杜潘艷，喬國昱，趙麗梅，王振榮

(1.河北省唐山市婦幼保健院檢驗科;2.河北省唐山市協(xié)和醫(yī)院檢驗科，河北唐山063000)

*通信作者(corresponding author):dpy405@sohu．com

手足口病(hand foot and mouth disease，HFMD)是一種全球性的急性傳染病，病原體以腸道病毒71型(enterovirus 71，EV71)和柯薩奇病毒A組16型(coxsackievirus，CoxA16)為主。輕者預(yù)后良好，重癥多合并神經(jīng)系統(tǒng)疾病。EBV(Epstein-Barr virus，EBV)和巨細(xì)胞病毒(cytomegalovirus，CMV)是廣泛分布的病原體，均屬皰疹病毒，兒童免疫功能尚不成熟，容易感染EBV或CMV病原體，也可引發(fā)神經(jīng)系統(tǒng)疾?。?－2］。研究收集了臨床確診的HFMD患兒，分別檢測患兒咽拭子EV71、CoxA16以及EBV和CMV病毒核酸。

1 資料與方法

1.1 病例資料:收集2010年6月至2012年10月期間臨床確診的HFMD患兒352例，男198例，女154例，年齡4個月～9歲，平均年齡(2.36±1)歲。根據(jù)臨床癥狀分為輕度184例，重度168例。入選病例診斷標(biāo)準(zhǔn)參照衛(wèi)生部《手足口病診療指南》(2008年版)。

1.2 實驗材料:試劑盒及陰、陽性質(zhì)控品(廣州中山大學(xué)達(dá)安基因股份有限公司)。

1.3 標(biāo)本采集:規(guī)范采集患兒急性期咽拭子標(biāo)本，在裝有3～5 mL無菌的0.9%氯化鈉注射液采樣管中充分?jǐn)噭?，得液態(tài)標(biāo)本。

1.4 病毒檢測:使用實時熒光PCR方法檢測EV71、CoxA16以及EBV、CMV病毒核酸。按照試劑盒說明書對2.1所得液態(tài)標(biāo)本分別進(jìn)行EV71和CoxA16 RNA以及EBV和CMV DNA提取、循環(huán)條件設(shè)置、RT-PCR擴(kuò)增及結(jié)果判定。

1.5 統(tǒng)計學(xué)分析:應(yīng)用SPSS19.0統(tǒng)計軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)處理，采用χ2檢驗。

2 結(jié)果

2.1 腸道病毒EV71、CoxA16檢測結(jié)果:352例患兒中檢出EV71或CoxA16共164例，檢出率為46.59%，其中99例EV71感染病例中，重度52例;65例CoxA16中，重度24例。

EV71(－)CoxA16(－)和EV71或CoxA16(+)組間輕度、重度病例分別比較，均無顯著性差異;EV71(+)組重度病例顯著高于CoxA16組(p＜0.05)。

2.2 EBV、CMV檢測結(jié)果:352例患兒中檢出EBV(+)41例和CMV(+)71例，檢出率分別為11.65%和20.17%，其中EBV(+)CMV(+)10例(2.84%)。

2.3 不同組間EBV和CMV檢測結(jié)果:EV71(－)CoxA16(－)組EBV(+)21例中，重度15例，CMV(+)38例中，重度25例，EBV(+)CMV(+)6例中，重度4例;EV71或Cox-A16(+)組EBV(+)10例中，重度8例，CMV(+)23例中，重度14例，EBV(+)CMV(+)4例中，重度2例。

EV71(－)CoxA16(－)與 EV71或 CoxA16(+)組間EBV、CMV以及 EBV(+)CMV(+)間均無差異;EV71或CoxA16(+)病例重度組中EBV、CMV(+)病例均顯著高于輕度組(p＜0.05);而EBV(+)CMV(+)結(jié)果在輕度組與重度組間無差異。

3 討論

HFMD多侵犯學(xué)齡前兒童，近年來呈上升趨勢。研究中EV71、CoxA16檢出率(46.59%)低于有些報道(71.4%)，標(biāo)本種類、采集時間或方法可能影響檢測結(jié)果［3］。所以臨床表現(xiàn)典型病例EV71或CoxA16檢測為陰性的患者不能輕易排除HFMD的診斷。研究結(jié)果反映了病例收集期間本地區(qū)HFMD病原體以EV71和CoxA16并存流行，EV71較易引發(fā)重癥病例;其次結(jié)果顯示HFMD患兒的EV71與CoxA16的檢出與患兒病情無直接關(guān)系。

EBV和CMV一般為潛伏感染，當(dāng)機(jī)體免疫力低下時被激活，癥狀臨床表現(xiàn)多樣，輕重不一，可引起多系統(tǒng)病變。EBV感染還可引發(fā)兒童傳染性單核細(xì)胞增多癥、鼻咽癌和Buurkitt淋巴瘤等嚴(yán)重疾病。研究發(fā)現(xiàn)HFMD患兒中存在EBV或CMV合并感染，盡管EV71和CoxA16檢出情況對EBV和CMV檢出無明顯影響，但合并EBV或CMV感染對HFMD病情有明顯促進(jìn)作用。提示臨床對HFMD病例應(yīng)及時進(jìn)行EBV和CMV檢測，有利于正確診斷及合理治療，對手足口病例中合并EBV或CMV感染應(yīng)予以重視，以免延誤病情。研究中EBV合并CMV感染對EV71或CoxA16檢出或病情均未見明顯影響，有待于今后擴(kuò)大樣本量進(jìn)一步探討。

［1］Plosa EJ，Esbenshade JC，F(xiàn)uller MP，et al．Cytomegalovirus infection［J］．Pediatr Rev，2012，33:156 －163．

［2］賈偉，師志云，趙志軍，等．寧夏某醫(yī)院兒童患者EB病毒感染特點分析［J］．檢驗醫(yī)學(xué)與臨床，2011，8:1954－1955．

［3］李亮，汪華，史智揚，等．江蘇省手足口病病原體陽性檢出率相關(guān)因素及病原學(xué)特征［J］．南京醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(自然科學(xué)版)，2010，30:128－133．