趙亮　徐炳欣　石曉曉　蘭丙欣

【摘要】 目的 建立高效液相色譜法測(cè)定紫杉醇注射液的含量及有關(guān)物質(zhì)的方法。方法 應(yīng)用HPLC法， 色譜柱為Hypersil BDS C18（4.6 mm×250 mm， 5 μm）， 檢測(cè)波長(zhǎng)為227 nm， 柱溫35℃， 流速為1.0 ml/min， 進(jìn)樣量為20 μl， 流動(dòng)相為甲醇-乙腈-水（45：30：25， v/v）。結(jié)果 紫杉醇濃度在10～125 mg·L-1的范圍內(nèi)， 溶液的濃度與色譜峰面積線性關(guān)系良好（R2=0.9998， n=6）。精密度試驗(yàn)RSD為0.17%（n=5）， 平均加樣回收率為99.33%， RSD=0.38%。結(jié)論 本方法簡(jiǎn)便、準(zhǔn)確、快速、重復(fù)性好， 可用于紫杉醇注射液的含量測(cè)定和有關(guān)物質(zhì)檢查。

【關(guān)鍵詞】 紫杉醇注射液；高效液相色譜法；含量測(cè)定；有關(guān)物質(zhì)

紫杉醇（paclitaxel）是從短葉紫杉樹(shù)皮中提取的具有抗癌活性物質(zhì)， 為一種新型的抗微管藥物[1]。紫杉醇的作用機(jī)制為：促進(jìn)微管雙聚體裝配成微管， 并通過(guò)干擾去多聚化過(guò)程而使微管的穩(wěn)定， 從而抑制微管網(wǎng)正常動(dòng)力學(xué)重組， 導(dǎo)致細(xì)胞分裂受阻。此外， 本藥還具有放射增敏效應(yīng)， 可促進(jìn)離子照射所致細(xì)胞損害[2， 3]。臨床上紫杉醇注射液主要用于卵巢癌、乳腺癌、非小細(xì)胞肺癌等癌癥的治療[4， 5]。藥物含量是評(píng)價(jià)藥品質(zhì)量的重要指標(biāo)之一， 為保證紫杉醇注射液的質(zhì)量， 實(shí)現(xiàn)臨床用藥安全可靠， 作者嘗試建立高效液相色譜法（HPLC）測(cè)定其含量。該方法準(zhǔn)確， 重復(fù)性好， 專(zhuān)屬性強(qiáng)， 與中國(guó)藥典2010年版收錄的紫杉醇含量測(cè)定方法相比較， 具有簡(jiǎn)便、快速的優(yōu)點(diǎn)。

1 儀器與試藥

島津LC-15C高效液相色譜儀；島津SPD-15C Essentia uv/vis檢測(cè)器；島津工作站LC-solution；AR 1140 型電子天平（梅特勒·托利多儀器有限公司）；KQ3200E 型超聲波清洗器（昆山市超聲儀器有限公司）；AUW 120D 型電子天平（日本島津公司）。

紫杉醇對(duì)照品（許昌恒生藥業(yè)有限公司提供， 純度>99.9%， 批號(hào)為A0177）；紫杉醇注射液（購(gòu)于江蘇紅豆衫藥業(yè)有限公司， 規(guī)格5 ml/30 mg， 批號(hào)分別為20130801， 20130805， 20130809）；甲醇（色譜純）（天津市四友精細(xì)化學(xué)品有限公司）；乙腈（色譜純）（天津市四友精細(xì)化學(xué)品有限公司）；其它試劑均為分析純， 水為超純水。

2 方法與結(jié)果

2. 1 色譜條件 色譜柱：Hypersil BDS C18（4.6 mm×250 mm， 5 μm）， 檢測(cè)波長(zhǎng)227 nm， 柱溫35℃， 流速為1.0 ml/min， 進(jìn)樣量為20 μl， 流動(dòng)相為甲醇-乙腈-水（45：30：25， v/v）。

2. 2 對(duì)照品溶液的配制 精密稱(chēng)取紫杉醇對(duì)照品適量， 置于10 ml容量瓶中， 加乙醇稀釋并定容至刻度， 搖勻， 得濃度為500 mg·L-1對(duì)照品貯備液。

