胡毓洪，拓西平，羅 鑭

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阿司匹林對(duì)阿爾茨海默病模型大鼠學(xué)習(xí)記憶能力的保護(hù)作用及其對(duì)炎癥因子IL-6、IL-1β和TNFα表達(dá)的影響

胡毓洪1，拓西平2*，羅 鑭3

（1濟(jì)南軍區(qū)總醫(yī)院心內(nèi)科，濟(jì)南 250031；2第二軍醫(yī)大學(xué)附屬長(zhǎng)海醫(yī)院老年病科，上海 200433；3南通大學(xué)附屬醫(yī)院老年醫(yī)學(xué)科，南通 226001）

探討阿司匹林對(duì)阿爾茨海默病（AD）是否具有防治作用，及是否對(duì)相關(guān)炎性因子表達(dá)存在影響。本研究在體內(nèi)條件下用側(cè)腦室定向注射β淀粉樣蛋白（Aβ）25-35模擬AD的基本病理改變，用阿司匹林進(jìn)行干預(yù)，測(cè)試大鼠在Morris水迷宮中的逃避潛伏期，并用ELISA檢測(cè)大鼠腦組織內(nèi)炎癥因子白細(xì)胞介素（IL）-6、IL-1β和腫瘤壞死因子α（TNFα）的表達(dá)情況。將50只大鼠隨機(jī)分為5組，每組10只。（1）高劑量阿司匹林干預(yù)組：大鼠給予含阿司匹林2g/L的蒸餾水溶液喂服，自由進(jìn)食。3周后側(cè)腦室內(nèi)注射Aβ溶液5μl，再予含阿司匹林2g/L的蒸餾水溶液喂服3周，自由進(jìn)食。（2）中劑量阿司匹林干預(yù)組：給予含阿司匹林1g/L的蒸餾水溶液喂服，其余同前。（3）低劑量阿司匹林干預(yù)組：給予含阿司匹林0.5g/L的蒸餾水溶液喂服，其余同前。（4）模型組：給予蒸餾水喂服，其余同前。（5）假手術(shù)組：給予蒸餾水喂服，3周后側(cè)腦室內(nèi)注射無(wú)菌生理鹽水5μl，再予蒸餾水喂服，自由進(jìn)食。第6周結(jié)束時(shí)，使用Morris水迷宮測(cè)試大鼠學(xué)習(xí)記憶能力改變。然后處死大鼠使用ELISA方法檢測(cè)大鼠腦組織內(nèi)IL-6，IL-1β和TNFα水平。（1）阿司匹林各劑量干預(yù)組逃避潛伏期較模型組縮短，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。（2）IL-1β水平以模型組最高，假手術(shù)組最低，各不同阿司匹林劑量干預(yù)組水平在前兩組之間；而3組阿司匹林干預(yù)組中，分別為低劑量組最高，高劑量組最低；差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。（3）IL-6水平以模型組最高，假手術(shù)組最低，阿司匹林各劑量干預(yù)組介于兩者之間，但總體間差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。（4）TNFα水平以模型組最高，假手術(shù)組最低，各不同阿司匹林劑量干預(yù)組介于兩者之間；各劑量組之間又分別以中劑量組最高，高劑量組最低；差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。側(cè)腦室定向注射Aβ25-35能使大鼠學(xué)習(xí)記憶能力下降。阿司匹林干預(yù)可改善AD模型大鼠的學(xué)習(xí)記憶能力。阿司匹林可能下調(diào)IL-1β，IL-6和TNFα等炎癥因子的釋放，從而對(duì)AD模型大鼠學(xué)習(xí)記憶能力起到保護(hù)作用。

