★ 謝宇鋒 陳赟 馮軍 楊宗保 王晨光 劉瓊

(1.深圳市福田區(qū)中醫(yī)院 廣東 深圳 518000；2.江西中醫(yī)藥大學(xué)2012級(jí)碩士研究生 江西 南昌 330006；3.廣州中醫(yī)藥大學(xué)2012級(jí)碩士研究生 廣東 廣州 510000；4.廈門大學(xué)醫(yī)學(xué)院中醫(yī)系 福建 廈門 361005)

灸法主要是借灸火的熱力給人體以溫?zé)嵝源碳?，通過經(jīng)絡(luò)腧穴的作用，以達(dá)到防治疾病目的的一種方法[1]。灸法具有獨(dú)特的療效，在中醫(yī)學(xué)中起著重要的作用，《醫(yī)學(xué)入門·針灸》言：“藥之不及，針之不到，必須灸之?！薄鹅`樞·官能》載：“針?biāo)粸椋闹??！庇纱丝梢?，灸法具有針?biāo)幩荒芗暗莫?dú)特功效。而《名醫(yī)別錄》更言：“艾味苦，微溫，無毒，主灸百病?！庇纱丝梢姲淖鳛橹饕木姆ǎ哂袕V泛的適應(yīng)范圍。自古以來，艾灸更是被廣泛應(yīng)用于預(yù)防保健領(lǐng)域，也就是所謂的“逆灸法”?！吨T病源候論·小兒雜病諸疾》記載：“河洛間土地多寒，兒喜疾驚。其俗生兒三日，喜逆灸以防之，又灸以防噤。”明高武《針灸聚英》解釋：“無病而先針灸曰逆，逆，未至而迎之也?！笔褂媚婢牡姆椒匮a(bǔ)、預(yù)防可以取得很好的效果。《醫(yī)說·針灸》也說：“若要安，三里莫要干。”由此可見，灸法作用為一種預(yù)防保健方法，具有悠久的歷史；而艾灸足三里更是預(yù)防保健“逆灸法”的典型代表。也正是基于艾灸足三里具有良好預(yù)防保健作用的臨床實(shí)踐基礎(chǔ)，國內(nèi)學(xué)者通過大量的實(shí)驗(yàn)研究證實(shí)了艾灸對(duì)胃黏膜損傷具有良好的預(yù)保護(hù)作用，并從不同的角度闡述了其可能的作用機(jī)制。筆者通過查閱文獻(xiàn)發(fā)現(xiàn)目前國內(nèi)學(xué)者主要從艾灸調(diào)控胃黏膜細(xì)胞的增殖與凋亡的相關(guān)作用機(jī)制探討了艾灸對(duì)胃黏膜損傷預(yù)保護(hù)機(jī)制，現(xiàn)將其歸納如下。

1 艾灸預(yù)處理調(diào)控胃黏膜細(xì)胞增殖的相關(guān)作用機(jī)制

胃黏膜損傷的修復(fù)主要是通過損傷后的早期重建(上皮移行)及細(xì)胞增生來實(shí)現(xiàn)[2,3]。胃黏膜深度損傷和慢性損傷的基本修復(fù)方式則為細(xì)胞增殖，而適應(yīng)性細(xì)胞保護(hù)是一種細(xì)胞增殖的過程，其是通過細(xì)胞的有絲分裂來補(bǔ)充已損傷或壞死的黏膜細(xì)胞，這便是胃黏膜損傷后的重要修復(fù)功能。適應(yīng)性細(xì)胞保護(hù)的細(xì)胞增殖起始于胃腺小凹的底部和頸部的增殖區(qū)，其修復(fù)過程包括炎癥反應(yīng)、細(xì)胞分裂和分化以及新生的細(xì)胞遷移到損傷病灶的周圍，使損傷的黏膜組織恢復(fù)正常的形態(tài)和功能[4,5]。在這一胃黏膜損傷修復(fù)的過程中，存在多種物質(zhì)如生長因子和細(xì)胞因子等參與調(diào)節(jié)胃黏膜損后的細(xì)胞增殖修復(fù)作用。目前國內(nèi)學(xué)者關(guān)于艾灸調(diào)控胃黏膜細(xì)胞增殖的作用機(jī)制主要包括以下兩個(gè)方面。