2. 3 樣品溶液的制備 分別取批號(hào)為20130801， 20130805， 20130809的3批紫杉醇注射液適量， （相當(dāng)于紫杉醇6 mg）置于100 ml容量瓶中， 加乙醇稀釋并定容至刻度， 搖勻即得。

2. 4 專(zhuān)屬性試驗(yàn) 紫杉醇對(duì)照品（A）和樣品中紫杉醇的HPLC圖（B）， 見(jiàn)圖1。

圖1 對(duì)照品（A）及樣品（B）

2. 5 線性關(guān)系考察 精密量取“2.2”項(xiàng)下對(duì)照品溶液0.2、0.4、1.0、2.0、2.5 ml， 分別置于10 ml容量瓶中， 用乙醇稀釋并定容至刻度， 搖勻， 得到對(duì)照品濃度分別為10、20、50、100、125 mg·L-1的溶液；進(jìn)樣， 記錄峰面積值。以對(duì)照品濃度（X）為橫坐標(biāo)， 對(duì)照品峰面積（Y）為縱坐標(biāo)， 進(jìn)行線性回歸， 得回歸方程：Y=40555X-34526， R2=0.9999。由此可知紫杉醇含量在10～125 mg·L-1時(shí)線性關(guān)系良好。

2. 6 精密度試驗(yàn) 取“2.2”項(xiàng)下對(duì)照品溶液， 按“2.1”項(xiàng)下色譜條件連續(xù)進(jìn)樣6次， 其峰面積的RSD為0.17%（n=5）。

2. 7 穩(wěn)定性試驗(yàn) 取“2.3”項(xiàng)下樣品溶液（批號(hào)：20130805）在室溫避光下放置， 分別于0、2、4、6、8、12 h時(shí)， 在儀器不關(guān)閉狀態(tài)下測(cè)定不同時(shí)間內(nèi)的含量。結(jié)果， 樣品含量的RSD為0.26%（n=6）， 表明樣品溶液在12 h內(nèi)穩(wěn)定性好。

2. 8 加樣回收率試驗(yàn) 精密量取已知含量批號(hào)為20130805的紫杉醇注射液適量（相當(dāng)于紫杉醇3 mg）， 分別精密加入紫杉醇對(duì)照品適量， 置于100 ml容量瓶中， 用乙醇稀釋并定容至刻度， 搖勻， 按“2.1”項(xiàng)下實(shí)驗(yàn)條件進(jìn)樣， 結(jié)果見(jiàn)表1。

2. 9 樣品含量測(cè)定 將3批樣品溶液分別按“2.1”項(xiàng)下實(shí)驗(yàn)條件進(jìn)樣， 結(jié)果見(jiàn)表2。

2. 10 有關(guān)物質(zhì)檢查 采用不加校正因子的主成分自身對(duì)照法。精密稱(chēng)取紫杉醇適量， 置10 ml 容量瓶中， 加乙醇稀釋并定容至刻度， 搖勻， 制成200 mg·L-1的溶液作為供試品溶液；取供試品溶液1 ml置10 ml 容量瓶中， 加流動(dòng)相稀釋至刻度， 作為對(duì)照溶液。取對(duì)照溶液20 μl進(jìn)樣， 調(diào)節(jié)檢測(cè)靈敏度， 使主峰高達(dá)到記錄儀滿量程的10%左右， 再取供試品溶液進(jìn)樣20 μl， 記錄色譜圖至主成分峰保留時(shí)間的2倍?？鄢軇┓搴洼o料峰， 量取色譜圖上紫杉醇色譜峰外各雜質(zhì)的峰面積總和， 并與對(duì)照溶液主成分的峰面積比較， 計(jì)算雜質(zhì)含量。結(jié)果見(jiàn)表2， 3批樣品中有關(guān)物質(zhì)均<1.2%。

3 討論

應(yīng)用紫外分光光度計(jì)對(duì)紫杉醇在190～400 nm范圍內(nèi)掃描， 結(jié)果顯示紫杉醇在227 nm處有較強(qiáng)吸收。作者采用227 nm作為該分析方法的檢測(cè)波長(zhǎng)， 可獲得較高靈敏度， 基線平穩(wěn)， 良好的峰形。

