施 昶 沈詩偲 黃海飛 李夢園 韓 偉

（華東理工大學(xué)藥學(xué)院中藥現(xiàn)代化工程中心，上海200237）

0 引言

所有的多因素實驗設(shè)計都可初分為兩大類：其一為“全因子實驗”，即全部實驗因素的水平全面組合，這種設(shè)計被稱為“析因設(shè)計”（要求在各組合條件下做2次以上獨立重復(fù)實驗）；其二為“部分因子實驗”，即僅做“析因設(shè)計”全部實驗點中的一部分[1]。在科研實驗，例如新藥研究中，當(dāng)實驗涉及的多個實驗因素之間的交互作用都需要被考察時，為了使結(jié)論較精確，一般采取析因設(shè)計。但其所需實驗次數(shù)太多，操作過于不便，需要選取實驗次數(shù)較少的實驗設(shè)計優(yōu)化法。國內(nèi)常用均勻設(shè)計和正交設(shè)計進(jìn)行優(yōu)化，但這2種方法實驗精度不夠，建立的數(shù)學(xué)模型預(yù)測性較差。國外近年來常用集數(shù)學(xué)和統(tǒng)計學(xué)方法于一體的效應(yīng)面優(yōu)化法（response surface methodology，RSM）進(jìn)行優(yōu)化[2-4]，實驗設(shè)計采用星點設(shè)計（central composite design，CCD）[5-7]。星點設(shè)計-效應(yīng)面法已廣泛用于藥物制劑研究、中藥炮制、制粒和提取等工藝中，應(yīng)用比較成熟，且特點鮮明[8]。

1 星點設(shè)計-效應(yīng)面優(yōu)化法的基本原理

1.1 基本概念

星點設(shè)計（CCD）是一種新型的試驗設(shè)計方法，由二水平析因設(shè)計加軸點及中心點組成，是一種多因素五水平的試驗設(shè)計。在統(tǒng)計學(xué)中，效應(yīng)面法（RSM）探討了幾個解釋變量與一個或多個效應(yīng)變量之間的關(guān)系。其主要思想是使用一個序列的設(shè)計實驗，用二次多項式模式以獲得最佳的效應(yīng)。效應(yīng)面方法（RSM）集合數(shù)學(xué)和統(tǒng)計技術(shù)，在反應(yīng)是由幾個變量影響的情況下，通過建模和分析的方法優(yōu)化這個反應(yīng)。因此，RSM的目標(biāo)是在一個試驗的系統(tǒng)中或在一個滿足操作要求的因素空間中確定最優(yōu)操作[9]。其所考察的因素為自變量，用x1，x2，……，xk表示；考察指標(biāo)又稱結(jié)果或效應(yīng)（response）為因變量，用y表示效應(yīng)與考察因素之間的關(guān)系，可用函數(shù)y=f（x1，x2，……，xk）+E表示（E為偶然誤差），該函數(shù)所代表的空間曲面稱為效應(yīng)面。在實際操作中，常用一近似函數(shù)y=f′（x1，x2，……，xk）+E估計函數(shù)f，f′所代表的空間曲面為模擬效應(yīng)面，也是優(yōu)化法實際操作效應(yīng)面[8]。

1.2 基本原理

簡單來說，效應(yīng)面優(yōu)化法就是通過描繪效應(yīng)對考察因素的效應(yīng)面，即設(shè)計建立能夠近似地模擬效應(yīng)面函數(shù)f的數(shù)學(xué)模型f′，并從效應(yīng)面上選擇較佳的效應(yīng)區(qū)，從而回推出自變量取值范圍，即最佳實驗條件的優(yōu)化法。該方法主要考察自變量對效應(yīng)的作用并對其進(jìn)行優(yōu)化。其中，自變量必須連續(xù)且可被精準(zhǔn)控制。