1.1 ERK信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通絡(luò)啟動(dòng)的細(xì)胞增殖 ERK途徑，是Ras/Raf/MEK/ERK途徑的簡稱，該途徑主要是依靠特異性的細(xì)胞因子或生長因子與相應(yīng)的特異性受體結(jié)合啟動(dòng)，在核內(nèi)，ERK依次激活一系列靶蛋白，ERK激酶在細(xì)胞質(zhì)中的主要催化底物為90kD核糖體蛋白S6激酶，該激酶再通過激活一系列的核轉(zhuǎn)錄因子如核因子-kB等，調(diào)節(jié)細(xì)胞增殖相關(guān)基因的轉(zhuǎn)錄。李健玲等[6]研究表明TGF-α不僅可以顯著上調(diào)AP-1的活性，而且可以明顯激活MEK和ERK1/2，且該作用可以被EGFR特異性抑制劑PD153035或MEK特異性抑制劑PD98059能完全阻斷。由此可見，TGF-α誘導(dǎo)的胃黏膜細(xì)胞增殖與分化，主要是通過大鼠胃黏膜細(xì)胞EGFR介導(dǎo)的ERK1/2信號(hào)途徑激活A(yù)P-1轉(zhuǎn)錄因子來實(shí)現(xiàn)的。易受鄉(xiāng)等[7,8]研究發(fā)生艾灸預(yù)處理可以通過增加胃黏膜血流量，促進(jìn)TGF-α合成、增強(qiáng)HSP70與PCNA的表達(dá)，促進(jìn)損傷胃黏膜周圍的細(xì)胞增殖，從而達(dá)到對(duì)抗應(yīng)激性胃黏膜損傷的作用；劉密等[9]研究發(fā)現(xiàn)艾灸足三里等穴位預(yù)處理可以明顯減輕因束縛水浸而造成的應(yīng)激性胃黏膜損傷，并上調(diào)血清及胃黏膜細(xì)胞中EGF、TGF-α水平，促進(jìn)胃黏膜細(xì)胞中TFF1和PCNA的表達(dá)水平，提示艾灸穴位預(yù)處理對(duì)胃黏膜損傷后增殖修復(fù)相關(guān)因子有較好的調(diào)控作用：艾灸足三里等穴所誘發(fā)的經(jīng)氣可刺激機(jī)體合成和分泌內(nèi)源性保護(hù)因子(EGF、TGF-α)，啟動(dòng)黏膜修復(fù)的相關(guān)機(jī)制，誘導(dǎo)TFF1與EGF、TGF-α協(xié)同作用，加強(qiáng)胃黏膜細(xì)胞增殖能力，對(duì)抗應(yīng)激性損傷，促進(jìn)損傷黏膜周圍的細(xì)胞增殖。劉密等[10]的研究還發(fā)艾灸預(yù)處理可以使束縛水浸應(yīng)激大鼠的胃粘膜內(nèi)的EGFR、ERK1/2磷酸化、AP-1表達(dá)較單純束縛水浸應(yīng)激大鼠明顯增高，并提出艾灸調(diào)控細(xì)胞增殖對(duì)應(yīng)激性胃黏膜損傷的預(yù)保護(hù)作用機(jī)制可能是通過上調(diào)應(yīng)激大鼠血清和胃黏膜組織內(nèi)的EGF、TGF-α等水平，高水平的EGF和TGF-α與胃黏膜細(xì)胞膜上的特異性受體EGFR結(jié)合后，啟動(dòng)ERK信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路，促使胃黏膜細(xì)胞內(nèi)ERK磷酸化和AP-1核轉(zhuǎn)錄因子表達(dá)增強(qiáng)，調(diào)節(jié)與生長有關(guān)的基因轉(zhuǎn)導(dǎo)，從而促進(jìn)胃黏膜細(xì)胞的增殖。綜上所述，艾灸啟動(dòng)ERK信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路，調(diào)控胃黏膜細(xì)胞的增殖可能是其對(duì)胃黏膜損傷發(fā)揮預(yù)保護(hù)作用可能是機(jī)制之一。