為了得到一個(gè)良好的分析效果， 作者在試驗(yàn)中對(duì)流動(dòng)相進(jìn)行了優(yōu)化。試驗(yàn)分別考察了甲醇-水系統(tǒng)、乙腈-水系統(tǒng)、甲醇-乙腈-水系統(tǒng)， 結(jié)果發(fā)現(xiàn)以甲醇-乙腈-水系統(tǒng)為流動(dòng)相， 在選定的檢測(cè)波長(zhǎng)條件下， 基線穩(wěn)定， 能夠得到良好的峰形， 最終確定流動(dòng)相為甲醇-乙腈-水（45：30：25， v/v）為該分析方法的流動(dòng)相?？傊?本方法操作簡(jiǎn)便、準(zhǔn)確度高、重現(xiàn)性好， 可用于紫杉醇含量的測(cè)定與質(zhì)量控制。

參考文獻(xiàn)

[1] Jared Bushman， Asa Vaughan， Larisa Sheihet， et al. Functionalized nanospheres for targeted delivery of paclitaxel. Journal of Controlled Release， 2013，171（3）：315-321.

[2] 趙惠.紫杉醇周?chē)窠?jīng)毒性臨床觀察.中國(guó)實(shí)用醫(yī)藥， 2008， 3（13）：136-137.

[3] 龔奎玉，王志東，李建璜.中國(guó)實(shí)用醫(yī)藥， 2008，3（21）：73-75.

[4] Michela Di Michelea， Simone Marconea， Lucia Cicchillitti， et al. Glycoproteomics of paclitaxel resistance in human epithelial ovarian cancer cell lines： Towards the identification of putative biomarkers.Journal of Proteomics， 2010，73（5）：879-898.

[5] Rong Liua， Denis M. Gilmorea， Kimberly Ann V. Zubris， et al. Prevention of nodal metastases in breast cancer following the lymphatic migration of paclitaxel-loaded expansile nanopartic.Biomaterials， 2013，34（7）：1810-1819.

【摘要】 目的 建立高效液相色譜法測(cè)定紫杉醇注射液的含量及有關(guān)物質(zhì)的方法。方法 應(yīng)用HPLC法， 色譜柱為Hypersil BDS C18（4.6 mm×250 mm， 5 μm）， 檢測(cè)波長(zhǎng)為227 nm， 柱溫35℃， 流速為1.0 ml/min， 進(jìn)樣量為20 μl， 流動(dòng)相為甲醇-乙腈-水（45：30：25， v/v）。結(jié)果 紫杉醇濃度在10～125 mg·L-1的范圍內(nèi)， 溶液的濃度與色譜峰面積線性關(guān)系良好（R2=0.9998， n=6）。精密度試驗(yàn)RSD為0.17%（n=5）， 平均加樣回收率為99.33%， RSD=0.38%。結(jié)論 本方法簡(jiǎn)便、準(zhǔn)確、快速、重復(fù)性好， 可用于紫杉醇注射液的含量測(cè)定和有關(guān)物質(zhì)檢查。

【關(guān)鍵詞】 紫杉醇注射液；高效液相色譜法；含量測(cè)定；有關(guān)物質(zhì)

紫杉醇（paclitaxel）是從短葉紫杉樹(shù)皮中提取的具有抗癌活性物質(zhì)， 為一種新型的抗微管藥物[1]。紫杉醇的作用機(jī)制為：促進(jìn)微管雙聚體裝配成微管， 并通過(guò)干擾去多聚化過(guò)程而使微管的穩(wěn)定， 從而抑制微管網(wǎng)正常動(dòng)力學(xué)重組， 導(dǎo)致細(xì)胞分裂受阻。此外， 本藥還具有放射增敏效應(yīng)， 可促進(jìn)離子照射所致細(xì)胞損害[2， 3]。臨床上紫杉醇注射液主要用于卵巢癌、乳腺癌、非小細(xì)胞肺癌等癌癥的治療[4， 5]。藥物含量是評(píng)價(jià)藥品質(zhì)量的重要指標(biāo)之一， 為保證紫杉醇注射液的質(zhì)量， 實(shí)現(xiàn)臨床用藥安全可靠， 作者嘗試建立高效液相色譜法（HPLC）測(cè)定其含量。該方法準(zhǔn)確， 重復(fù)性好， 專(zhuān)屬性強(qiáng)， 與中國(guó)藥典2010年版收錄的紫杉醇含量測(cè)定方法相比較， 具有簡(jiǎn)便、快速的優(yōu)點(diǎn)。