由于效應(yīng)對因素的真實效應(yīng)面僅為假設(shè)，效應(yīng)面函數(shù)f不可能用數(shù)學(xué)模型表述。因此，采用效應(yīng)面優(yōu)化法所建立的模擬效應(yīng)面函數(shù)f′，其與原函數(shù)f的近似程度關(guān)系到效應(yīng)面的近似程度與優(yōu)選條件的準(zhǔn)確度。

RSM優(yōu)化過程包括：

（1）選擇可靠的實驗設(shè)計以適應(yīng)線性或非線性模型擬合。

（2）正確描述結(jié)果或指標(biāo)與各考察因素的關(guān)系，即建立合適的數(shù)學(xué)模擬方程。建立準(zhǔn)確的數(shù)學(xué)模型是解決問題的關(guān)鍵，除了要求實驗者盡量準(zhǔn)確地控制實驗條件之外，還需選擇合適的數(shù)學(xué)模型。以前多采用線性模型，但大多數(shù)情況下，各因素對結(jié)果的影響并非線性，選用二項式或更高次多項式往往會得到較好的效果。

（3）依據(jù)數(shù)學(xué)方程選取較佳工藝。效應(yīng)與因素之間的關(guān)系表現(xiàn)在效應(yīng)面上，從效應(yīng)面上可以讀取較佳工藝。線性的為平面，非線性的為曲面。在整個考察范圍內(nèi)，在靠近較佳區(qū)，非線性關(guān)系居多；愈遠(yuǎn)離較佳區(qū)，面的彎曲度越接近線性。因此，星點實驗的復(fù)合相關(guān)系數(shù)較高，預(yù)測值更接近真實值，且實驗次數(shù)也較少，結(jié)果直觀。當(dāng)指標(biāo)較多時，各效應(yīng)間需達(dá)成妥協(xié)，避免產(chǎn)生每個指標(biāo)優(yōu)選的條件可能相互矛盾的情況。因此，需要使所有指標(biāo)綜合為一個值，該值可反映總體效應(yīng)結(jié)果[8-11]。

2 星點設(shè)計-效應(yīng)面優(yōu)化法的操作步驟

2.1 星點試驗設(shè)計與數(shù)據(jù)分析

首先，要確定當(dāng)前的實驗條件或者輸入變量的水平是否接近效應(yīng)面的最優(yōu)位置，通常確定因素及水平范圍的方法有2類：（1）通過預(yù)實驗的方法，經(jīng)過初步篩選，確定對指標(biāo)影響較大的因素及其水平范圍，一般要求選取的因素及其水平范圍接近效應(yīng)面的較優(yōu)區(qū)。該方法研究者可憑經(jīng)驗直接確定水平范圍，精準(zhǔn)度待考證，但操作方便快捷；（2）通過一階效應(yīng)曲面的正交設(shè)計、零水平處的擬合檢驗、最速上升搜索法[12]逼近曲面的最優(yōu)位置，該類方法確定水平范圍較準(zhǔn)確，但操作繁瑣，耗時長。其次，在確定各考察因素的代碼水平及對應(yīng)物理量的基礎(chǔ)上需要得出星點實驗設(shè)計表（實驗設(shè)計表的一般水平取值為0、±1、±a，其中a=（F）1/4，F(xiàn)=2k或F=2k×1／2（k≥5），F(xiàn)為析因設(shè)計部分試驗次數(shù)，k為因素數(shù)）。

2.2 模型擬合

確定因變量，使用Origin軟件對各因素進(jìn)行多元線性回歸和二次多項式擬合，擬合模型Y=b0+b1X1+b2X2+b3X3，二次多項式方程Y=b0+b1X1+b2X2+b3X3+b4X12+b5X22+b6X32+b7X1X2+b8X2X3+b9X1X3。各自擬合結(jié)果中的復(fù)相關(guān)系數(shù)為r和P，模型的好壞通過相關(guān)系數(shù)（r）進(jìn)行判斷，從而得出擬合度高、預(yù)測性好的數(shù)據(jù)模型，該模型一般取二次多項式模型。