1.2 神經(jīng)通路傳導(dǎo)途徑調(diào)節(jié)胃腸激素啟動(dòng)的胃黏膜細(xì)胞增殖 以俞穴刺激為基礎(chǔ)的針灸治療作用機(jī)理研究均證實(shí)：神經(jīng)與體液等的綜合調(diào)節(jié)是其發(fā)揮作用的重要基礎(chǔ)。而以俞穴為刺激部位的艾灸對(duì)胃黏膜損傷的預(yù)保護(hù)作用也不例外，且神經(jīng)通絡(luò)傳導(dǎo)途徑在調(diào)節(jié)胃腸激素水平，影響細(xì)胞增殖，發(fā)揮胃黏膜損傷預(yù)保護(hù)中起著重要的作用。文瓊[11]研究發(fā)現(xiàn)艾灸足三里穴預(yù)處理對(duì)胃黏膜損傷大鼠的胃黏膜組織形態(tài)具有良好的改善作用，該作用可能與艾灸預(yù)處理上調(diào)應(yīng)激性胃黏膜損傷大鼠血清IL-2的含量、下調(diào)應(yīng)激性胃黏膜損傷大鼠血清IL-1 P的含量，從而促進(jìn)細(xì)胞增殖和組織修復(fù)；而該調(diào)節(jié)作用在切斷迷走神經(jīng)后明顯降低，初步證實(shí)了迷走神經(jīng)通路可能是艾灸預(yù)處理對(duì)胃黏膜損傷與保護(hù)因子表達(dá)的重要途徑之一。彭亮等[12]研究發(fā)現(xiàn)艾灸足三里穴預(yù)處理對(duì)大鼠胃黏膜損傷的組織形態(tài)學(xué)具有較好的改善作用，該作用與上調(diào)胃黏膜細(xì)胞是中EGF和下調(diào)生長抑制素(SS)有關(guān)。有研究表明，當(dāng)胃腸道出現(xiàn)損傷時(shí)，在治療后體液中EGF含量明顯增高，尤其是損傷部位，說明EGF刺激了胃黏膜損傷部位細(xì)胞的代謝，加速了胃黏膜損傷部位上皮細(xì)胞的修復(fù)[13]。生長抑制素(生長激素釋放抑制激素)(SS)經(jīng)由內(nèi)分泌D細(xì)胞分泌產(chǎn)生，為抑制性功能的胃腸激素之一。生長抑制素可以明顯抑制胃黏膜細(xì)胞在動(dòng)態(tài)修復(fù)過程中的自我增殖，阻礙黏膜的修復(fù)過程。由此可見，艾灸預(yù)處理對(duì)EGF與SS的調(diào)節(jié)作用，可以促進(jìn)胃黏膜損傷部位上皮細(xì)胞的自我增殖，促進(jìn)胃黏膜的修復(fù)作用。但在脊髓橫斷損毀、孤束核損毀、迷走神經(jīng)損毀、腓總神經(jīng)切斷后艾灸預(yù)處理對(duì)降低胃黏膜損傷指數(shù)具有明顯的干擾作用，因此推斷脊髓、孤束核、迷走神經(jīng)、腓總神經(jīng)可能是艾灸預(yù)處理對(duì)胃黏膜損傷發(fā)揮預(yù)保護(hù)作用的神經(jīng)途徑之一。綜上所述，艾預(yù)處理對(duì)胃黏膜損傷的預(yù)保護(hù)作用可能是通過脊髓、孤束核、迷走神經(jīng)、腓總神經(jīng)等神經(jīng)途徑調(diào)節(jié)胃腸道激素水平，從而實(shí)現(xiàn)了對(duì)胃黏膜細(xì)胞增殖的調(diào)節(jié)。