1 儀器與試藥

島津LC-15C高效液相色譜儀；島津SPD-15C Essentia uv/vis檢測(cè)器；島津工作站LC-solution；AR 1140 型電子天平（梅特勒·托利多儀器有限公司）；KQ3200E 型超聲波清洗器（昆山市超聲儀器有限公司）；AUW 120D 型電子天平（日本島津公司）。

紫杉醇對(duì)照品（許昌恒生藥業(yè)有限公司提供， 純度>99.9%， 批號(hào)為A0177）；紫杉醇注射液（購(gòu)于江蘇紅豆衫藥業(yè)有限公司， 規(guī)格5 ml/30 mg， 批號(hào)分別為20130801， 20130805， 20130809）；甲醇（色譜純）（天津市四友精細(xì)化學(xué)品有限公司）；乙腈（色譜純）（天津市四友精細(xì)化學(xué)品有限公司）；其它試劑均為分析純， 水為超純水。

2 方法與結(jié)果

2. 1 色譜條件 色譜柱：Hypersil BDS C18（4.6 mm×250 mm， 5 μm）， 檢測(cè)波長(zhǎng)227 nm， 柱溫35℃， 流速為1.0 ml/min， 進(jìn)樣量為20 μl， 流動(dòng)相為甲醇-乙腈-水（45：30：25， v/v）。

2. 2 對(duì)照品溶液的配制 精密稱(chēng)取紫杉醇對(duì)照品適量， 置于10 ml容量瓶中， 加乙醇稀釋并定容至刻度， 搖勻， 得濃度為500 mg·L-1對(duì)照品貯備液。

2. 3 樣品溶液的制備 分別取批號(hào)為20130801， 20130805， 20130809的3批紫杉醇注射液適量， （相當(dāng)于紫杉醇6 mg）置于100 ml容量瓶中， 加乙醇稀釋并定容至刻度， 搖勻即得。

2. 4 專(zhuān)屬性試驗(yàn) 紫杉醇對(duì)照品（A）和樣品中紫杉醇的HPLC圖（B）， 見(jiàn)圖1。

圖1 對(duì)照品（A）及樣品（B）

2. 5 線性關(guān)系考察 精密量取“2.2”項(xiàng)下對(duì)照品溶液0.2、0.4、1.0、2.0、2.5 ml， 分別置于10 ml容量瓶中， 用乙醇稀釋并定容至刻度， 搖勻， 得到對(duì)照品濃度分別為10、20、50、100、125 mg·L-1的溶液；進(jìn)樣， 記錄峰面積值。以對(duì)照品濃度（X）為橫坐標(biāo)， 對(duì)照品峰面積（Y）為縱坐標(biāo)， 進(jìn)行線性回歸， 得回歸方程：Y=40555X-34526， R2=0.9999。由此可知紫杉醇含量在10～125 mg·L-1時(shí)線性關(guān)系良好。

2. 6 精密度試驗(yàn) 取“2.2”項(xiàng)下對(duì)照品溶液， 按“2.1”項(xiàng)下色譜條件連續(xù)進(jìn)樣6次， 其峰面積的RSD為0.17%（n=5）。

2. 7 穩(wěn)定性試驗(yàn) 取“2.3”項(xiàng)下樣品溶液（批號(hào)：20130805）在室溫避光下放置， 分別于0、2、4、6、8、12 h時(shí)， 在儀器不關(guān)閉狀態(tài)下測(cè)定不同時(shí)間內(nèi)的含量。結(jié)果， 樣品含量的RSD為0.26%（n=6）， 表明樣品溶液在12 h內(nèi)穩(wěn)定性好。

2. 8 加樣回收率試驗(yàn) 精密量取已知含量批號(hào)為20130805的紫杉醇注射液適量（相當(dāng)于紫杉醇3 mg）， 分別精密加入紫杉醇對(duì)照品適量， 置于100 ml容量瓶中， 用乙醇稀釋并定容至刻度， 搖勻， 按“2.1”項(xiàng)下實(shí)驗(yàn)條件進(jìn)樣， 結(jié)果見(jiàn)表1。