2.3 效應(yīng)面優(yōu)化及預(yù)測性評價

根據(jù)擬合方程，固定其中1個因素水平，即可分別回執(zhí)出1個因素與另外2個實驗因素的三位效應(yīng)關(guān)系圖，在曲面圖上選取較佳工藝范圍。按最佳工藝條件重復(fù)試驗多次取平均值，計算預(yù)測值與實測值的偏差（其絕對值越小，說明預(yù)測性越好），證明建立的二項式擬合方程是否可以描述工藝中各因素與評價指標(biāo)的關(guān)系。

3 星點設(shè)計-效應(yīng)面優(yōu)化法在處方篩選和優(yōu)化中的具體應(yīng)用

3.1 優(yōu)化微丸處方

微丸特指由藥物與輔料構(gòu)成的直徑小于2.5 mm的球狀實體，與通常所述的丸劑相比，其主要特點在于：在胃腸道的分布面積較大，吸收較快，生物利用度高，可以制成速釋微丸制劑；可以對微丸進(jìn)行包衣處理或加入適當(dāng)?shù)淖铚牧希瞥删忈屛⑼?。中藥微丸具有外形美觀，流動性好，易于壓片、裝膠囊、分劑量，內(nèi)部堅實，含藥量大，可以減少和外界空氣接觸，改善藥物穩(wěn)定性和中藥易吸潮的特性等優(yōu)點[13]。

在星點設(shè)計-效應(yīng)面優(yōu)化法中，需要考察不同釋藥速度的微丸組合、最佳輔料處方組合、試劑濃度、流動性、崩解時限等[13]對處方篩選的影響，從而在此基礎(chǔ)上，利用表面效應(yīng)分析法優(yōu)化微丸制備工藝的處方。

張紀(jì)興等[14]利用表面效應(yīng)分析法對復(fù)方口瘍清微丸的處方進(jìn)行了優(yōu)化，以輔料微晶纖維素和微粉硅膠以及崩解劑交聯(lián)聚維酮的用量為考察因素，微丸的圓整度（平面臨界角Φ/°）、流動性（休止角α/°）和崩解時限為考察指標(biāo)。得出結(jié)論：非線性模型中的三次多項式模型是描述指標(biāo)與因素之間定量關(guān)系的最佳模型。按最佳處方制備的微丸，其圓整度、流動性和溶散時限理論預(yù)測值與實測值偏差較小，模型具有良好的預(yù)測性。

黃健等[15]以微丸在1 h、4 h、8 h的釋放度作為考察指標(biāo)，將Eudrag it RS 30D與Eudrag it RL 30D的比例和包衣增重為自變量，采用星點設(shè)計-效應(yīng)面優(yōu)化法，對緩釋包衣處方進(jìn)行優(yōu)化。經(jīng)F2（相似因子）檢驗，3批自制樣品的釋藥曲線與理論釋藥曲線基本一致，所建模型具有較好的實用性。

3.2 優(yōu)化滲透泵片處方

滲透泵片是由藥物、半透膜材料、滲透壓活性物質(zhì)和推動劑等組成的，以滲透壓作為釋藥能源的控釋片滲透泵片在體內(nèi)釋藥，除均勻恒定外，其釋藥速率不受胃腸道可變因素，如蠕動、pH、胃排空時間等的影響，而且適用于制備各種溶解度的藥物，是迄今為止口服控釋制劑中最為理想的一種。正因為口服滲透泵控釋制劑具有其他口服緩釋、控釋制劑難以達(dá)到的優(yōu)點，因此對原有制備技術(shù)的完善和簡化、對難溶性藥物制備滲透泵片的深入研究以拓寬適用藥物的范圍以及新的包衣材料的尋找，可以結(jié)合星點設(shè)計-效應(yīng)面優(yōu)化法來完成。