阿爾茨海默病；大鼠；阿司匹林；炎癥因子；癡呆

阿爾茨海默?。ˋlzheimer’s disease，AD）是發(fā)生于老年和老年前期最常見(jiàn)的以進(jìn)行性癡呆為特征的中樞神經(jīng)系統(tǒng)變性性疾病。AD與炎癥相關(guān)，損害的神經(jīng)元、異常沉積的β淀粉樣蛋白（amyloid β，Aβ）及神經(jīng)原纖維纏結(jié)（neurofibrillary tangle，NFT）都是炎癥的刺激物，刺激機(jī)體產(chǎn)生炎癥因子，而炎癥因子的存在可能增加AD的發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)。眾多流行病學(xué)資料顯示，長(zhǎng)期服用阿司匹林（aspirin）的人群中AD的患病率明顯低于未服用者。對(duì)于阿司匹林在AD發(fā)生發(fā)展中的確切作用及其機(jī)制有待于進(jìn)一步研究。本研究擬從動(dòng)物AD模型出發(fā)，研究阿司匹林對(duì)AD的防治作用及其對(duì)大腦炎癥因子白細(xì)胞介素（interleukin，IL）-1β，IL-6和腫瘤壞死因子（tumor necrosis factor，TNF）α表達(dá)的影響。

1 材料與方法

1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物

雄性SD大鼠50只，鼠齡11～12周，體質(zhì)量260～280g，由第二軍醫(yī)大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供。標(biāo)準(zhǔn)環(huán)境下飼養(yǎng)：溫度（23.0±0.5）℃，濕度（50.0±0.5）%，自然光線，自由進(jìn)食，進(jìn)水情況視具體分組決定。

1.2 實(shí)驗(yàn)材料及試劑

江灣1號(hào)C型腦立體定向儀（第二軍醫(yī)大學(xué)生理學(xué)教研室）；Morris水迷宮（上海吉量公司）。Aβ25-35由西格瑪奧德里奇（Sigma-Aldrich）上海貿(mào)易有限公司提供。大鼠IL-6，IL-1β和TNFα定量酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)（enzyme linked immunosorbent assay，ELISA）試劑盒均由上海為奧生物科技有限公司提供。

1.3 實(shí)驗(yàn)分組

所有50只大鼠，隨機(jī)分為5組，每組10只。（1）高劑量阿司匹林干預(yù)組（高劑量組）：給予含阿司匹林2g/L的蒸餾水溶液喂服，自由進(jìn)食。3周后側(cè)腦室內(nèi)注射Aβ溶液（將Aβ25-35溶于無(wú)菌生理鹽水，濃度10mmol/L，置37℃恒溫箱內(nèi)孵育3d后備用）5μl，再予含阿司匹林2g/L的蒸餾水溶液喂服3周，自由進(jìn)食。（2）中劑量阿司匹林干預(yù)組（中劑量組）：給予含阿司匹林1g/L的蒸餾水溶液喂服，自由進(jìn)食。3周后側(cè)腦室內(nèi)注射Aβ溶液5μl，再予含阿司匹林1g/L的蒸餾水溶液喂服3周，自由進(jìn)食。（3）低高劑量阿司匹林干預(yù)組（低劑量組）：給予含阿司匹林0.5g/L的蒸餾水溶液喂服，自由進(jìn)食。3周后側(cè)腦室內(nèi)注射Aβ溶液5μl，再予含阿司匹林0.5g/L的蒸餾水溶液喂服3周，自由進(jìn)食。（4）模型組：給予蒸餾水喂服，3周后側(cè)腦室內(nèi)注射Aβ溶液5μl，再予蒸餾水喂服，自由進(jìn)食。（5）假手術(shù)組：給予蒸餾水喂服，3周后側(cè)腦室內(nèi)注射無(wú)菌生理鹽水5μl，再予蒸餾水喂服，自由進(jìn)食。

1.4 動(dòng)物模型制作

應(yīng)用地西泮（diazepam）及氯胺酮（ketamine）進(jìn)行腹腔麻醉后，將大鼠固定在江灣1號(hào)C型腦立體定向儀上，剪去頭頂部毛發(fā)，碘酊消毒后切開(kāi)皮膚，參照包新民的《大鼠腦立體定位圖譜》選擇右側(cè)側(cè)腦室為注射靶區(qū)，于前囟向后1.0mm，中線右側(cè)旁開(kāi)1.7mm處，用牙科鉆鉆開(kāi)顱骨，暴露硬腦膜，微量注射器自腦表面垂直進(jìn)針4.0mm，將10mmol/L Aβ25-35溶液5μl緩慢注入，留針2min后緩慢撤針，骨水泥覆蓋露骨缺口，縫合皮膚切口。肌肉注射40kU青霉素鈉（penicillin sodium）預(yù)防感染。假手術(shù)組則注入等體積無(wú)菌生理鹽水，其余步驟相同。