2. 9 樣品含量測(cè)定 將3批樣品溶液分別按“2.1”項(xiàng)下實(shí)驗(yàn)條件進(jìn)樣， 結(jié)果見(jiàn)表2。

2. 10 有關(guān)物質(zhì)檢查 采用不加校正因子的主成分自身對(duì)照法。精密稱(chēng)取紫杉醇適量， 置10 ml 容量瓶中， 加乙醇稀釋并定容至刻度， 搖勻， 制成200 mg·L-1的溶液作為供試品溶液；取供試品溶液1 ml置10 ml 容量瓶中， 加流動(dòng)相稀釋至刻度， 作為對(duì)照溶液。取對(duì)照溶液20 μl進(jìn)樣， 調(diào)節(jié)檢測(cè)靈敏度， 使主峰高達(dá)到記錄儀滿量程的10%左右， 再取供試品溶液進(jìn)樣20 μl， 記錄色譜圖至主成分峰保留時(shí)間的2倍?？鄢軇┓搴洼o料峰， 量取色譜圖上紫杉醇色譜峰外各雜質(zhì)的峰面積總和， 并與對(duì)照溶液主成分的峰面積比較， 計(jì)算雜質(zhì)含量。結(jié)果見(jiàn)表2， 3批樣品中有關(guān)物質(zhì)均<1.2%。

3 討論

應(yīng)用紫外分光光度計(jì)對(duì)紫杉醇在190～400 nm范圍內(nèi)掃描， 結(jié)果顯示紫杉醇在227 nm處有較強(qiáng)吸收。作者采用227 nm作為該分析方法的檢測(cè)波長(zhǎng)， 可獲得較高靈敏度， 基線平穩(wěn)， 良好的峰形。

為了得到一個(gè)良好的分析效果， 作者在試驗(yàn)中對(duì)流動(dòng)相進(jìn)行了優(yōu)化。試驗(yàn)分別考察了甲醇-水系統(tǒng)、乙腈-水系統(tǒng)、甲醇-乙腈-水系統(tǒng)， 結(jié)果發(fā)現(xiàn)以甲醇-乙腈-水系統(tǒng)為流動(dòng)相， 在選定的檢測(cè)波長(zhǎng)條件下， 基線穩(wěn)定， 能夠得到良好的峰形， 最終確定流動(dòng)相為甲醇-乙腈-水（45：30：25， v/v）為該分析方法的流動(dòng)相?？傊?本方法操作簡(jiǎn)便、準(zhǔn)確度高、重現(xiàn)性好， 可用于紫杉醇含量的測(cè)定與質(zhì)量控制。

參考文獻(xiàn)

[1] Jared Bushman， Asa Vaughan， Larisa Sheihet， et al. Functionalized nanospheres for targeted delivery of paclitaxel. Journal of Controlled Release， 2013，171（3）：315-321.

[2] 趙惠.紫杉醇周?chē)窠?jīng)毒性臨床觀察.中國(guó)實(shí)用醫(yī)藥， 2008， 3（13）：136-137.

[3] 龔奎玉，王志東，李建璜.中國(guó)實(shí)用醫(yī)藥， 2008，3（21）：73-75.

[4] Michela Di Michelea， Simone Marconea， Lucia Cicchillitti， et al. Glycoproteomics of paclitaxel resistance in human epithelial ovarian cancer cell lines： Towards the identification of putative biomarkers.Journal of Proteomics， 2010，73（5）：879-898.

[5] Rong Liua， Denis M. Gilmorea， Kimberly Ann V. Zubris， et al. Prevention of nodal metastases in breast cancer following the lymphatic migration of paclitaxel-loaded expansile nanopartic.Biomaterials， 2013，34（7）：1810-1819.

【摘要】 目的 建立高效液相色譜法測(cè)定紫杉醇注射液的含量及有關(guān)物質(zhì)的方法。方法 應(yīng)用HPLC法， 色譜柱為Hypersil BDS C18（4.6 mm×250 mm， 5 μm）， 檢測(cè)波長(zhǎng)為227 nm， 柱溫35℃， 流速為1.0 ml/min， 進(jìn)樣量為20 μl， 流動(dòng)相為甲醇-乙腈-水（45：30：25， v/v）。結(jié)果 紫杉醇濃度在10～125 mg·L-1的范圍內(nèi)， 溶液的濃度與色譜峰面積線性關(guān)系良好（R2=0.9998， n=6）。精密度試驗(yàn)RSD為0.17%（n=5）， 平均加樣回收率為99.33%， RSD=0.38%。結(jié)論 本方法簡(jiǎn)便、準(zhǔn)確、快速、重復(fù)性好， 可用于紫杉醇注射液的含量測(cè)定和有關(guān)物質(zhì)檢查。