許鶯等[16]采用星點設(shè)計-效應(yīng)面優(yōu)化法優(yōu)化尼美舒利雙層滲透泵的處方，以12 h藥物累積釋放量、釋放曲線的線性為考察指標(biāo)，以含藥層聚氧乙烯量、包衣膜中致孔劑量、包衣增質(zhì)量為考察的主要因素，成功找到了最優(yōu)釋藥區(qū)域。優(yōu)化處方為：含藥層聚氧乙烯220.27mg，致孔劑用量質(zhì)量分?jǐn)?shù)19.27%，包衣增質(zhì)量6.81%。自制滲透泵與預(yù)測值基本一致，2～12 h內(nèi)藥物呈零級釋放特征。

張世忠等[17]以片芯藥層中混懸劑聚氧乙烯、促滲劑、包衣液中增塑劑聚乙二醇的用量和包衣膜增重為考察因素，以2 h、6 h、12 h累積釋放量和2～12 h累積釋放曲線的線性程度作為優(yōu)化指標(biāo)，得到最優(yōu)處方組成為：混懸劑為197 mg，促滲劑為38 mg，致孔劑為3.8 g，包衣增量質(zhì)量分?jǐn)?shù)為7.9%。釋放曲線在2～12 h呈零級釋放特征顯著，12 h累計釋放量90%，實測值與預(yù)測值無明顯差異，實現(xiàn)了處方優(yōu)化。

3.3 優(yōu)化緩釋片處方

緩釋片是指在水中或規(guī)定的釋放介質(zhì)中緩慢地非恒速釋放藥物的片劑。緩釋片在時間上比普通片釋放持久，不會像普通片那樣一到體內(nèi)就完全釋放，這樣緩釋片就不會對胃腸道產(chǎn)生較大刺激。其優(yōu)點在于釋放持久，對胃腸道有保護(hù)作用。星點實驗設(shè)計-效應(yīng)面優(yōu)化法中根據(jù)預(yù)實驗和單因素實驗結(jié)果，選擇影響較顯著的考察因素設(shè)計因素水平表，通常以羥丙基甲基纖維素（HPMC）的用量、乳糖的用量等[18]為考察因素選取較佳工藝，并進(jìn)行預(yù)測分析。

王利勝等[19]利用星點設(shè)計-效應(yīng)面法優(yōu)化鹽酸普羅帕酮緩釋片處方，以羥丙基甲基纖維素、乳糖的用量為考察因素，體外累積釋放度為考察指標(biāo)，優(yōu)化處方中羥丙基甲基纖維素和乳糖的用量分別為31.19%～32.16%、8.67%～14.7%，預(yù)測值與實測值的偏差均在6%以內(nèi)。實驗得出結(jié)論：通過星點設(shè)計-效應(yīng)面法所建立的數(shù)學(xué)模型具有準(zhǔn)確的預(yù)測性。

3.4 優(yōu)化片劑處方

片劑是藥物與輔料均勻混合后壓制而成的片狀或異形片狀的固體制劑。片劑為干燥固體，某些易氧化變質(zhì)及易潮解的藥物可借包衣加以保護(hù)，因此光線、空氣、水分等對其影響較小。通常片劑具有溶出度及生物利用度較丸劑好、劑量準(zhǔn)確、片劑內(nèi)藥物含量差異較小的優(yōu)點。在星點設(shè)計-效應(yīng)面優(yōu)化法中，需要以乳糖的用量、粘合劑的濃度、片劑硬度為考察因素，以崩解時間和溶出度為考察指標(biāo)，分別用多元線性模型、二次多項式模型描述考察指標(biāo)和3個考察因素之間的數(shù)學(xué)關(guān)系，繪制效應(yīng)面和等高線圖，確定較優(yōu)處方并進(jìn)行驗證。