1.5 Morris水迷宮行為學(xué)檢測(cè)（隱藏平臺(tái)獲得實(shí)驗(yàn)）

水迷宮裝置由上海吉量軟件設(shè)計(jì)，包括一個(gè)圓形不銹鋼水池，直徑140cm，高60cm，水池底和筒壁皆為黑色；池壁上標(biāo)有東南西北4個(gè)入水點(diǎn)，將水池等分為4個(gè)象限；目標(biāo)象限的中央放置一直徑為10cm，高23.5cm的圓形隱藏平臺(tái)，整個(gè)實(shí)驗(yàn)期間其位置保持不變；迷宮上方安置帶有顯示系統(tǒng)的攝像機(jī)，同步記錄大鼠運(yùn)動(dòng)軌跡。實(shí)驗(yàn)歷時(shí)5d。實(shí)驗(yàn)前動(dòng)物自由游泳2min。正式實(shí)驗(yàn)每天訓(xùn)練1次，每次2min，隨機(jī)從東、西、南、北各個(gè)入水點(diǎn)選擇一個(gè)，將動(dòng)物面向池壁放入水中，記錄動(dòng)物尋找并爬上平臺(tái)所需時(shí)間即逃避潛伏期（escape latency）。如果動(dòng)物在2min內(nèi)未找到平臺(tái)，逃避潛伏期記為2min。第1～2天為訓(xùn)練，后3d數(shù)據(jù)作為學(xué)習(xí)和記憶成績(jī)。

1.6 海馬腦組織IL-1β，IL-6和TNFα水平的測(cè)定

本實(shí)驗(yàn)采用雙抗體夾心ABC-ELISA法測(cè)定海馬腦組織IL-1β，IL-6和TNFα水平。

1.7 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

2 結(jié) 果

2.1 總體情況

所有50只大鼠總體生長(zhǎng)情況良好。第2周后，平均體質(zhì)量每周增加5～7g，體質(zhì)量無(wú)明顯異常。所有大鼠進(jìn)食情況無(wú)明顯異常，每日每只大鼠飲水量約為32ml，與阿司匹林濃度無(wú)明顯相關(guān)性。進(jìn)行方差齊性檢驗(yàn)后，飲水量數(shù)據(jù)符合方差齊性。

2.2 學(xué)習(xí)記憶能力測(cè)定

2.2.1 第1日水迷宮情況 進(jìn)行模型組與假手術(shù)組間比較，驗(yàn)證AD模型造模是否成功。兩組間數(shù)據(jù)經(jīng)方差齊性檢驗(yàn)符合正態(tài)分布，采用檢驗(yàn)分析。結(jié)果顯示模型組逃避潛伏期較假手術(shù)組明顯延長(zhǎng)[（42.96±17.51）（27.21±13.23）s，＜0.05]。說(shuō)明側(cè)腦室定向注射Aβ能使SD大鼠學(xué)習(xí)記憶能力下降，造模成功。

2.2.2 第3日水迷宮情況 第3日水迷宮情況，大鼠逃避潛伏期數(shù)據(jù)經(jīng)方差齊性分析符合正態(tài)分布，總體均數(shù)間比較采用單因素ANOVA分析。結(jié)果顯示總體均數(shù)有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異，具體情況見(jiàn)表1。

表1 第3日各組大鼠逃避潛伏期比較

Compared with model group,*＜0.05,**＜0.01; compared with sham group,#＜0.05

各組間比較采用LSD檢驗(yàn)。其中模型組與高劑量組、中劑量組、低劑量組、假手術(shù)組比較，差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，值分別為0.011，0.017，0.015，＜0.001。假手術(shù)組與中劑量組、低劑量組比較，差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，值分別為0.040和0.044。假手術(shù)組與高劑量組比較，值為0.057。其余各組間兩兩比較差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2.3 各組大鼠海馬組織IL-1β，IL-6和TNFα水平

各組取編號(hào)前8位的大鼠處死后取海馬組織，使用ELISA方法檢測(cè)IL-1β，IL-6和TNFα水平。IL-1β，IL-6和TNFα數(shù)據(jù)進(jìn)行方差齊性檢驗(yàn)后顯示符合正態(tài)分布，總體比較采用單因素ANOVA分析，各組間兩兩比較采用LSD檢驗(yàn)。

