陳 慧, 楊志玲,①, 袁志林, 楊 旭, 劉小芳

(1. 中國(guó)林業(yè)科學(xué)研究院亞熱帶林業(yè)研究所, 浙江 富陽(yáng) 311400; 2. 湖南省常寧市林業(yè)局, 湖南 常寧 421500)

中藥材白術(shù)是菊科(Compositae)植物白術(shù)(AtractylodesmacrocephalaKoidz.)的干燥根莖，具有護(hù)肝利膽、調(diào)節(jié)免疫、降低血壓和血糖等作用[1]，在江蘇、浙江、福建、江西、安徽、四川、湖北及湖南等地均有栽培[2]；浙江為其道地產(chǎn)區(qū)之一，其中又以金華磐安所產(chǎn)白術(shù)最為著名[3]，常年種植面積約12 km2，年產(chǎn)量約3 000 t，約占全國(guó)總產(chǎn)量的30%[4]。白術(shù)為宿根植物，具有極強(qiáng)的忌地性，不能重茬連作；即使在正常管理?xiàng)l件下，連作白術(shù)也容易得立枯病、根腐病、白絹病和斑枯病，發(fā)病率極高且呈逐年加重的趨勢(shì)[5]；白術(shù)病田死苗率為30%～40%，重病田死苗率達(dá)80%以上，甚至絕收[6]。病害頻發(fā)導(dǎo)致白術(shù)產(chǎn)量和品質(zhì)下降，給藥農(nóng)帶來(lái)了較大的經(jīng)濟(jì)損失。在生產(chǎn)實(shí)踐中，藥農(nóng)為了避免白術(shù)連作，常將1年生白術(shù)幼苗移栽至未種植過(guò)白術(shù)的土壤進(jìn)行復(fù)種，且栽植過(guò)白術(shù)的土壤一般經(jīng)過(guò)3～5 a才可再植，導(dǎo)致土地資源極大浪費(fèi)，影響白術(shù)主產(chǎn)區(qū)的可持續(xù)發(fā)展。

藥用植物在栽植過(guò)程中普遍出現(xiàn)連作障礙問(wèn)題，尤其是根和根莖類藥材的連作障礙問(wèn)題尤為突出，如北沙參(GlehnialittoralisFr. Schmidt ex Miq.)、太子參〔Pseudostellariaheterophylla(Miq.) Pax.〕、當(dāng)歸〔Angelicasinensis(Oliv.) Diels.〕、大黃〔Ligulariaduciformis(C. Winkl.) Hand.-Mazz.〕、黃連(CoptischinensisFranch.)、三七〔Panaxnotoginseng(Burk.) F. H. Chen ex C. Y. Wu et K. M. Feng〕和人參(PanaxginsengC. A. Mey.)等藥材的種植[7]均存在此類問(wèn)題。研究者對(duì)植物連作障礙的關(guān)注由來(lái)已久，但研究對(duì)象主要集中于作物、蔬菜及果樹。近年來(lái)，隨著中藥產(chǎn)業(yè)的發(fā)展，藥用植物栽植過(guò)程中所產(chǎn)生的連作障礙問(wèn)題日益突出，一些學(xué)者對(duì)其原因及機(jī)制進(jìn)行了研究，且藥用植物連作引起的土壤環(huán)境惡化問(wèn)題也成為研究的熱點(diǎn)[8]。黃泰康[9]認(rèn)為：土傳病蟲害是導(dǎo)致人參連作障礙的主要原因，其他原因還包括連作土壤養(yǎng)分虧缺、土壤鹽分積累和土壤酸化等；劉德輝等[10]對(duì)常年種植丹參(SalviamiltiorrhizaBunge)和板藍(lán)根(WrightialaevisHook. f.)等藥材的農(nóng)田土壤肥力變化進(jìn)行了研究，結(jié)果表明土壤有機(jī)質(zhì)、全氮、全磷和有效磷含量隨種植年限延長(zhǎng)而減少，土壤養(yǎng)分比例失調(diào)；夏品華等[11]的研究結(jié)果顯示：不同連作年限太子參栽植土壤的養(yǎng)分失調(diào)、土壤微生物區(qū)系失衡、土壤主要酶活性發(fā)生改變，導(dǎo)致太子參連作障礙的主要原因可能為根系土壤微生態(tài)失衡。