吳海健等[20]通過星點設(shè)計-效應(yīng)面法優(yōu)化柘樹提取物片劑處方，以微晶纖維素（microcrystalline cellulose，MCC）的用量、乳糖的用量和黏合劑聚維酮（polyvinylpynolidone，PVP）的濃度為考察因素，以崩解時間和3個有效成分的溶出度為考察指標(biāo)，根據(jù)二次多項式模型，發(fā)現(xiàn)3個考察因素和4個考察指標(biāo)之間存在可信的定量關(guān)系。優(yōu)選的最佳處方：MCC的用量40 mg，乳糖的用量70 mg，PVP濃度為4%，優(yōu)化處方各設(shè)定的預(yù)測值和測定值非常接近。采用星點設(shè)計-效應(yīng)面法得到了基于二次多項式模型的柘樹提取物片劑處方優(yōu)化模型，實現(xiàn)了該片劑的處方優(yōu)化。

3.5 優(yōu)化滴丸處方

滴丸劑指固體或液體藥物與適當(dāng)物質(zhì)（一般稱為基質(zhì)）加熱熔化混勻后，滴入不相混溶的冷凝液中，收縮冷凝而制成的小丸狀制劑。其基質(zhì)容納液態(tài)藥物量大，故可使液態(tài)藥物固化。滴丸多通過舌下黏膜直接吸收，進(jìn)入血液循環(huán)，避免了吞服時引起的肝臟首過效應(yīng)以及藥物在胃內(nèi)的降解損失，使藥物能夠高濃度到達(dá)靶器官。在星點設(shè)計-效應(yīng)面優(yōu)化法中，根據(jù)單因素考察試驗，藥物基質(zhì)泊洛沙姆188的質(zhì)量分?jǐn)?shù)對滴丸的各方面指標(biāo)有很大影響。以上述考察因素作為自變量，溶出度與崩散時間為因變量，通過擬合二次方程，得到二次項回歸模型，并對交互項作用進(jìn)行分析，與預(yù)測值進(jìn)行比較。

陳偉等[21]采用固體分散技術(shù)將水飛薊素制成滴丸，以增加其溶出速度，提高生物利用度。以星點設(shè)計-效應(yīng)面優(yōu)化法對制備工藝進(jìn)行優(yōu)化，篩選最佳處方，發(fā)現(xiàn)三次多項式是描述指標(biāo)與因素之間的最佳模型，r=0.998。最佳處方滴丸的崩散時間及溶出度的理論預(yù)測值與實測值偏差較小，模型具有良好的預(yù)測性。60 min溶出度為普通片劑的19倍。

張婷等[22]以藥物基質(zhì)泊洛沙姆188和吐溫80的質(zhì)量分?jǐn)?shù)為自變量，溶出T50、圓整度和溶散時限為因變量，采用星點設(shè)計-效應(yīng)面優(yōu)化法優(yōu)選酸棗仁黃酮滴丸處方。實驗推出結(jié)論：二次多項式模型相關(guān)系數(shù)優(yōu)于多元線性模型，復(fù)相關(guān)系數(shù)為0.941 9，為最終擬合模型；通過星點設(shè)計-效應(yīng)面法建立的模型預(yù)測性良好，可用于對酸棗仁黃酮滴丸處方的優(yōu)化。

3.6 優(yōu)化納米粒處方

在藥劑學(xué)中，一般將納米粒的粒徑界定在1～1000nm，包括聚合物納米囊與納米球、藥質(zhì)體、脂質(zhì)納米粒、納米乳和聚合物膠束。作為新型的藥物載體，納米粒是目前研究的熱點[23]。納米粒通常有如下特點：較高的載藥量（如大于30%）；較高的包封率（如大于80%）；可控制藥物的釋放；有較長的體內(nèi)循環(huán)時間，減少藥物被網(wǎng)狀內(nèi)皮吞噬系統(tǒng)（RES）吞噬；載體材料可生物降解等。采用星點設(shè)計-效應(yīng)面優(yōu)化法進(jìn)行多元線性回歸和二項擬合對篩選處方的影響的主要因素進(jìn)行考察，以脂質(zhì)用量、表面活性劑用量、藥物量等為自變量，以包封率及載藥量為因變量，用效應(yīng)面法選取最佳工藝條件，并進(jìn)行預(yù)測分析。