2.3.1 各組大鼠海馬組織IL-1β水平 IL-1β水平總體間比較采用單因素ANOVA分析，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，見(jiàn)表2。

表2結(jié)果表明，IL-1β水平以模型組最高，假手術(shù)組最低。各劑量組之間又分別為低劑量組最高，高劑量組最低。據(jù)此，進(jìn)一步分析各組間比較是否有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

各組間比較采用LSD檢驗(yàn)。其中模型組與高劑量組、中劑量組、假手術(shù)組比較，差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，值分別為0.014，0.050，＜0.001；低劑量組與假手術(shù)組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，值為0.010。其余各組間兩兩比較均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。

表2 5組大鼠IL-1β, IL-6及TNFα水平比較

Compared with model group,*＜0.05,**＜0.01; compared with sham group,#＜0.05,##＜0.01

2.3.2 各組大鼠海馬組織IL-6水平 IL-6水平總體間比較采用單因素ANOVA分析，差異不具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

表2結(jié)果表明，IL-6水平以模型組最高，假手術(shù)組最低，各劑量組介于兩者之間；但總體間差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2.3.3 各組大鼠海馬組織TNFα水平 TNFα水平總體間比較采用單因素ANOVA分析，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，見(jiàn)表2。

表2結(jié)果表明，TNFα水平以模型組最高，假手術(shù)組最低，各劑量組介于兩者之間。各劑量組之間又分別以中劑量組最高，高劑量組最低。據(jù)此，進(jìn)一步分析各組間比較是否有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

各組間比較采用LSD檢驗(yàn)。其中模型組與高劑量組、中劑量組、低劑量組、假手術(shù)組比較，差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，值分別為＜0.001，0.005，0.002，＜0.001；假手術(shù)組與中劑量組、低劑量組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，值分別為＜0.001和＜0.001。其余各組間兩兩比較差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

3 討 論

阿爾茨海默病主要臨床表現(xiàn)為進(jìn)行性記憶力減退、認(rèn)知功能障礙以及人格改變等癥狀。AD的主要病理改變是：大腦皮質(zhì)及海馬區(qū)的Aβ在胞外積累并形成老年斑（senile plaque，SP）、腦神經(jīng)細(xì)胞內(nèi)tau蛋白異常聚集形成的NFT、神經(jīng)元突觸功能異常及錐體神經(jīng)細(xì)胞丟失。

流行病學(xué)資料顯示，長(zhǎng)期服用阿司匹林能降低AD的患病率[1?6]。關(guān)于阿司匹林在預(yù)防AD發(fā)病中的分子機(jī)制，國(guó)內(nèi)外進(jìn)行了一些研究，主要是體外細(xì)胞實(shí)驗(yàn)，有以下主要觀點(diǎn)。（1）阿司匹林能夠顯著抑制Aβ聚合[7]。而異常聚合的Aβ是炎癥的刺激物，能刺激機(jī)體產(chǎn)生炎癥因子，增加AD的發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)；同時(shí)，Aβ可與細(xì)胞因子、補(bǔ)體、膠質(zhì)細(xì)胞等共同形成了一個(gè)慢性持續(xù)性的炎癥損傷反應(yīng)，導(dǎo)致AD病理?yè)p害持續(xù)加劇。（2）阿司匹林能夠減少tau蛋白異常磷酸化及其導(dǎo)致的NFT形成[8]。NFT可刺激機(jī)體產(chǎn)生炎癥因子，NFT的形成減少可減輕神經(jīng)元細(xì)胞的慢性炎癥反應(yīng)損傷，減少和延緩AD的發(fā)生發(fā)展。（3）阿司匹林能夠減輕Aβ誘導(dǎo)的體外培養(yǎng)海馬神經(jīng)元細(xì)胞內(nèi)Cl?濃度的增高；而神經(jīng)元細(xì)胞內(nèi)Cl?濃度的升高可增強(qiáng)谷氨酸的神經(jīng)毒性，加重AD的發(fā)生發(fā)展[9]。（4）阿司匹林可清除一氧化氮自由基，從而減少神經(jīng)元氧化應(yīng)激損傷[10]。Dragomir等[11]研究證實(shí)阿司匹林可通過(guò)蛋白激酶C誘導(dǎo)的NADPH途徑減少超氧陰離子的生成，減少活性氧生成，穩(wěn)定細(xì)胞內(nèi)鈣穩(wěn)態(tài)。此外，有研究指出，非甾體抗炎藥可抑制膽堿酯酶的活性，減少內(nèi)源性乙酰膽堿的降解，增強(qiáng)乙酰膽堿對(duì)腦膽堿受體的作用，提高膽堿神經(jīng)功能，延緩AD的發(fā)生發(fā)展，從而對(duì)AD起到治療作用[12]。Pomponi[13]等認(rèn)為，攝入小劑量阿司匹林可促使環(huán)氧化酶-2（cyclooxygenase-2，COX-2）乙?；?，乙?；蟮腃OX-2能分別使花生四烯酸（arachidonic acid，AA）和二十二碳六烯酸（docosahexaenoic acid，DHA）轉(zhuǎn)化為對(duì)神經(jīng)元有保護(hù)作用的脂質(zhì)調(diào)節(jié)劑解離素類（resolvins）和神經(jīng)保護(hù)素（neuroprotectin） D1，從而對(duì)AD具有治療作用。