白術(shù)為浙江磐安地區(qū)重要的經(jīng)濟(jì)作物，以往對(duì)白術(shù)的研究主要側(cè)重于良種選育和推廣以及農(nóng)藝栽培技術(shù)的改良[12-13]等方面，對(duì)白術(shù)連作障礙的成因及機(jī)制僅有少量研究報(bào)道。徐建中等[14]的研究結(jié)果顯示：白術(shù)栽植土壤的有機(jī)溶劑浸提液、幼苗根系分泌物及幼苗地上部分和地下部分水浸液對(duì)白術(shù)幼苗生長(zhǎng)均有顯著抑制作用，推測(cè)白術(shù)自毒作用可能是導(dǎo)致其連作障礙的主要原因之一；安信伯等[15]的研究結(jié)果表明：重茬白術(shù)易患根腐病，所引起的死苗率達(dá)50%以上，重病田則達(dá)90%。植物連作障礙往往是多因素共同作用的結(jié)果，僅通過(guò)白術(shù)自毒作用及其病蟲害的研究并不能完全解釋白術(shù)連作障礙的成因，因而，必須從多方面(包括自身生物學(xué)特性、病蟲害及環(huán)境因子等)探討這一問(wèn)題。

為此，作者以不同種植年限白術(shù)根際土壤為研究對(duì)象，分析根際土壤的部分理化指標(biāo)、酶活性和微生物區(qū)系的變化，探討白術(shù)連作障礙與根際土壤理化性質(zhì)、酶活性和微生物變化的關(guān)系，以期為白術(shù)連作障礙機(jī)制的研究提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)，也為白術(shù)連作障礙問(wèn)題的解決提供理論依據(jù)。

1 材料和方法

1.1 樣品采集

1.1.1 材料和樣地概況 白術(shù)種子由浙江磐安中藥研究所提供，經(jīng)溫州大學(xué)生命與環(huán)境科學(xué)學(xué)院丁炳揚(yáng)教授鑒定。

供試白術(shù)的種植樣地位于浙江省磐安縣園塘林場(chǎng)內(nèi)，為新墾山地，地理坐標(biāo)為東經(jīng)120.57°、北緯28.98°,海拔893 m，樣地坡度25.8°，土壤為棕壤。

1.1.2 實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)及采樣方法 于2010年4月選擇面積約180 m2的新墾杉木〔Cunninghamialanceolata(Lamb.) Hook.〕林地1塊，翻耕平整，翻土深度約20 cm；將樣地分成15個(gè)面積4 m×2 m的小區(qū)，小區(qū)間隔30 cm；將小區(qū)做成畦，畦高約15 cm，施足等量基肥。

2010年5月，按照隨機(jī)區(qū)組排列，隨機(jī)選擇5個(gè)小區(qū)播種白術(shù)種子(作為連續(xù)2 a種植小區(qū)，即每處理5個(gè)重復(fù))，株行距為0.2 m；2011年5月，在剩余10個(gè)小區(qū)中隨機(jī)選擇5個(gè)小區(qū)進(jìn)行播種(作為1 a種植小區(qū))，株行距為0.2 m，且播種數(shù)量與2010年相同；其余5個(gè)小區(qū)不進(jìn)行播種(作為對(duì)照小區(qū))。實(shí)驗(yàn)期間，所有小區(qū)(包括對(duì)照小區(qū))的水肥農(nóng)藝管理保持一致。

2012年7月，按五點(diǎn)取樣法采集各小區(qū)土壤。去除植株表層土，取出植株并抖落其根際土壤進(jìn)行收集；同一小區(qū)的10株白術(shù)根際土壤混合均勻后作為1個(gè)土壤樣品，每小區(qū)分別收集3個(gè)土壤樣品。將土壤樣品放入無(wú)菌自封袋中，置于冰盒內(nèi)帶回實(shí)驗(yàn)室。一部分土壤樣品風(fēng)干后用于理化指標(biāo)和酶活性測(cè)定，另一部分土壤樣品置于4 ℃冰箱內(nèi)保存，供土壤微生物數(shù)量測(cè)定。

1.2 測(cè)定方法

1.2.1 土壤中主要養(yǎng)分及元素含量的測(cè)定 參照文獻(xiàn)[16]的方法分別測(cè)定土壤pH值、有機(jī)質(zhì)含量、全氮含量、速效鉀含量、有效磷含量和交換性錳含量；采用ICP-AES法[17]測(cè)定有效鋁含量；采用浸提-原子吸收法[18]測(cè)定有效鐵和有效鉛含量。