2 艾灸預(yù)處理調(diào)控胃黏膜細(xì)胞凋亡的相關(guān)作用機(jī)制

細(xì)胞凋亡是指多細(xì)胞有機(jī)體為調(diào)控機(jī)體發(fā)育，維護(hù)內(nèi)環(huán)境的穩(wěn)定，由基因控制的細(xì)胞主動(dòng)死亡過程。正常胃黏膜細(xì)胞存在程序性死亡，即細(xì)胞凋亡，籍以清除衰老的細(xì)胞，維持胃黏膜生理平穩(wěn)和完整性。人體各組織細(xì)胞數(shù)目的維持是由細(xì)胞增殖與凋亡之間平衡來實(shí)現(xiàn)的，任何原因所致細(xì)胞凋亡加快或減慢，均可使機(jī)體內(nèi)環(huán)境穩(wěn)定發(fā)生變化，機(jī)體結(jié)構(gòu)和功能受損，產(chǎn)生各種疾病。急性胃黏膜損傷的初起階段，如果過多的大量的細(xì)胞發(fā)生凋亡則會(huì)導(dǎo)致胃黏膜損傷機(jī)制與保護(hù)機(jī)制的平衡失調(diào)，胃黏膜組織結(jié)構(gòu)遭到破壞，造成繼發(fā)性的、不可逆性的損害。細(xì)胞凋亡的兩條主要通路分別是死亡受體介導(dǎo)的凋亡途徑或外在途徑和線粒體凋亡途徑或內(nèi)在途徑。目前，國內(nèi)學(xué)者主要從線粒體凋亡通路的不同靶點(diǎn)探討了艾灸預(yù)處理對(duì)胃黏膜損傷保護(hù)作用的可能機(jī)制。

