趙建江， 張小風(fēng)， 王文橋， 馬志強(qiáng)， 韓秀英

（河北省農(nóng)林科學(xué)院植物保護(hù)研究所，河北省農(nóng)業(yè)有害生物綜合防治工程技術(shù)研究中心，農(nóng)業(yè)部華北北部作物有害生物綜合治理重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，保定 071000）

氟硅唑與代森錳鋅混配對(duì)梨黑星病菌的聯(lián)合毒力及田間防效

趙建江， 張小風(fēng)， 王文橋， 馬志強(qiáng)， 韓秀英*

（河北省農(nóng)林科學(xué)院植物保護(hù)研究所，河北省農(nóng)業(yè)有害生物綜合防治工程技術(shù)研究中心，農(nóng)業(yè)部華北北部作物有害生物綜合治理重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，保定 071000）

摘要為了明確氟硅唑與代森錳鋅混配對(duì)梨黑星病菌的聯(lián)合毒力，采用菌絲生長(zhǎng)速率法測(cè)定了氟硅唑、代森錳鋅及其不同配比對(duì)梨黑星病菌的毒力，以Wadley公式進(jìn)行評(píng)價(jià)，并通過(guò)田間試驗(yàn)驗(yàn)證其對(duì)梨黑星病的防治效果。結(jié)果表明：氟硅唑與代森錳鋅質(zhì)量比為1∶20、1∶25、1∶30、1∶35和1∶40進(jìn)行復(fù)配對(duì)菌絲生長(zhǎng)均表現(xiàn)為增效，其中1∶25增效作用最明顯，增效系數(shù)為2.68；在田間藥效試驗(yàn)中，40%氟硅唑乳油與80%代森錳鋅可濕性粉劑，以質(zhì)量比1∶25進(jìn)行桶混，750～1 200倍稀釋對(duì)梨黑星病的防治效果均在85%以上，與其單劑40%氟硅唑乳油8 000倍和對(duì)照藥劑10%苯醚甲環(huán)唑水分散粒劑7 000倍對(duì)梨黑星病的防治效果相當(dāng)，但顯著高于其單劑80%代森錳鋅可濕性粉劑700倍的防治效果。氟硅唑與代森錳鋅以1∶25進(jìn)行桶混，可以在田間推廣使用。

關(guān)鍵詞氟硅唑； 代森錳鋅； 梨黑星病菌； 增效作用； 田間防效

梨黑星病（Venturia nashicola Tanaka et Yamamoto）是我國(guó)梨區(qū)普遍發(fā)生的重要病害。從落花到梨果采收期間均可發(fā)病，如防治不當(dāng)，將會(huì)嚴(yán)重影響梨的品質(zhì)和產(chǎn)量［1］。目前，通過(guò)遺傳改良和培育抗病品種增強(qiáng)梨樹(shù)對(duì)黑星病的抗性已取得一定進(jìn)展［2-3］，但在生產(chǎn)實(shí)際中，仍以化學(xué)防治為主。

氟硅唑是一種高效、廣譜的麥角甾醇生物合成抑制劑（EBIs），對(duì)梨黑星病具有良好的防治效果，現(xiàn)已成為防治該病害的主要藥劑。研究發(fā)現(xiàn)，河北辛集和曲陽(yáng)的梨黑星病菌對(duì)氟硅唑的敏感性顯著低于泊頭和趙縣［4］。農(nóng)藥的合理復(fù)配，不但可以延緩病菌抗藥性的產(chǎn)生，提高防效，而且可以擴(kuò)大殺菌譜，降低用藥成本［5-6］。如代森錳鋅與霜脲氰7∶1（質(zhì)量比）的混合物對(duì)防治馬鈴薯晚疫病具有增效作用［7］。代森錳鋅是一種廣譜性多作用位點(diǎn)的保護(hù)性殺菌劑，病菌對(duì)此藥劑不容易產(chǎn)生抗性，可以和多種內(nèi)吸性藥劑混配使用［8］。為了明確氟硅唑與代森錳鋅復(fù)配對(duì)梨黑星病菌是否具有增效作用，筆者進(jìn)行了氟硅唑與代森錳鋅混合物對(duì)梨黑星病菌聯(lián)合毒力的測(cè)定，并進(jìn)行了該混合物對(duì)梨黑星病的田間藥效評(píng)價(jià)。