1.2.2 土壤中細(xì)菌、真菌及放線菌數(shù)量統(tǒng)計(jì) 參照文獻(xiàn)[19]的方法對(duì)土壤中細(xì)菌、真菌及放線菌進(jìn)行分離與計(jì)數(shù)。

1.2.3 土壤中脲酶、過(guò)氧化氫酶及蛋白酶活性測(cè)定 參照文獻(xiàn)[20]的方法分別測(cè)定土壤中脲酶、過(guò)氧化氫酶及蛋白酶活性。

每個(gè)土壤樣品以上各指標(biāo)均重復(fù)測(cè)定3次。

1.3 數(shù)據(jù)處理和分析

采用SPSS 18.0統(tǒng)計(jì)分析軟件對(duì)測(cè)定數(shù)據(jù)進(jìn)行單因素方差分析及差異顯著性分析。

2 結(jié)果和分析

2.1 不同種植年限白術(shù)根際土壤pH值及養(yǎng)分含量的變化

不同種植年限白術(shù)根際土壤pH值及養(yǎng)分含量的比較見表1。由表1可見：白術(shù)根際土壤pH值隨種植年限的增加而逐漸降低，2年生白術(shù)根際土壤pH值較對(duì)照顯著降低(P<0.05)，與1年生白術(shù)根際土壤pH值相比也有所降低，但未達(dá)到顯著水平(P>0.05)。白術(shù)根際土壤中的有機(jī)質(zhì)和全氮含量隨著種植年限的增加呈先升高后降低的趨勢(shì)，而速效鉀含量則呈逐漸升高的趨勢(shì)，但差異均不顯著；2年生白術(shù)根際土壤中有機(jī)質(zhì)和全氮含量分別比1年生白術(shù)根際土壤降低了8.80%和7.34%。而不同種植年限白術(shù)根際土壤的有效磷含量和C/N比變化不大，差異不顯著。

表1 不同種植年限白術(shù)根際土壤pH值及養(yǎng)分含量比較

2.2 不同種植年限白術(shù)根際土壤中部分金屬元素含量的變化

不同種植年限白術(shù)根際土壤中部分金屬元素含量的比較見表2。由表2可見：2年生白術(shù)根際土壤中有效鐵、有效鋁和交換性錳的含量均較對(duì)照極顯著增加(P<0.01)，分別增加了127.51%、18.38%和106.83%；與1年生白術(shù)根際土壤相比則分別增加了55.53%、14.35%和46.60%，差異達(dá)顯著(P<0.05)或極顯著水平。說(shuō)明隨著種植年限的增加，有效鐵、有效鋁和交換性錳在白術(shù)根際土壤中積累明顯。而隨著白術(shù)種植年限的增加，根際土壤中有效鉛含量較低且變化不大。

2.3 不同種植年限白術(shù)根際土壤中脲酶、蛋白酶和過(guò)氧化氫酶活性的變化

不同種植年限白術(shù)根際土壤中脲酶、蛋白酶和過(guò)氧化氫酶活性的比較見表3。由表3可知：1年生白術(shù)根際土壤中脲酶和蛋白酶活性與對(duì)照相比差異不顯著(P>0.05)，2年生白術(shù)根際土壤中脲酶和蛋白酶活性均較對(duì)照和1年生白術(shù)根際土壤顯著下降(P<0.05)。隨著種植年限的增加白術(shù)根際土壤中過(guò)氧化氫酶活性逐漸降低，2年生白術(shù)根際土壤中過(guò)氧化氫酶活性與對(duì)照和1年生白術(shù)根際土壤相比分別下降19.50%和14.49%，差異分別達(dá)到極顯著(P<0.01)和顯著水平。因此，隨著白術(shù)栽植年限的增加，根際土壤中酶活性也發(fā)生改變，尤其是2年生白術(shù)根際土壤中酶活性顯著降低。

