王 哲,康 嵐,朱鍵勛,肖井雷,姜大成

(長春中醫(yī)藥大學，長春 130117)

林蛙為脊索動物門兩棲綱蛙科動物，中國林蛙全身可入藥，特別是林蛙油，林蛙油的藥用部位屬動物內部器官的干燥輸卵管，其占中國林蛙雌蛙總重的15%[1]。林蛙油為滋補良藥，其性咸，味甘、平，歸肺、腎二經，具有補腎益精、養(yǎng)陰潤肺、清熱解毒的功效，可用于治療陰虛體弱、病后失調、神疲乏力、心悸失眠、盜汗不止、癆嗽咳血、產后無乳等癥[2-3]。林蛙油中富含有蛋白質、氨基酸、維生素、脂肪酸、磷脂、甾體激素及一些微量元素，其中總蛋白含量占69.2%，糖類占9.8%，脂肪占4.1%，水分占16.1%，其他0.8%[4]。近些年來，越來越多的人們認識到了哈蟆油的營養(yǎng)、保健價值，使其成為了一種馳名中外的名貴食療性中藥，并賦予了其滋補軟黃金的美譽。

1 林蛙油中雌激素成分的化學研究

1.1 放免法測定林蛙油中雌激素含量 放射免疫分析(RIA)是以放射性核素標記抗原與反應系統(tǒng)中未標記抗原競爭性結合特異性抗體為基本原理來測定待測樣品中抗原量的一種分析方法，其具有靈敏度高，特異性強，測量簡單，用血量少，成本低等優(yōu)點。王春霖[5]采用放射免疫分析方法對哈蟆油中甾體激素進行定量分析，結果測得雌二醇、孕酮和睪酮的含量分別為(52.3±5.8)，(918 7.9±19.4)和(52.3±5.89) pg/100 mg；李成義等[6]利用放免法分析了哈士蟆卵油、哈士蟆卵及哈士蟆油中雌二醇和孕酮的含量,其中哈士蟆油中雌二醇和孕酮的含量分別為102 400 0.0 pmol/L和200.0 nmol/L。

1.2 液相法測定林蛙油中雌激素含量 高效液相色譜法(HPLC)廣泛用于復雜成分化合物的微量分析，具有分離效率高，選擇性好，檢測靈敏度高等特點。2010年劉娟等[7]應用高效液相色譜法測定蛤蟆油中雌二醇的含量，雌二醇在0.001～0.016 μg(r=0.999 7)范圍內呈良好線性關系。2010年曹陽等[8]應用RP-HPLC法測定林蛙卵中雌二醇的含量,雌二醇在4.24～50.9 μg/mL范圍內相性關系良好(r=0.999)。

1.3 氣質法測定林蛙油中激素類含量 氣質聯(lián)用法(GC-MC)具有靈敏度高、速度快、時間短、精密度高及效能高等特點。2010年陳燕超等[9]利用氣質法對林蛙油進行了研究，測定出8種甾體類成分，其中測得膽固醇、膽甾-3-酮、膽甾-3,5二烯-7-酮、菜油甾醇、膽甾-4-烯-3-酮、膽甾-4，6-二烯-3-酮、豆甾醇-22，23-二氫及膽甾-8-烯-7-酮的相對含量分別為32.36%、0.925%、2.811%、0.611%、7.657%、1.395%、0.316%和0.768%。

2 林蛙油中雌激素成分的藥理研究

2.1 林蛙油對機體生長及性器官的影響 2008年吳朝霞等[10]探討了林蛙油對去勢大鼠血清中雌二醇、孕酮、睪酮及白介素2有升高作用,但對促黃體生成素及促卵泡素有明顯抑制作用。張蔚君等[11]報道林蛙油對正常小鼠體質量作用不明顯，但可顯著抑制體虛小鼠體質量的減輕，并對雌性幼年小鼠有顯著促性成熟作用，可使去勢幼年大鼠前列腺及睪丸生長。

2.2 林蛙油的抗衰老研究 2012年葉豆丹等[12]報道林蛙油可使免疫力低下的小鼠體內不飽和脂肪酸含量增加，從而達到抗氧化的作用，延緩小鼠衰老。張煒煜等[13]在2012年研究了林蛙油對正常小鼠和衰老模型小鼠體內雌二醇含量及血常規(guī)各項指標的分析，得到服用林蛙油對機體的雌二醇含量沒有明顯作用，但對機體的免疫低下和抗衰老有一定作用[14]。

3 結語

隨著世界各國對林蛙油的需求量不斷加大，林蛙油作為食品、保健品的安全性也成為了焦點。從而闡明林蛙油所含雌性激素的種類、含量及對人體的影響程度，揭示其營養(yǎng)保健價值和藥理作用，為名貴中藥材林蛙油的合理應用提供科學依據(jù)，為林蛙產業(yè)的健康發(fā)展及促進其地方產業(yè)經濟的發(fā)展具有重要意義[15]。

[1]姜大成.中國林蛙與哈蟆油[M].長春:吉林科學技術出版社,2010:219.

[2]姜大成,肖井雷.18份東北不同產地哈蟆油的質量評價[J].中藥材,2007,30(10):1212.

[3]田春雨,薄建柱,薄海美,等.10份不同產地哈蟆油營養(yǎng)保健價值的評價研究[J].遼寧中醫(yī)雜志,2009,36(7):1186-1188.

[4]崔桂友.哈蟆油的形態(tài)結構觀察和化學成分測定[J].生物學雜志,2000,17(l):27-29.

[5]王春霖.哈士蟆油甾體激素定量分析及藥理作用[J].中藥通報,1985,10(2):44.

[6]李成義,孫文偉,姜熙羅,等.蛤士蟆卵油化學成分的分析[J].中國藥學雜志,1994,29(12):712.

[7]劉娟,劉爽,劉程誠.高效液相色譜法測定蛤蟆油中雌二醇的含量[J].遼寧中醫(yī)雜志,2010,38(1):138-139.

[8]曹陽,張若文,錢忠直,等.RP-HPLC測定林蛙卵中的雌二醇的含量[J].中藥新藥與臨床藥理,2010,21(5):540-542.

[9]陳燕超,胡巖,錢忠直,等.GC-MS法對哈蟆油中甾體類化合物的分析[J].長春中醫(yī)藥大學學報,2010,26(5):660-661.

[10]吳朝霞,王曉華,劉樺,等.莪術、哈蟆油對去勢后大鼠雌激素水平及受體表達的影響[J].南京醫(yī)科大學學報,2008,28(5):746-749.

[11]張蔚君,任昕,錢立,等.哈蟆油對生長及性器官的影響[J].沈陽藥科大學學報,1998,15(02):136-137.

[12]葉豆丹,王化宇,李星,等.哈蟆油延緩衰老的作用機制研究[J].中國藥房,2012,23(47):4419-4421.

[13]張煒煜,李霞,王化宇,等.哈蟆油對小鼠體內雌二醇含量及血常規(guī)影響的研究[J].中藥材,2012,35(10):1553-1556.

[14]徐英江,田秀慧,張秀珍,等.超高液相色譜串聯(lián)質譜法對水產品8種雌激素的測定[J].分析測試學報,2010,29(2):152-156.

[15]王玉飛,周凱,李繼革.GC/MS/MS法同時測定海產品中四種雌激素殘留[J].中國衛(wèi)生檢驗雜志,2006,26(1):21-23.