1 材料與方法

1.1 供試培養(yǎng)基及菌株

馬鈴薯梨塊培養(yǎng)基（PDA＋L′）：馬鈴薯200 g，鴨梨150 g，葡萄糖20 g，瓊脂20 g，蒸餾水1 000 m L，p H 6.0～6.2。

梨黑星病菌（Venturia nashicola）采自河北省辛集市壘頭鎮(zhèn)北小陳村，采用單孢分離法進(jìn)行分離和純化，分離純化后將菌株轉(zhuǎn)接到“PDA＋L′”平板上［9］，于20℃保存?zhèn)溆谩?/p>

1.2 供試藥劑

95.51%氟硅唑（flusilazole）原藥，天津久日化工有限公司提供；96%代森錳鋅（mancozeb）原藥，利民化工股份有限公司提供；40%氟硅唑乳油（flusilazole 400 EC）美國(guó)杜邦公司提供；80%代森錳鋅可濕性粉劑（mancozeb 800 WP）利民化工股份有限公司提供；10%苯醚甲環(huán)唑水分散粒劑（difenoconazole 100 WG），瑞士先正達(dá)作物保護(hù)有限公司提供。

1.3 室內(nèi)毒力測(cè)定方法

采用菌絲生長(zhǎng)速率法［10］測(cè)定供試藥劑對(duì)梨黑星病菌的抑制作用。分別用適量丙酮將氟硅唑和代森錳鋅原藥溶解，然后配制成質(zhì)量濃度為1 000μg／mL的母液，并按氟硅唑和代森錳鋅的不同質(zhì)量比例（1∶20、1∶25、1∶30、1∶35和1∶40）混合，得到不同配比混合液，用無(wú)菌水進(jìn)行系列稀釋，按藥液與培養(yǎng)基1∶9的體積比配制成最終含藥量為10、5、1、0.5、0.1μg／mL的含藥平板。單劑氟硅唑和代森錳鋅含藥平板的含藥量分別為10、5、1、0.5、0.1、0.05μg／mL和20、10、5、1、0.5μg／mL。同時(shí)設(shè)丙酮和清水對(duì)照。用直徑5 mm的打孔器在預(yù)培養(yǎng)60 d的菌落邊緣打取菌餅，正面朝下接種到含藥平板上，每處理重復(fù)3次，置于20℃培養(yǎng)箱中，黑暗培養(yǎng)60 d后，采用十字交叉法測(cè)量各處理的菌落直徑。計(jì)算各處理濃度的抑制率，采用DPS軟件，求出氟硅唑、代森錳鋅及其混合物的毒力回歸方程，EC50值和相關(guān)系數(shù)。試驗(yàn)重復(fù)2次。采用Wadley法［6］進(jìn)行聯(lián)合毒力評(píng)價(jià)。

EC50（th）＝（a＋b）／［a／EC（A）50＋b／EC（B）50］

增效系數(shù)（SR）＝EC50（th）／EC50（ob）

式中A、B分別代表兩種藥劑在混劑中所占比例，ob為實(shí)際觀察值，th為理論值。SR＞1.5為增效作用；SR＝0.5～1.5為相加作用；SR＜0.5為拮抗作用。

抑制率（%）＝［（對(duì)照菌落增長(zhǎng)直徑－處理菌落增長(zhǎng)直徑）／對(duì)照菌落增長(zhǎng)直徑］×100。

1.4 田間藥效試驗(yàn)