AD發(fā)病過(guò)程中，中樞神經(jīng)系統(tǒng)炎癥損傷機(jī)制具有重要作用，而阿司匹林具有明顯的抗炎活性，因此我們推測(cè)阿司匹林是否可通過(guò)抑制中樞神經(jīng)系統(tǒng)炎癥因子的釋放，減少炎癥損傷，從而對(duì)AD起到一定的防治作用。阿司匹林對(duì)AD模型動(dòng)物學(xué)習(xí)記憶能力影響的體內(nèi)實(shí)驗(yàn)研究也罕見(jiàn)報(bào)道。因此我們?cè)O(shè)計(jì)了該課題。

IL-1β，IL-6和TNFα等炎癥介質(zhì)在AD的發(fā)病機(jī)制中均起到了一定的作用，如IL-1β可通過(guò)促進(jìn)Aβ的產(chǎn)生、導(dǎo)致NFT形成、誘導(dǎo)膠質(zhì)細(xì)胞活化、損害膽堿系統(tǒng)功能等多個(gè)途徑加重AD的進(jìn)展。而IL-6在AD發(fā)病機(jī)制中也起到了一定的作用。IL-6能促使神經(jīng)元表達(dá)淀粉樣前體蛋白(amyloid precursor protein，APP)增加[14]。Del Bo等[15]在原代培養(yǎng)神經(jīng)元實(shí)驗(yàn)中證實(shí)，IL-6可刺激神經(jīng)元對(duì)APP mRNA的表達(dá)增加了約1倍。IL-6誘導(dǎo)α2巨球蛋白合成，而α2巨球蛋白可使Aβ清除不完全，導(dǎo)致Aβ沉積。Qiu等[16]的實(shí)驗(yàn)提示，IL-6，Aβ及N-甲基-D-天（門）冬氨酸（N-mentyl- D-aspartic acid，NMDA）對(duì)AD的發(fā)展起協(xié)同作用。TNFα與AD的發(fā)病同樣具有密切的關(guān)系。TNFα可與神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)素相互競(jìng)爭(zhēng)受體，導(dǎo)致神經(jīng)元的老化；同時(shí)TNFα加強(qiáng)NMDA介導(dǎo)的神經(jīng)毒性作用；TNFα可影響神經(jīng)細(xì)胞內(nèi)鈣穩(wěn)態(tài)。