2.1 線粒體信號(hào)通路介導(dǎo)的細(xì)胞凋亡 線粒體凋亡途徑作為調(diào)控細(xì)胞凋亡的重要途徑之一，其可以被胞外刺激或胞內(nèi)刺激而啟動(dòng)，主要包括氧化作用和細(xì)胞毒性藥物刺激。線粒體凋亡途徑是細(xì)胞凋亡進(jìn)程中關(guān)鍵的一步，不同的促凋亡信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路和損傷通路匯集于線粒體，使其結(jié)構(gòu)和功能發(fā)生顯者的改變，特別是線粒體膜通透性改變，從而加速核凋亡特征的出現(xiàn)[14,15]。因此，線粒體在細(xì)胞凋亡中起著重要的調(diào)控作用，在某種意義上說，它是凋亡的執(zhí)行者，直接決定著細(xì)胞的生死存亡[16,17]?；诰€粒體凋亡途徑在調(diào)控細(xì)胞凋亡的重要意義，國內(nèi)學(xué)者則不同的角度探討了艾灸對(duì)胃黏膜損傷預(yù)保護(hù)作用的在細(xì)胞凋亡調(diào)節(jié)上的可能機(jī)制，具體如下：常小榮[18]研究團(tuán)隊(duì)在明確艾灸預(yù)處理可以對(duì)胃黏膜損傷發(fā)揮良好的保護(hù)作用基礎(chǔ)上，進(jìn)一步研究發(fā)現(xiàn)其預(yù)保護(hù)作用可能與增強(qiáng)HSP70蛋白和基因的表達(dá)有關(guān)。而有研究表明HSP70mRNA及蛋白是細(xì)胞凋亡的指征之一[19]。HSP70合成增加能減輕細(xì)胞凋亡，阻止細(xì)胞開自殺途徑，而HSP70抑制劑能促使細(xì)胞凋亡，且其調(diào)節(jié)細(xì)胞凋亡作用可能與其保護(hù)線粒體、抑制氧自由基生成、抑制凋亡激活基因的表達(dá)、抑制凋亡信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)中Caspase等有關(guān)。易受鄉(xiāng)等[20]研究發(fā)現(xiàn)艾灸預(yù)處理可以使應(yīng)激性胃黏膜損傷大鼠的胃黏膜細(xì)胞中的細(xì)胞色素-C (Cyt-C)、凋亡活化因子1(Apaf-1)、Caspase-9和Caspase-3的表達(dá)明顯降低，由此推斷，艾灸預(yù)處理對(duì)應(yīng)激性胃黏膜損傷的保護(hù)作用可能是通過調(diào)胃黏膜細(xì)胞的HSP70，并作用于相關(guān)細(xì)粒體凋亡途徑的相關(guān)靶點(diǎn)，從而啟動(dòng)抑制胃黏膜細(xì)胞的凋亡，以達(dá)到預(yù)保護(hù)的作用。郁潔[21]在其導(dǎo)師易受鄉(xiāng)的研究基礎(chǔ)上，使用HSP70合成的特異性阻斷劑與艾灸同時(shí)給予預(yù)處理，則研究發(fā)現(xiàn)艾灸預(yù)處理對(duì)胃黏膜損傷的保護(hù)作用被取消，再一次證明艾灸對(duì)胃黏膜損傷的預(yù)保護(hù)作用與上調(diào)HSP70的表達(dá)有關(guān)。此外，彭宏[22]還研究發(fā)現(xiàn)，艾預(yù)預(yù)處理可以通過抑制Smac基因表達(dá)，從而抑制細(xì)胞凋亡，達(dá)到拮抗胃黏膜損傷的作用。細(xì)粒促凋亡蛋白(Smac/Diablo)2000年發(fā)現(xiàn)的一種由線粒體釋放的促凋亡蛋白，參與細(xì)胞凋亡線粒體通路下游反應(yīng)，當(dāng)其受到凋亡刺激時(shí)，Smac/Diablo的線粒體定位信號(hào)肽會(huì)被切斷，能夠從信粒體中釋放至胞質(zhì)，與凋亡抑制蛋白(IAP)分子特異性結(jié)合，解除其對(duì)caspase的阻礙作用，激活各級(jí)caspase引起級(jí)聯(lián)反應(yīng)，從而促進(jìn)細(xì)胞凋亡。綜上所述，艾灸預(yù)處理可以通過調(diào)節(jié)線粒體信號(hào)途徑的不同靶點(diǎn)來調(diào)控細(xì)胞凋亡，從而發(fā)揮對(duì)胃黏膜損傷的保護(hù)作用。

3 評(píng)述

以穴位為基礎(chǔ)的艾灸預(yù)處理對(duì)胃黏膜損傷的保護(hù)作用，不僅與胃黏膜細(xì)胞的增殖有關(guān)，而且與胃黏膜細(xì)胞的凋亡相關(guān)；而艾灸預(yù)處理對(duì)黏膜細(xì)胞增殖與凋亡的調(diào)節(jié)作用，是ERK信號(hào)通路、神經(jīng)通路及線粒體信號(hào)通路等多通路協(xié)同調(diào)節(jié)的結(jié)果。但目前國內(nèi)外學(xué)者對(duì)艾灸對(duì)胃黏膜損傷相關(guān)疾病的預(yù)保護(hù)作用研究，僅僅停留在于急性胃黏膜損傷的研究，因此，盡快開展以胃黏膜損傷為基礎(chǔ)的慢性萎縮性胃炎、胃癌等相關(guān)疾病的艾灸預(yù)保護(hù)研究對(duì)拓展艾灸的應(yīng)用范圍，充分體現(xiàn)“逆針灸”在防治重大疾病中的作用具有深遠(yuǎn)的意義。

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