梁健欽等[24]采用星點設(shè)計-效應(yīng)面法優(yōu)選白藜蘆醇固體脂質(zhì)納米粒的處方，采用熱高壓均質(zhì)法制備白藜蘆醇固體脂質(zhì)納米粒，以白藜蘆醇包封率及載藥量作為評價指標(biāo)，考察脂質(zhì)用量、表面活性劑用量、藥物量對評價指標(biāo)的影響。得到的優(yōu)選的最佳處方為：單硬脂酸甘油酯用量為415%、泊洛沙姆用量為6%、白藜蘆醇投藥量為0.45%，OD值與理論值偏差-4.12%。說明了星點設(shè)計-效應(yīng)面法能有效優(yōu)選RES-SLN處方。

4 星點設(shè)計-效應(yīng)面法與其他數(shù)據(jù)處理方法結(jié)合設(shè)計試驗

4.1 星點設(shè)計-效應(yīng)面法與多水平因子分析結(jié)合

因子分析模型（factor analysismodel）是根據(jù)原始變量間的相關(guān)性大小將變量進(jìn)行分組，以便同組內(nèi)的變量之間相關(guān)性較高，不同組的變量間相關(guān)性較低，每組變量代表一個基本結(jié)構(gòu)[25]。它以最少的信息丟失，將原始眾多變量綜合成較少的幾個綜合因子，減小實際建模時多個變量給統(tǒng)計分析帶來的計算量大和信息重疊的問題，能夠起到有效降維的目的。很多情況下，數(shù)據(jù)具有層次結(jié)構(gòu)或多水平結(jié)構(gòu)。研究多個因素間關(guān)系及具有這些因素的個體之間的一系列統(tǒng)計分析方法稱為多水平因子分析。

當(dāng)采用星點設(shè)計-效應(yīng)面法優(yōu)化試驗，遇到考察的精度不夠的情況時，由于CCD優(yōu)選的精度與多水平因子分析相比是較低的，可設(shè)計CCD與多水平因子分析相結(jié)合的方法，從而提高試驗的精度。如Julienne等[26]綜合了CCD效應(yīng)面法與多水平因子分析：先進(jìn)行CCD分析數(shù)據(jù)，再于較佳區(qū)域內(nèi)結(jié)合效應(yīng)面多水平因子分析，試驗效果更佳。

4.2 星點設(shè)計-效應(yīng)面法與多指標(biāo)處理方法結(jié)合

多指標(biāo)綜合評價是指人們根據(jù)不同的評價目的，選擇相應(yīng)的評價形式，據(jù)此選擇多個因素或指標(biāo)，并通過一定的評價方法，將多個評價因素或指標(biāo)轉(zhuǎn)化為能反映評價對象總體特征的信息[27]。無綱量化所選用的公式、綜合指標(biāo)的合成方法和確定指標(biāo)權(quán)重的方法決定著評價方法的種類，如層次分析加權(quán)法、相對差距和法、主成分分析法[28]等。

當(dāng)采用星點設(shè)計-效應(yīng)面法優(yōu)化試驗時，如果遇到因素較多的情況，方差分析又不明顯，此時可采用多指標(biāo)處理方法對數(shù)據(jù)進(jìn)行二次分析。Abu-Izza KA等[4]采用多指標(biāo)處理方法考察了自變量對AZT乙基纖維性質(zhì)的影響，優(yōu)選的優(yōu)化條件預(yù)測值與真實值偏差較小，使應(yīng)用CCD效應(yīng)面優(yōu)化法選擇的條件具有良好的可預(yù)測性。