【關(guān)鍵詞】 紫杉醇注射液；高效液相色譜法；含量測(cè)定；有關(guān)物質(zhì)

紫杉醇（paclitaxel）是從短葉紫杉樹(shù)皮中提取的具有抗癌活性物質(zhì)， 為一種新型的抗微管藥物[1]。紫杉醇的作用機(jī)制為：促進(jìn)微管雙聚體裝配成微管， 并通過(guò)干擾去多聚化過(guò)程而使微管的穩(wěn)定， 從而抑制微管網(wǎng)正常動(dòng)力學(xué)重組， 導(dǎo)致細(xì)胞分裂受阻。此外， 本藥還具有放射增敏效應(yīng)， 可促進(jìn)離子照射所致細(xì)胞損害[2， 3]。臨床上紫杉醇注射液主要用于卵巢癌、乳腺癌、非小細(xì)胞肺癌等癌癥的治療[4， 5]。藥物含量是評(píng)價(jià)藥品質(zhì)量的重要指標(biāo)之一， 為保證紫杉醇注射液的質(zhì)量， 實(shí)現(xiàn)臨床用藥安全可靠， 作者嘗試建立高效液相色譜法（HPLC）測(cè)定其含量。該方法準(zhǔn)確， 重復(fù)性好， 專(zhuān)屬性強(qiáng)， 與中國(guó)藥典2010年版收錄的紫杉醇含量測(cè)定方法相比較， 具有簡(jiǎn)便、快速的優(yōu)點(diǎn)。

1 儀器與試藥

島津LC-15C高效液相色譜儀；島津SPD-15C Essentia uv/vis檢測(cè)器；島津工作站LC-solution；AR 1140 型電子天平（梅特勒·托利多儀器有限公司）；KQ3200E 型超聲波清洗器（昆山市超聲儀器有限公司）；AUW 120D 型電子天平（日本島津公司）。

紫杉醇對(duì)照品（許昌恒生藥業(yè)有限公司提供， 純度>99.9%， 批號(hào)為A0177）；紫杉醇注射液（購(gòu)于江蘇紅豆衫藥業(yè)有限公司， 規(guī)格5 ml/30 mg， 批號(hào)分別為20130801， 20130805， 20130809）；甲醇（色譜純）（天津市四友精細(xì)化學(xué)品有限公司）；乙腈（色譜純）（天津市四友精細(xì)化學(xué)品有限公司）；其它試劑均為分析純， 水為超純水。

2 方法與結(jié)果

2. 1 色譜條件 色譜柱：Hypersil BDS C18（4.6 mm×250 mm， 5 μm）， 檢測(cè)波長(zhǎng)227 nm， 柱溫35℃， 流速為1.0 ml/min， 進(jìn)樣量為20 μl， 流動(dòng)相為甲醇-乙腈-水（45：30：25， v/v）。

2. 2 對(duì)照品溶液的配制 精密稱(chēng)取紫杉醇對(duì)照品適量， 置于10 ml容量瓶中， 加乙醇稀釋并定容至刻度， 搖勻， 得濃度為500 mg·L-1對(duì)照品貯備液。

2. 3 樣品溶液的制備 分別取批號(hào)為20130801， 20130805， 20130809的3批紫杉醇注射液適量， （相當(dāng)于紫杉醇6 mg）置于100 ml容量瓶中， 加乙醇稀釋并定容至刻度， 搖勻即得。

2. 4 專(zhuān)屬性試驗(yàn) 紫杉醇對(duì)照品（A）和樣品中紫杉醇的HPLC圖（B）， 見(jiàn)圖1。

圖1 對(duì)照品（A）及樣品（B）

2. 5 線性關(guān)系考察 精密量取“2.2”項(xiàng)下對(duì)照品溶液0.2、0.4、1.0、2.0、2.5 ml， 分別置于10 ml容量瓶中， 用乙醇稀釋并定容至刻度， 搖勻， 得到對(duì)照品濃度分別為10、20、50、100、125 mg·L-1的溶液；進(jìn)樣， 記錄峰面積值。以對(duì)照品濃度（X）為橫坐標(biāo)， 對(duì)照品峰面積（Y）為縱坐標(biāo)， 進(jìn)行線性回歸， 得回歸方程：Y=40555X-34526， R2=0.9999。由此可知紫杉醇含量在10～125 mg·L-1時(shí)線性關(guān)系良好。

