形體病等混淆，所以很難被及時診斷出并治療。到目前為止，防治豬附紅細胞體病的疫苗還未出現(xiàn)，所以控制該病的理念是“防重于治”。

創(chuàng)造良好的衛(wèi)生環(huán)境，建立科學的飼養(yǎng)管理方法是控制豬附紅細胞體病的有效手段。在實施免疫注射、斷尾、打耳號、閹割等飼養(yǎng)管理程序時，器械要嚴格消毒。該病對各階段的豬群均有危害，在北方地區(qū)該病一般在9、10月份多發(fā)，所以應在本病的流行季節(jié)給予預防用藥，有的養(yǎng)殖戶使用土霉素堿粉、磺胺嘧啶粉進行拌料預防取得了一定的效果。另外平時應加強飼養(yǎng)管理，減少對豬群的各種應激，及時殺滅蚊蟲等各種吸血昆蟲。

對感染附紅細胞體的母豬進行及時監(jiān)測及有效防治是控制本病的重要措施。在對感染附紅細胞體的母豬進行調(diào)查時發(fā)現(xiàn)，感染附紅細胞體的母豬會將該病傳給仔豬，這可能是導致仔豬附紅細胞體病高發(fā)的重要原因。另外，該病還經(jīng)常通過注射針頭傳播，因此，在注射疫苗或藥物時，應注意及時更換針頭。

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S852.7

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1673-4645(2014)04-0042-04

2013-10-21

齊向濤（1987-），男，陜西西安人，碩士研究生，主要從事獸醫(yī)技術(shù)服務工作*

齊亞銀（1980-），男，副教授，主要從事動物傳染病的診斷與防治工作