5 結(jié)語

近年來，新型給藥系統(tǒng)的處方篩選和工藝優(yōu)化應(yīng)用較多，在其過程中常涉及多個因素的考察，當(dāng)因素水平數(shù)較多時，考慮到試驗成本和試驗周期，需采用試驗次數(shù)較少的試驗設(shè)計優(yōu)化法。國外近年來常用的CCD-RSM，通過非線性模型擬合得出最佳條件，很好地彌補(bǔ)了國內(nèi)現(xiàn)用的比較成熟的正交設(shè)計和均勻設(shè)計優(yōu)化法的不足（其基于線性模型，不適合二次和二次以上的多項式模型）。

星點設(shè)計-效應(yīng)面法比正交試驗法更簡化，比均勻設(shè)計法更全面。CCD設(shè)計雖然操作簡便，但相對于因子分析，精度仍待提高，且要求自變量必須是連續(xù)的且能被操作者自由控制的。該設(shè)計法最大的優(yōu)點是可對未做過的試驗進(jìn)行預(yù)測，但同時需有豐富的專業(yè)知識和一定的預(yù)實驗來確定各因素的范圍。如果試驗先用CCD找到最優(yōu)區(qū)，再使用因子分析在較小的范圍內(nèi)運用效應(yīng)面優(yōu)化法會使得效果更好?？傮w來說，在中藥處方篩選和中藥制劑工藝優(yōu)化中采用效應(yīng)面優(yōu)化法可準(zhǔn)確反映較佳處方配比與較佳的工藝參數(shù)，采用CCD-RSM可以很好地應(yīng)用于藥學(xué)領(lǐng)域，有推廣應(yīng)用價值。

［1］胡良平，張?zhí)烀?，劉惠?用數(shù)據(jù)挖掘技術(shù)實現(xiàn)多因素實驗設(shè)計［J］.中國衛(wèi)生統(tǒng)計，2006，23（4）

［2］Iskandarani B,Clair JH,Patel P,et al.Simul taneous optimization of capsule and tablet formulation using response sur face methodology［J］.Drug Dev Ind Pharm,1993，19（16）

［3］ Abu-Izza KA,Garcia-Cont reras L,Lu DR.Preparation and evaluation of sustained release A-ZT-loaded microspheres:optimization of the release characteristics using response sur face methodology［J］.JP harm Sci,1996，85（2）

［4］ Abu-Izza KA,Garcia-Cont reras L,Lu DR.Prepa-ration and evaluation of zidovudine-loaded sustained-release microspheres.2.Optimization of mul tiple response variable［J］.J Pharm Sci,1996，85（6）

［5］ McLeod AD,L am FC,Gupta PK,et al.Optimized synthesis of polyglutaraldehyde nanopar t-icles using cent ral composite design［J］.J Pharm Sci,1988，77（8）

［6］ Hassan EE,Parish RC,Gal lo JM.Optimized formulation of magnetic chitosan microspheres containing the anticancer agent,oxant razole［J］.Pharm Res,1992，9（3）

［7］ Branchu S,Forbes RT,York P,et al.A cent ral composite design to investigate the thermal stabil ization of lysozyme［J］.Pharm Res,1999，16（5）

［8］吳偉，崔光華.星點設(shè)計-效應(yīng)面優(yōu)化法及其在藥學(xué)中的應(yīng)用［J］.國外醫(yī)學(xué)（藥學(xué)分冊），2000，27（5）

［9］ Fa′bio Coelho Sampaio,Dani lo De Faveri,Hi lario Cuquet to Mantovani,et al.Use of response sur face methodology for optimization of xylitol production by the new yeast st rain Debaryomyces hansenii UFV-170［J］.Journal of Food Engineering，2006（76）

［10］吳偉，崔光華，陸彬.實驗設(shè)計中多指標(biāo)的優(yōu)化：星點設(shè)計和總評“歸一值”的應(yīng)用［J］.中國藥學(xué)雜志，2000，35（8）