表2 不同種植年限白術(shù)根際土壤中部分金屬元素含量比較

表3 不同種植年限白術(shù)根際土壤中部分酶活性的比較

2.4 不同種植年限白術(shù)根際土壤中細(xì)菌、真菌及放線菌數(shù)量的變化

不同種植年限白術(shù)根際土壤中細(xì)菌、真菌和放線菌數(shù)量的比較見表4。由表4可見：1年生白術(shù)根際土壤中細(xì)菌和放線菌數(shù)量及微生物總量與對(duì)照相比均顯著增加(P<0.05)，但是2年生白術(shù)根際土壤中細(xì)菌和放線菌數(shù)量及微生物總量與1年生白術(shù)根際土壤相比顯著下降；而2年生白術(shù)根際土壤中真菌數(shù)量則較對(duì)照和1年生白術(shù)根際土壤中真菌數(shù)量顯著增加。根際土壤中微生物總量的變化趨勢(shì)與細(xì)菌、放線菌數(shù)量的變化趨勢(shì)相似，隨著白術(shù)栽植年限增加，其數(shù)量呈現(xiàn)倒“U”型趨勢(shì)，表現(xiàn)為先增長(zhǎng)后減少。1年生白術(shù)根際土壤中真菌數(shù)量與對(duì)照相比差異很小，但是2年生白術(shù)根際土壤真菌數(shù)量顯著增加，與細(xì)菌和放線菌數(shù)量的變化趨勢(shì)相反。

表4 不同種植年限白術(shù)根際土壤中細(xì)菌、真菌和放線菌數(shù)量的比較

3 討 論

連作栽培常造成藥用植物生長(zhǎng)發(fā)育變差、抗逆能力下降、同類病蟲害猖獗、藥材產(chǎn)量和質(zhì)量下降,嚴(yán)重者甚至導(dǎo)致植株死亡[21]。關(guān)于藥用植物連作障礙問(wèn)題的相關(guān)研究已有較多報(bào)道，涉及的藥材有人參、地黃〔Rehmanniaglutinos(Gaetn.) Libosch. ex Fisch.et Mey.〕、三七和丹參等[22]。由土壤因素而引起的作物連作障礙是學(xué)者廣泛關(guān)注的熱點(diǎn)[23],具體集中在土壤理化性狀的改變、土壤生物學(xué)環(huán)境變化(包括土壤酶活性和土壤微生物群落結(jié)構(gòu)的變化)等方面[21]。

本研究分析了不同種植年限白術(shù)根際土壤的理化性質(zhì)，研究結(jié)果表明：與1年生白術(shù)根際土壤相比，2年生白術(shù)根際土壤pH值降低，所取土樣的酸堿度均小于pH 5，表現(xiàn)出較強(qiáng)酸性。這與喻敏等[24]對(duì)連州百合(Liliumbrowniivar.viridulumBaker)連作田土壤pH值變化的研究結(jié)論相近。一些學(xué)者對(duì)丹參和附子(AconitumcarmichaeliDebx.)的相關(guān)研究也得出“隨著連作年限的增加，土壤有變酸的趨勢(shì)[25-26]”這一結(jié)論。同時(shí)，本研究結(jié)果還表明：2年生白術(shù)根際土壤中有效鐵、有效鋁和交換性錳的含量較對(duì)照顯著增加。竇森等[27]在研究栽參后的土壤化學(xué)性質(zhì)時(shí)也發(fā)現(xiàn)：栽參3年間土壤中的活性鐵、錳和鋁的含量提高，變化幅度分別為1.7%～33.2%、6.9%～36.7%和39%～99.8%。有研究證實(shí)：當(dāng)土壤酸堿度低于pH 5時(shí)，高活性鋁離子的含量會(huì)隨著pH值的進(jìn)一步降低迅速上升，嚴(yán)重制約植物生長(zhǎng)，鋁毒害是酸性土壤中植物生長(zhǎng)發(fā)育的主要限制因子[28]。另有研究表明：在土壤pH 4.5以下的條件下，溶解性鐵和錳含量大大增加，鐵和錳濃度的提高將對(duì)植物根系產(chǎn)生毒害[21]。此外，鋁等金屬元素大量積累，會(huì)使根生長(zhǎng)嚴(yán)重受阻，側(cè)根和根毛數(shù)大為減少，根尖和側(cè)根變粗變短，根脆性增大[29]，容易產(chǎn)生一些根部病害，進(jìn)而可能導(dǎo)致植物連作障礙。