本次研究中，通過(guò)3d的水迷宮學(xué)習(xí)后，阿司匹林各劑量干預(yù)組大鼠逃避潛伏期較模型組縮短，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，但中劑量組及低劑量組仍較假手術(shù)組延長(zhǎng)。說(shuō)明阿司匹林的干預(yù)，對(duì)Aβ介導(dǎo)的AD模型大鼠學(xué)習(xí)記憶能力具有一定保護(hù)作用。而高劑量組與假手術(shù)組比較，值為0.057，反映該劑量組大鼠學(xué)習(xí)記憶能力與假手術(shù)組相比，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。表明高劑量阿司匹林干預(yù)組，即2g/L濃度的阿司匹林干預(yù)對(duì)AD模型大鼠學(xué)習(xí)記憶能力的保護(hù)作用可能較佳。而不同劑量阿司匹林對(duì)于Aβ介導(dǎo)的AD模型大鼠學(xué)習(xí)記憶能力影響差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，可能與樣本量較小有關(guān)，需要進(jìn)一步實(shí)驗(yàn)進(jìn)行驗(yàn)證。

我們的課題證實(shí)，Aβ側(cè)腦室定向注射能導(dǎo)致上調(diào)SD大鼠海馬組織IL-1β和TNFα的水平，并引起SD模型大鼠短期學(xué)習(xí)記憶能力一定程度的下降。表明Aβ側(cè)腦室定向注射可能是通過(guò)使IL-1β和TNFα因子釋放增加，從而對(duì)神經(jīng)元起到毒性作用，導(dǎo)致AD的發(fā)生。

本研究證實(shí)阿司匹林干預(yù)能下調(diào)Aβ介導(dǎo)的AD模型大鼠海馬組織IL-1β和TNFα的釋放水平，并減輕SD模型大鼠短期學(xué)習(xí)記憶能力的下降。由此我們推測(cè)，阿司匹林可能是通過(guò)減少炎癥因子IL-1β和TNFα等的釋放，導(dǎo)致海馬區(qū)神經(jīng)元損傷減少，從而對(duì)AD模型大鼠的學(xué)習(xí)記憶能力起到保護(hù)作用。實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)表明2g/L濃度阿司匹林干預(yù)對(duì)AD模型大鼠學(xué)習(xí)記憶能力的保護(hù)作用可能較佳。但可能由于樣本量不足，我們沒(méi)有觀察到各劑量組間明顯的差異，需要進(jìn)一步擴(kuò)大樣本量進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。

[1] Pomponi M, Di Gioia A, Bria P,. Fatty aspirin: a new perspective in the prevention of dementia of Alzheimer's type[J]? Curr Alzheimer Res, 2008, 5(5): 422?431.

[2] Sabbagh MN. Drug development for Alzheimer’s disease: where are we now and where are we headed[J]? Am J Geriatr Pharmacother, 2009, 7(3): 167?185.

[3] In’t Veld BA, Launer LJ, Breteler MM,. Pharmacologic agents associated with a preventive effect on Alzheimer’s disease: a review of the epidemiologic evidence[J]. Epidemiol Rev, 2002, 24(2): 248?268.

[4] Nilsson SE, Johansson B, Takkinen S,. Does aspirin protect against Alzheimer’s dementia? A study in a Swedish population-based sample aged ≥80 years[J]. Eur J Clin Pharmacol , 2003, 59(4): 313?319.

[5] Landi F, Cesari M, Onder G,. Non-steroidal anti-inflammatory drug (NSAID) use and Alzheimer disease in community-dwelling elderly patients[J]. Am J Geriatr Psychiatry, 2003, 11(2): 179?185.

[6] Auriel E, Regev K, Korczyn AD. Nonsteroidal anti-inflammatory drugs exposure and the central nervous system[J]. Handb Clin Neurol, 2014, 119: 577?584.

[7] Hirohata M, Ono K, Naiki H,Non-steroidal anti-inflammatory drugs have anti-amyloidogenic effects for Alzheimer’s β-amyloid fibrils[J]. Neuropharmacology, 2005, 49(7): 1088?1099.

[8] Tortosa E, Avila J, Perez M. Acetylsalicylic acid decreases tau phosphorylation at serine 422[J]. Neurosci Lett , 2006, 396(1): 77?80.

[9] Iwata R, Kitagawa K, Zhang NY,. Non-steroidal anti-inflammatory drugs protect amyloid β protein-induced increase in the intracellular Cl?concentration in cultured rat hippocampal neurons[J]. Neurosci Lett, 2004, 367(2): 156?159 .

[10] Asanuma M, Nishibayashi-Asanuma S, Miyazaki I,. Neuroprotective effects of non-steroidal anti-inflammatory drugs by direct scavenging of nitric oxide radicals[J]. J Neurochem, 2001, 76(6): 1895?1904.