2. 6 精密度試驗(yàn) 取“2.2”項(xiàng)下對(duì)照品溶液， 按“2.1”項(xiàng)下色譜條件連續(xù)進(jìn)樣6次， 其峰面積的RSD為0.17%（n=5）。

2. 7 穩(wěn)定性試驗(yàn) 取“2.3”項(xiàng)下樣品溶液（批號(hào)：20130805）在室溫避光下放置， 分別于0、2、4、6、8、12 h時(shí)， 在儀器不關(guān)閉狀態(tài)下測(cè)定不同時(shí)間內(nèi)的含量。結(jié)果， 樣品含量的RSD為0.26%（n=6）， 表明樣品溶液在12 h內(nèi)穩(wěn)定性好。

2. 8 加樣回收率試驗(yàn) 精密量取已知含量批號(hào)為20130805的紫杉醇注射液適量（相當(dāng)于紫杉醇3 mg）， 分別精密加入紫杉醇對(duì)照品適量， 置于100 ml容量瓶中， 用乙醇稀釋并定容至刻度， 搖勻， 按“2.1”項(xiàng)下實(shí)驗(yàn)條件進(jìn)樣， 結(jié)果見(jiàn)表1。

2. 9 樣品含量測(cè)定 將3批樣品溶液分別按“2.1”項(xiàng)下實(shí)驗(yàn)條件進(jìn)樣， 結(jié)果見(jiàn)表2。

2. 10 有關(guān)物質(zhì)檢查 采用不加校正因子的主成分自身對(duì)照法。精密稱(chēng)取紫杉醇適量， 置10 ml 容量瓶中， 加乙醇稀釋并定容至刻度， 搖勻， 制成200 mg·L-1的溶液作為供試品溶液；取供試品溶液1 ml置10 ml 容量瓶中， 加流動(dòng)相稀釋至刻度， 作為對(duì)照溶液。取對(duì)照溶液20 μl進(jìn)樣， 調(diào)節(jié)檢測(cè)靈敏度， 使主峰高達(dá)到記錄儀滿量程的10%左右， 再取供試品溶液進(jìn)樣20 μl， 記錄色譜圖至主成分峰保留時(shí)間的2倍。扣除溶劑峰和輔料峰， 量取色譜圖上紫杉醇色譜峰外各雜質(zhì)的峰面積總和， 并與對(duì)照溶液主成分的峰面積比較， 計(jì)算雜質(zhì)含量。結(jié)果見(jiàn)表2， 3批樣品中有關(guān)物質(zhì)均<1.2%。

3 討論

應(yīng)用紫外分光光度計(jì)對(duì)紫杉醇在190～400 nm范圍內(nèi)掃描， 結(jié)果顯示紫杉醇在227 nm處有較強(qiáng)吸收。作者采用227 nm作為該分析方法的檢測(cè)波長(zhǎng)， 可獲得較高靈敏度， 基線平穩(wěn)， 良好的峰形。

為了得到一個(gè)良好的分析效果， 作者在試驗(yàn)中對(duì)流動(dòng)相進(jìn)行了優(yōu)化。試驗(yàn)分別考察了甲醇-水系統(tǒng)、乙腈-水系統(tǒng)、甲醇-乙腈-水系統(tǒng)， 結(jié)果發(fā)現(xiàn)以甲醇-乙腈-水系統(tǒng)為流動(dòng)相， 在選定的檢測(cè)波長(zhǎng)條件下， 基線穩(wěn)定， 能夠得到良好的峰形， 最終確定流動(dòng)相為甲醇-乙腈-水（45：30：25， v/v）為該分析方法的流動(dòng)相?？傊?， 本方法操作簡(jiǎn)便、準(zhǔn)確度高、重現(xiàn)性好， 可用于紫杉醇含量的測(cè)定與質(zhì)量控制。

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