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        ELISA法檢測(cè)HIV抗體的室內(nèi)質(zhì)控研究

        2014-04-17 15:27:29程俊麗
        中國(guó)實(shí)用醫(yī)藥 2014年6期
        關(guān)鍵詞:標(biāo)準(zhǔn)差限值抗原

        程俊麗

        ELISA法檢測(cè)HIV抗體的室內(nèi)質(zhì)控研究

        程俊麗

        目的 分析ELISA法檢測(cè)HIV抗體的室內(nèi)質(zhì)控技術(shù)。方法 采用即刻法進(jìn)行室內(nèi)質(zhì)控,以S/CO值及A值表示HIV。結(jié)果 兩次質(zhì)控的統(tǒng)計(jì)結(jié)果差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05), 第8次S/CO值2.581為在控, 第15次S/CO值為2.915, 為最大值, 屬于在控。結(jié)論 在采用ELISA法對(duì)HIV抗體進(jìn)行檢測(cè)時(shí),應(yīng)利用即刻法強(qiáng)化室內(nèi)質(zhì)控, 以便能夠使檢測(cè)結(jié)果變得更為準(zhǔn)確。

        HIV抗體;ELISA;檢測(cè)

        HIV抗體篩查是檢測(cè)HIV感染的重要途徑, 在篩查HIV抗體時(shí)應(yīng)用酶聯(lián)免疫法(ELISA)有助于提高抗體檢測(cè)效率[1]。本文分析了晉中市疾病預(yù)防控制中心應(yīng)用ELISA法檢測(cè)HIV抗體的室內(nèi)質(zhì)控方法, 報(bào)告如下。

        1 材料與方法

        1. 1 材料 ELISA法檢測(cè)試劑盒為珠海麗珠酶聯(lián)免疫試劑盒, 室內(nèi)質(zhì)控法為即刻法。第一組質(zhì)控血清為珠海麗珠L(zhǎng)5,第二組為梅里埃, 檢測(cè)試劑為上海梅里埃檢測(cè)試劑, 采用自配質(zhì)控血清。

        1. 2 方法 嚴(yán)格按照酶聯(lián)免疫試劑盒當(dāng)中的說(shuō)明書(shū)進(jìn)行ELISA檢測(cè), 以S/CO值及A值表示HIV。采用即刻法對(duì)兩組檢驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行質(zhì)控。統(tǒng)計(jì)方法如下:如SI下限值及上限值n2s值且n3s值, 則表示警告。如在質(zhì)控中發(fā)現(xiàn)SI下限值及上限值不屬于在控狀態(tài), 則刪除該數(shù)值, 并對(duì)當(dāng)次結(jié)果進(jìn)行重新測(cè)定。如在控?cái)?shù)據(jù)多于20個(gè), 則可以依據(jù)測(cè)定結(jié)果建立質(zhì)控表及繪制質(zhì)控圖, 質(zhì)控圖的繪制工具為EXCEL表格。

        1. 3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 利用統(tǒng)計(jì)軟件SPSS 20.0對(duì)兩次質(zhì)控結(jié)果進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析, 計(jì)數(shù)資料采用( x-±s)表示, 通過(guò)χ2及t檢驗(yàn)檢驗(yàn), 如P<0.05則差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