與1年生白術(shù)根際土壤相比，2年生白術(shù)根際土壤中過(guò)氧化氫酶、脲酶和蛋白酶活性均呈顯著下降趨勢(shì)。這與廖海兵等[30]對(duì)浙貝母(FritillariathunbergiiMiq.)連作的相關(guān)研究結(jié)果非常相似。土壤酶活性通常作為表征土壤肥力的重要指標(biāo)[31]。土壤中各類酶參與生物的呼吸代謝[32]，并通過(guò)酶促過(guò)氧化氫的分解，減少過(guò)氧化氫大量積累，防止過(guò)氧化氫對(duì)植物體產(chǎn)生毒害[33]。土壤中過(guò)氧化氫酶活性降低，使植物根部氧化脅迫加劇，進(jìn)而破壞根部組織細(xì)胞壁和細(xì)胞膜，使根部組織更易受到病原菌的侵染，最終可能導(dǎo)致植物病害發(fā)生。土壤中脲酶和蛋白酶主要參與土壤氮素的轉(zhuǎn)化，保證植物順利獲得有效氮素營(yíng)養(yǎng)。土壤中脲酶和蛋白酶活性下降，會(huì)使土壤中可利用氮素營(yíng)養(yǎng)降低。隨著白術(shù)種植年限的增加，根際土壤中過(guò)氧化氫酶、脲酶和蛋白酶的活性也逐漸降低，影響土壤正常的生物化學(xué)過(guò)程。以上這些異常的生物化學(xué)過(guò)程可能導(dǎo)致土壤的養(yǎng)分轉(zhuǎn)化及其結(jié)構(gòu)改變，導(dǎo)致白術(shù)正常生長(zhǎng)所需要的營(yíng)養(yǎng)無(wú)法得到滿足，從而可能對(duì)白術(shù)生長(zhǎng)發(fā)育產(chǎn)生不良影響，進(jìn)而產(chǎn)生連作障礙。

本研究結(jié)果還顯示：白術(shù)栽植2 a后根際土壤微生物區(qū)系發(fā)生變化，主要表現(xiàn)為土壤中細(xì)菌數(shù)量減少、真菌數(shù)量增多。林茂茲等[34]對(duì)連作2 a太子參的土壤微生物的研究結(jié)果顯示：根際土壤微生態(tài)有所改變，根際土壤中“細(xì)菌/真菌”的數(shù)量比均小于休閑土和種植1 a的土壤。郭蘭萍等[35]對(duì)蒼術(shù)〔Atractylodeslancea(Thunb.) DC.〕根際土壤微生物區(qū)系的研究也得出了相似的結(jié)果：2年生蒼術(shù)根際區(qū)土壤中細(xì)菌、真菌和放線菌數(shù)量普遍低于1年生蒼術(shù)根際區(qū)土壤，分別下降46.14%、49.25%和31.88%。此外，1年生地黃土壤中微生物種群多樣性顯著大于2年生地黃土壤，前者的土壤微生物群落調(diào)節(jié)功能更強(qiáng)[36]。多項(xiàng)研究結(jié)果均顯示：連作土壤過(guò)度酸化會(huì)使土壤微生物種類及數(shù)量比例發(fā)生改變，一些有益微生物數(shù)量下降[37]，表現(xiàn)為細(xì)菌和放線菌數(shù)量下降，有害真菌和線蟲的數(shù)量上升[38]。本研究中，與1年生白術(shù)根際土壤相比，2年生白術(shù)根際土壤微生物群落結(jié)構(gòu)有一定差異，土壤根際微生態(tài)發(fā)生了變化。白術(shù)根際土壤所呈現(xiàn)的酸性環(huán)境十分有利于真菌類病原微生物的滋生繁衍，但并不利于細(xì)菌和放線菌等有益微生物的繁衍，這樣的變化可能會(huì)使白術(shù)根部極易感染病害。

陳興福等[39]認(rèn)為：白術(shù)適宜在微酸性至中性的土壤中生長(zhǎng)。本研究結(jié)果顯示：與1年生白術(shù)根際土壤相比，2年生白術(shù)根際土壤酸化嚴(yán)重，鋁離子等金屬離子在白術(shù)根部大量積累，部分土壤酶活性失調(diào)，土壤理化狀態(tài)發(fā)生變化；根際土壤中細(xì)菌和放線菌數(shù)量下降，真菌數(shù)量上升，微生物區(qū)系有所改變，這些因素均可能誘發(fā)白術(shù)連作障礙。然而，要明確白術(shù)連作障礙的主導(dǎo)因子還需要就其連作之后白術(shù)生長(zhǎng)、品質(zhì)與根際土壤理化性質(zhì)、酶活性及微生物區(qū)系變化進(jìn)行連續(xù)的跟蹤研究。

參考文獻(xiàn):

[1] 國(guó)家藥典委員會(huì). 中華人民共和國(guó)藥典: 2010年版(一部)[M]. 北京: 中國(guó)醫(yī)藥科技出版社, 2010: 95-96.