田間試驗(yàn)分別于2011年和2012年在河北省辛集市壘頭鎮(zhèn)北小陳村同一梨園進(jìn)行。梨樹(shù)品種為‘鴨梨’，樹(shù)齡20年，株行距為3 m×6 m，梨園土壤肥力中等，梨樹(shù)長(zhǎng)勢(shì)及管理水平一致，黑星病歷年發(fā)生。試驗(yàn)設(shè)：40%氟硅唑乳油8 000倍、80%代森錳鋅可濕性粉劑700倍、10%苯醚甲環(huán)唑水分散粒劑7 000倍、78.46%氟硅唑與代森錳鋅的混合物（質(zhì)量比1∶25）750、1 000、1 200倍和空白對(duì)照共計(jì)7個(gè)處理。每處理4次重復(fù)，共28個(gè)小區(qū)，小區(qū)隨機(jī)區(qū)組排列，每小區(qū)2株梨樹(shù)。采用泰山－18型機(jī)動(dòng)高壓噴霧器均勻噴施，至流失為止，株施藥液10 L左右。梨樹(shù)落花后、病害發(fā)生前用第一次藥，以后根據(jù)病情發(fā)展和氣候條件用藥。2011年用藥時(shí)間為：4月30日、5月15日、6月3日、7月4日、7月23日、8月3日和8月23日；2012年用藥時(shí)間為：5月2日、5月18日、6月5日、7月2日、7月19日、8月10日和8月29日。

施藥前的病情指數(shù)為零，最后一次用藥后14 d調(diào)查病情。每小區(qū)調(diào)查2株，分東、南、西、北、中方向5點(diǎn)取樣，每點(diǎn)取當(dāng)年生枝條的40片葉，按病葉上病斑面積占整個(gè)葉片面積的百分率分級(jí)［11］，計(jì)算病葉率、病情指數(shù)及防治效果。數(shù)據(jù)采用Fisher’s LSD法進(jìn)行差異顯著性分析。

病葉率（%）＝（病葉數(shù)／調(diào)查總?cè)~片數(shù)）×100；

病情指數(shù)＝［∑（病葉數(shù)×相對(duì)級(jí)數(shù)）／（調(diào)查總?cè)~片數(shù)×最高級(jí)數(shù)）］×100。

2 結(jié)果與分析

2.1 氟硅唑與代森錳鋅混合物對(duì)梨黑星病菌菌絲生長(zhǎng)的抑制作用

從表1可知，氟硅唑與代森錳鋅按質(zhì)量比1∶20、1∶25、1∶30、1∶35、1∶40進(jìn)行混配對(duì)梨黑星病菌的菌絲生長(zhǎng)均表現(xiàn)出良好的抑制作用，5個(gè)配比對(duì)梨黑星病菌的菌絲生長(zhǎng)均表現(xiàn)出增效作用，當(dāng)氟硅唑與代森錳鋅以1∶25進(jìn)行復(fù)配時(shí)，增效作用最明顯，增效系數(shù)為2.68。

表1 氟硅唑與代森錳鋅混合物對(duì)梨黑星病菌菌絲生長(zhǎng)的抑制作用1）Table 1 Inhibitory action of flusilazole-mancozeb mixtures against mycelial growth of Venturia nashicola

2.2 田間防治效果

從表2可知，2011年和2012年得到了相似的試驗(yàn)結(jié)果。40%氟硅唑乳油與80%代森錳鋅可濕性粉劑，以有效成分質(zhì)量比1∶25進(jìn)行復(fù)配，對(duì)梨黑星病表現(xiàn)出良好的防治效果。該混合物750、1 000和1 200倍稀釋，對(duì)梨黑星病的防效均在85%以上，與其單劑40%氟硅唑乳油8 000倍和對(duì)照藥劑10%苯醚甲環(huán)唑水分散粒劑7 000倍對(duì)梨黑星病的防治效果相當(dāng)，但顯著高于單劑80%代森錳鋅可濕性粉劑700倍的防治效果。

表2 不同藥劑對(duì)梨黑星病的防治效果1）Table 2 Control efficacy of different fungicides on pear scab

3 結(jié)論與討論

本研究表明，氟硅唑與代森錳鋅以質(zhì)量比1∶25混配后對(duì)梨黑星病菌的菌絲生長(zhǎng)表現(xiàn)出良好的增效作用。該混合物750～1 200倍稀釋對(duì)梨黑星病的田間防治效果與三唑類殺菌劑40%氟硅唑乳油8 000倍和10%苯醚甲環(huán)唑水分散粒劑7 000倍的防效相當(dāng)，優(yōu)于保護(hù)劑80%代森錳鋅可濕性粉劑700倍的防效。因此，氟硅唑與代森錳鋅以1∶25進(jìn)行混配可以在田間推廣使用。