        2 結(jié)果

        經(jīng)統(tǒng)計(jì)檢驗(yàn)發(fā)現(xiàn), 采用即刻法進(jìn)行ELISA室內(nèi)質(zhì)控及按照統(tǒng)計(jì)學(xué)方法計(jì)算之后, 得出的兩組統(tǒng)計(jì)結(jié)果差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。兩組室內(nèi)質(zhì)控結(jié)果如下:第一組:第8次S/ CO值2.581為在控, 前7次測(cè)定時(shí)的標(biāo)準(zhǔn)差SD以及變異系數(shù)CV偏小, 當(dāng)標(biāo)準(zhǔn)差及變異系數(shù)偏小時(shí), SI上限值就會(huì)不斷增大;因此采用即刻法對(duì)第8次S/CO值進(jìn)行判定時(shí), 就會(huì)出現(xiàn)在控狀態(tài)。第15次S/CO值為2.915, 為最大值, 屬于在控。原因?yàn)榈?5次的變異系數(shù)CV值較大, 當(dāng)CV較大時(shí), SI上限值就會(huì)減小, 因此第15次SI值屬于在控狀態(tài)。第二組:第6次S/CO值2.357為在控, 在控產(chǎn)生的原因是前5次測(cè)定時(shí)的標(biāo)準(zhǔn)差SD以及變異系數(shù)CV偏小。第10次S/CO值為2.732, 為最大值, 屬于在控, 原因?yàn)榈?0次的變異系數(shù)CV值較大。

        3 討論

        ELISA是一種常用的HIV抗體檢測(cè)法, ELISA的基本原理是使固相載體與抗體或抗原結(jié)合在一起, 從而使抗體及抗原保持原有的免疫活性[2]。在進(jìn)行檢測(cè)時(shí), 固相載體中的抗體及抗原就會(huì)與酶標(biāo)抗體及抗原發(fā)生反應(yīng), 在兩者發(fā)生反應(yīng)之后, 利用洗滌劑分開(kāi)固相載體當(dāng)中的抗體及抗原復(fù)合物,隨后再測(cè)定受檢物質(zhì)與酶量即可。由于酶具有較高的化學(xué)催化頻率, 所以利用 ELISA檢測(cè)HIV抗體具有敏感度較高的優(yōu)勢(shì)。本組HIV抗體的檢測(cè)人群主要有自愿咨詢(xún)檢測(cè)人員、羈押犯人、住院患者以及無(wú)償獻(xiàn)血人員, 檢測(cè)人群符合全國(guó)HIV抗體檢測(cè)的總體形勢(shì)。雖然ELISA法是一種較為靈敏的檢測(cè)法, 但為了能夠進(jìn)一步提高HIV抗體檢測(cè)結(jié)果及分析結(jié)果的精確性, 還應(yīng)在進(jìn)行ELISA檢測(cè)的過(guò)程中利用即刻法控制檢測(cè)質(zhì)量。在應(yīng)用即刻法控制ELISA檢測(cè)質(zhì)量時(shí), 應(yīng)根據(jù)實(shí)際檢測(cè)情況建立起合理的質(zhì)控均值以及標(biāo)準(zhǔn)差, 并處理好特殊檢測(cè)結(jié)果, 以便能夠保證質(zhì)控結(jié)果的有效性。

        即刻法是一種簡(jiǎn)便易行的室內(nèi)質(zhì)控法, 且具有質(zhì)控準(zhǔn)確有效、質(zhì)控圖可視的優(yōu)點(diǎn), 因此在ELISA質(zhì)控中被廣泛使用。本研究應(yīng)用即刻法完成了ELISA法檢測(cè)HIV抗體的室內(nèi)質(zhì)控, 且得出了較為合理的質(zhì)控結(jié)果。疾控中心每年約復(fù)核100份HIV抗體樣本, 目前復(fù)核量還在不斷上升。如在復(fù)核時(shí)發(fā)現(xiàn)樣本有反應(yīng), 則送往太原市CDC進(jìn)行確證, 目前在確診試驗(yàn)中確證的樣本已超過(guò)60%。

        [1] 曹華.血站ELISA法篩查HIV抗體陽(yáng)性標(biāo)本與免疫印跡法檢測(cè)結(jié)果的比較.中外健康文摘, 2012,09(16):59-60.

        [2] 李仁道,萬(wàn)莉青.艾滋病初篩實(shí)驗(yàn)室中酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)檢測(cè)HIV抗體影響因素的探討分析.中國(guó)保健營(yíng)養(yǎng)(下旬刊), 2012, 22(9):3053.

        030600 山西省晉中市疾病預(yù)防控制中心檢驗(yàn)科

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