[2] 中國(guó)科學(xué)院中國(guó)植物志編輯委員會(huì). 中國(guó)植物志: 第七十八卷第一分冊(cè)[M]. 北京: 科學(xué)出版社, 1987: 28.

[3] 俞葉飛. 磐安五味[J]. 養(yǎng)生月刊， 2010(9): 859-861.

[4] 磐安縣第五屆藥交會(huì)組委會(huì)辦公室. 磐安: “中國(guó)藥材之鄉(xiāng)”[EB/OL]. [2011-09-14]. http:∥city.sina.com.cn/city/t/2011-09-14/091022495.html.

[5] 潘秋祥, 潘顯能, 袁伯新, 等. “連作”生物有機(jī)肥在白術(shù)重茬中的應(yīng)用效果[J]. 河北農(nóng)業(yè)科學(xué), 2008, 12(5): 57, 59.

[6] 劉英慧, 趙來(lái)順. 白術(shù)根腐病研究初報(bào)[J]. 中草藥, 1991, 21(6): 32-33.

[7] 郭巧生. 藥用植物栽培學(xué)[M]. 北京: 高等教育出版社, 2004: 61.

[8] 郭蘭萍, 黃璐琦, 蔣有緒. 等. 藥用植物栽培種植中的土壤環(huán)境惡化及防治策略[J]. 中國(guó)中藥雜志， 2006, 31(9): 714-717.

[9] 黃泰康. 天然藥物地理學(xué)[M]. 北京: 中國(guó)醫(yī)藥科技出版社, 1991: 192.

[10] 劉德輝, 郭巧生, 孫玉華, 等. 蘇北中藥材種植地土壤肥力衰退原因及其恢復(fù)對(duì)策[J]. 土壤通報(bào), 2000, 31(2): 76-78.

[11] 夏品華, 劉 燕. 太子參連作障礙效應(yīng)研究[J]. 西北植物學(xué)報(bào), 2010, 30(11): 2240-2246.

[12] 儲(chǔ)開江, 潘秋祥, 李 林, 等. 2個(gè)白術(shù)品種區(qū)域試驗(yàn)初報(bào)[J]. 浙江林學(xué)院學(xué)報(bào), 2008, 25(1): 127-130.

[13] 何伯偉, 姚國(guó)富, 王忠興, 等. 白術(shù)花蕾控制技術(shù)研究[J]. 中國(guó)現(xiàn)代中藥, 2011, 13(8): 25-27.

[14] 徐建中, 王志安, 孫乙銘, 等. 白術(shù)自毒作用研究[J]. 中國(guó)現(xiàn)代中藥, 2011, 13(11): 25-27, 48.

[15] 安信伯, 李德新, 姚克榮, 等. 白術(shù)根腐病發(fā)生規(guī)律研究[J]. 河北林果研究, 2007, 22(1): 65-68.

[16] 鮑士旦. 土壤農(nóng)化分析[M]. 3版. 北京: 中國(guó)農(nóng)業(yè)出版社, 2000.

[17] 陳 豐, 劉 芳. 微波消解/ICP-AES法測(cè)定土壤中的環(huán)境有效態(tài)金屬元素[J]. 上海環(huán)境科學(xué), 2003, 22(12): 967-970.

[18] 簡(jiǎn)在友, 王文全, 孟 麗, 等. 人參連作土壤元素含量分析[J]. 土壤通報(bào), 2011, 42(2): 369-371.

[19] 中國(guó)科學(xué)院南京土壤研究所微生物室. 土壤微生物研究法[M]. 北京: 科學(xué)出版社, 1985.

[20] 關(guān)松萌, 張德生, 張志明. 土壤酶及其研究法[M]. 北京: 農(nóng)業(yè)出版社, 1986.