氟硅唑因其殺菌譜廣、防治效果顯著等優(yōu)點(diǎn)而被廣泛用于真菌病害的防治。但由于該藥劑的長(zhǎng)期單一使用，致使病原菌對(duì)其產(chǎn)生了抗藥性。Kunz等［12］早在1997年就曾報(bào)道蘋(píng)果黑星病菌對(duì)氟硅唑產(chǎn)生了較強(qiáng)的抗藥性，其田間防效顯著降低。本研究結(jié)果表明，氟硅唑與代森錳鋅以質(zhì)量比1∶25混配750倍稀釋時(shí)，對(duì)梨黑星病的防效高達(dá)95%，與其單劑40%氟硅唑乳油8 000倍的防效相當(dāng)，但混劑中40%氟硅唑乳油的稀釋倍數(shù)為10 125倍，明顯高于其單用時(shí)的稀釋倍數(shù)。因此，氟硅唑與代森錳鋅以1∶25混配使用，可以有效地降低氟硅唑的使用劑量，從而降低氟硅唑?qū)Σ≡乃巹┻x擇壓，進(jìn)而延緩梨黑星病菌對(duì)氟硅唑抗藥性的產(chǎn)生。

氟硅唑?qū)儆邴溄晴薮己铣梢种苿╊悮⒕鷦?，它是通過(guò)抑制C-14α-脫甲基化酶的活性，從而阻礙麥角甾醇的合成，進(jìn)而導(dǎo)致病原菌的細(xì)胞膜結(jié)構(gòu)破壞和細(xì)胞死亡［13］。代森錳鋅是乙撐二硫代氨基甲酸鹽類殺菌劑，是一種典型的多作用位點(diǎn)的保護(hù)性殺菌劑，它主要是通過(guò)抑制病原菌體內(nèi)丙酮酸的氧化，從而抑制病原菌的呼吸。這兩種作用機(jī)理截然不同的殺菌劑混配后增效作用明顯，但是其增效機(jī)理還有待于進(jìn)一步研究。

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中圖分類號(hào)：S 482.2

文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：B

DOI：10.3969／j.issn.0529-1542.2014.03.038

收稿日期：2013-05-28

修訂日期：2013-07-22

基金項(xiàng)目：公益性行業(yè)（農(nóng)業(yè)）科研專項(xiàng)（200903033）

*通信作者E-mail：hanxiuying＠163.com

Joint-toxicity and field efficacy of mixtures of flusilazole and mancozeb against Venturia nashicola

Zhao Jianjiang， Zhang Xiaofeng， Wang Wenqiao， Ma Zhiqiang， Han Xiuying
（Plant Protection Institute，Hebei Academy of Agricultural and Forestry Sciences，IPM Center of Hebei Province，Key Laboratory of Integrated Pest Management on Crops in Northern Region of North China，Ministry of Agriculture，P.R.China，Baoding 071000，China）

AbstractIn order to clarify the synergistic interaction of flusilazole and mancozeb against Venturia nashicola，the toxicity of flusilazole，mancozeb and their mixtures at different ratios against V.nashicola was determined by mycelial growth rate test，the joint-toxicity of the two fungicides was assessed with Wadley formula，and the efficacy on controlling pear scab was assessed by field trials.The results showed that the mixtures of 1∶20，1∶25，1∶30，1∶35 and 1∶40 exhibited synergistic interaction on the mycelial growth.The synergistic effects of the 1∶25 mixture was the most obvious with synergistic ratio of 2.68.The field trials demonstrated that the mixture 750－1 200 times of flusilazole with mancozeb（1∶25，W／W）exhibited good control effect，with efficacy of over 85%，equal to that of flusilazole 400 EC 8 000 times and difenoconazole 100 WG 7 000 times，respectively，significantly higher than that of mancozeb 700 WP.The mixture of flusilazole with mancozeb（1∶25，W／W）can be widely applied in the fields.

Key wordsflusilazole； mancozeb； Venturia nashicola； synergistic interaction； field efficacy