[11] Dragomir E, Manduteanu I, Voinea M,. Aspirin rectifies calcium homeostasis, decreases reactive oxygen species, and increases NO production in high glucose-exposed human endothelial cells[J]. J Diabetes Complications, 2004, 18(5): 289?299.

[12] Muraoka S, Miura T. Inactivation of cholinesterase induced by non-steroidal anti-inflammatory drugs with horseradish peroxidase: implication for Alzheimer's disease[J]. Life Sci, 2009, 84(9-10): 272?277.

[13] Pomponi MF, Gambassi G, Pomponi M,. Why docosahexaenoic acid and aspirin supplementation could be useful in women as a primary prevention therapy against Alzheimer’s disease[J]? Ageing Res Rev, 2011, 10(1): 124?131.

[14] Zhang Y, Hayes A, Pritchard A,. Interleukin-6 promoter polymorphism: risk and pathology of Alzheimer’s disease[J]. Neurosci Lett, 2004, 362(2): 99?102.

[15] Del Bo R, Angeretti N, Lucca E,. Reciprocal control of inflammatory cytokines, IL-1 and IL-6, and β-amyloid production in cultures[J].Neurosci Lett, 1995, 188(1): 70?74.

[16] Qiu Z, Gruol DL. Interleukin-6, β-amyloid peptide and NMDA interactions in rat cortical neurons[J]. J Neuroimmunol, 2003, 139(1-2): 51?57.

（編輯: 周宇紅）

Effect of aspirin on learning and memory abilities and brain expression of IL-6, IL-1β and TNFα in Alzheimer’s model rats

HU Yu-Hong1, TUO Xi-Ping2*, LUO Lan3

(1Department of Cardiology, General Hospital of Jinan Military Command, Jinan 250031, China;2Department of Geriatrics, Affiliated Changhai Hospital, the Second Military Medical University, Shanghai 200433, China;3Department of Geriatrics, Affiliated Hospital of Nantong University, Nantong 226001,China)

To investigate whether there is preventive and treatment effect of aspirin on the rat model of Alzheimer’s disease (AD) and its influence on the expression of interleukin (IL)-6, IL-1β and tumor necrosis factorα(TNFα) in the models.A total of 50 SD rats were randomly divided into 5 groups: control group, model group, and low-, middle- and high-dosed aspirin groups. After fed with normal saline containing aspirin at 0, 0.5, 1 and 2g/L respectively for the later 4 groups for 3 weeks, the rats model of AD was established by injecting 5 μl amyloid-beta protein 25?35 (Aβ25-35) into the lateral cerebral ventricle followed by another 3 weeks’ aspirin treatment, while those of control was given normal saline at same volume. The escape latency of the rats was tested in Morris water maze, and the levels of IL-6, IL-1β, TNFα in the brain were detected by enzyme linked immunosorbent assay (ELISA).The mean escape latency was significantly shorter in the high-, middle- and low-dosed aspirin groups than in the control group. The brain levels of IL-1β was the highest in the model group, the lowest in the control group, and in a decreasing order in the low-, middle- and high-dosed aspirin groups, with significant difference among them. The brain level of IL-6 was in a similar trend as that of IL-1β in the 5 groups, but there was no significant difference among them. The level of TNFα was also the highest in the model group, and the lowest in the control group, and those in the other 3 groups were between the 2 values. Among the 3 aspirin groups, the middle-dosed group had the highest level of TNFα, and the low-dose group had the lowest level, with significant difference between the 2 groups.Lateral cerebral ventricle injection of Aβ25-35 causes short-term decrease in learning and memory abilities in rats. Aspirin intervention attenuates the induced decrease in the abilities. It might exert the protective effect on the learning and memory abilities through down-regulating IL-1β, IL-6, and TNFα in the brain.

Alzheimer’s disease; rats; aspirin; inflammatory factors; dementia

(10zs57).

R745.7

A

10.3724/SP.J.1264.2014.00080

2014?03?17;

2014?04?28

上海市教委2010年度科研創(chuàng)新項(xiàng)目資助（10zs57）

拓西平, E-mail: xptuo_01@126.com