[21] 張子龍, 王文全. 藥用植物連作障礙的形成機(jī)理及其防治[J]. 中國(guó)農(nóng)業(yè)科技導(dǎo)報(bào), 2009, 11(6): 19-23.

[22] 喬卿梅, 程茂高, 王新民. 根際微生物在克服藥用植物連作障礙中的潛力[J]. 土壤通報(bào), 2009, 40(4): 957-961.

[23] 苗淑杰, 喬云發(fā), 韓曉增. 大豆連作障礙的研究進(jìn)展[J]. 中國(guó)生態(tài)農(nóng)業(yè)學(xué)報(bào), 2007, 15(3): 203-206.

[24] 喻 敏, 余均沃, 曹培根, 等. 百合連作土壤養(yǎng)分及物理性狀分析[J]. 土壤通報(bào), 2004, 35(3): 377-379．

[25] 張辰露, 孫 群, 葉 青. 連作對(duì)丹參生長(zhǎng)的障礙效應(yīng)[J]. 西北植物學(xué)報(bào), 2005, 25(5): 1029-1034.

[26] 張歡強(qiáng), 慕小倩, 梁宗鎖, 等. 附子連作障礙效應(yīng)初步研究[J]. 西北植物學(xué)報(bào), 2007, 27(10): 2112-2115.

[27] 竇 森, 張晉京, 江 源, 等. 栽參對(duì)土壤化學(xué)性質(zhì)的影響[J]. 吉林農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào), 1996, 18(3): 67-73.

[28] 閻 君, 劉建秀. 草類植物耐鋁性的研究進(jìn)展[J]. 草業(yè)學(xué)報(bào), 2008, 17(6): 148-155.

[29] 應(yīng)小芳, 劉 鵬, 徐根娣. 土壤中的鋁及其植物效應(yīng)的研究進(jìn)展[J]. 生態(tài)環(huán)境, 2003, 12(2): 237-239.

[30] 廖海兵, 李云霞, 邵晶晶, 等. 連作對(duì)浙貝母生長(zhǎng)及土壤性質(zhì)的影響[J]. 生態(tài)學(xué)雜志, 2011, 30(10): 2203-2208.

[31] 孫瑞蓮, 趙秉強(qiáng), 朱魯生, 等. 長(zhǎng)期定位施肥對(duì)土壤酶活性的影響及其調(diào)控土壤肥力的作用[J]. 植物營(yíng)養(yǎng)與肥料學(xué)報(bào), 2003, 9(4): 406-410.

[32] 馬云華, 王秀峰, 魏 珉, 等. 黃瓜連作土壤酚酸類物質(zhì)積累對(duì)土壤微生物和酶活性的影響[J]. 應(yīng)用生態(tài)學(xué)報(bào), 2005, 16(11): 2149-2153.

[33] 張萍華, 申秀英, 許曉路, 等. 酸雨對(duì)白術(shù)土壤微生物及酶活性的影響[J]. 土壤通報(bào), 2005, 36(2): 227-229.

[34] 林茂茲, 王海斌, 林輝鋒. 太子參連作對(duì)根際土壤微生物的影響[J]. 生態(tài)學(xué)雜志, 2012, 31(1): 106-111.

[35] 郭蘭萍, 黃璐琦, 蔣有緒, 等. 栽培蒼術(shù)根際土壤微生物變化[J]. 中國(guó)中藥雜志, 2007, 32(12): 1131-1133.

[36] 陳 慧. 地黃連作對(duì)土壤微生物的影響[D]. 福州： 福建農(nóng)林大學(xué)農(nóng)業(yè)生態(tài)研究所, 2008: 44-46.

[37] 張重義, 陳 慧, 楊艷會(huì), 等. 連作對(duì)地黃根際土壤細(xì)菌群落多樣性的影響[J]. 應(yīng)用生態(tài)學(xué)報(bào), 2010, 21(11): 2843-2848.

[38] 劉建國(guó), 卞新民, 李彥斌, 等. 長(zhǎng)期連作和秸稈還田對(duì)棉田土壤生物活性的影響[J]. 應(yīng)用生態(tài)學(xué)報(bào), 2008, 19(5): 1027-1032.

[39] 陳興福, 劉思勛, 劉歲榮, 等. 白術(shù)生長(zhǎng)土壤的研究[J]. 中藥研究與信息, 2003, 5(7): 12-16.