［11］邱穎，朱玲，孫曉英.星點設(shè)計-效應(yīng)面優(yōu)化法與正交設(shè)計和均勻設(shè)計的比較及其在藥劑研究中的應(yīng)用［J］.海峽藥學(xué)，2011，23（2）

［12］彭曉霞，路莎莎.響應(yīng)面優(yōu)化法在中藥研究中的應(yīng)用和發(fā)展［J］.中國實驗方劑學(xué)，2011，17（19）

［13］任謙，仝燕.微丸制劑的研究進(jìn)展及在中藥制劑中的應(yīng)用［J］.中國實驗方劑學(xué)雜志，2006，12（4）

［14］張紀(jì)興，馮炳林，招翠微.星點設(shè)計-效應(yīng)面法優(yōu)化復(fù)方口瘍清微丸的處方［J］.中成藥，2011，33（1）

［15］黃健，高春生，單利，等.星點設(shè)計-效應(yīng)面法在酒石酸美托洛爾緩釋微丸處方優(yōu)化中的應(yīng)用［J］.中國藥學(xué)雜志，2007，42（7）

［16］許鶯，楊星鋼，喬俊亭，等.星點設(shè)計-效應(yīng)面法優(yōu)化尼美舒利雙層滲透泵片處方［J］.沈陽藥科大學(xué)學(xué)報，2011，27（11）

［17］張世忠，徐赫鳴，袁琨，等.星點設(shè)計-效應(yīng)面法優(yōu)化醋氯芬酸雙層滲透泵控釋片處方［J］.中國藥劑學(xué)雜志，2010，8（6）

［18］周云飛，王柏.星點設(shè)計-效應(yīng)面法優(yōu)化鹽酸氨溴索緩釋片處方［J］.中國藥科大學(xué)學(xué)報，2007，38（1）

［19］王利勝，程龍，吳陽，等.星點設(shè)計-效應(yīng)面法優(yōu)化鹽酸普羅帕酮緩釋片處方［J］.中國現(xiàn)代應(yīng)用藥學(xué)，2012，29（11）

［20］吳海健，王建新，黃建明，等.星點設(shè)計-效應(yīng)面法優(yōu)化柘樹提取物片劑處方［J］.復(fù)旦學(xué)報，2008，35（3）

［21］陳偉，夏紅，吳偉.星點設(shè)計-效應(yīng)面法優(yōu)化水飛薊素滴丸的制備工藝［J］.中草藥雜志，2005，36（5）

［22］張婷，張華，沈宇燕，等.星點設(shè)計-效應(yīng)面法優(yōu)化酸棗仁黃酮滴丸處方［J］.中國實驗方劑學(xué)雜志，2012，18（14）

［23］忻志鳴，葉根深.納米粒制劑研究進(jìn)展［J］.中國藥業(yè)，2010，19（16）

［24］梁健欽，劉華鋼，黃秋潔，等.星點設(shè)計-效應(yīng)面法優(yōu)選白藜蘆醇固體脂質(zhì)納米粒處方［J］.遼寧中醫(yī)雜志，2010，37（2）

［25］王靜，葉冬青.多個二項反應(yīng)變量多水平因子分析模型的原理及應(yīng)用［J］.中國衛(wèi)生統(tǒng)計，2008，25（1）

［26］Jul ienne M C,Alonso M J,Arnoza JL G,et al.Preparation of poly（d,l-lactide/glycol ide）nanopar ticles of cont rolled par ticle size dist ribution:appl ication of experimental designs［J］.Drug Dev Ind Pharm,1992，18（10）

［27］孫日瑤，宋憲華.綜合評價-理論、模型、應(yīng)用［M］.銀川：寧夏人民出版社，1993

［28］王暉，陳麗，陳墾，等.多指標(biāo)綜合評價方法及權(quán)重系數(shù)的選擇［J］.廣東藥學(xué)院學(xué)報，2007，23（5）