呂為群 程若冰 蘭兆輝

(上海海洋大學省部共建水產種質資源發(fā)掘與利用教育部重點實驗室, 上海 201306)

電生理技術在魚類尾部神經分泌系統(tǒng)研究中的應用

呂為群 程若冰 蘭兆輝

(上海海洋大學省部共建水產種質資源發(fā)掘與利用教育部重點實驗室, 上海 201306)

200多年前, Galvani通過神經-肌肉興奮性實驗發(fā)現了神經系統(tǒng)與電活動在功能上具有本質的聯系[1,2]。此后,眾多研究者投入了大量的精力研發(fā)電生理設備, 逐步開發(fā)出多種能夠精確測量和控制神經元電活動的儀器, 如:放大器、示波器、刺激器、數模/模數轉換器、微電極等?，F代電生理設備和技術的更新換代為研究單離子通道電流甚至更為復雜的神經元網絡電特性創(chuàng)造了條件[3]。隨著近代電子技術水平和分子生物學的飛速發(fā)展, 電生理技術已成為研究魚類生理功能、行為特征、環(huán)境適應性的一種有效的技術和方法。尾部神經分泌系統(tǒng)(CNSS)是魚類特有的神經分泌系統(tǒng), 在維持魚類體內滲透壓的平衡、內環(huán)境穩(wěn)定及生殖調控等方面發(fā)揮著至關重要的作用[4]。本文主要圍繞電生理技術的發(fā)展和原理及其在研究 CNSS功能和 Dahlgren細胞電生理特性等方面的應用, 綜述了國內外的研究成果和進展。

1 電生理技術

電生理技術用于記錄生物細胞和組織的電學特性,可測量從單離子通道蛋白到整個器官的多種規(guī)格樣本的電壓或電流變化, 研究不同神經組織的自發(fā)和誘發(fā)電活動與代謝的關系。該技術最初主要用于神經系統(tǒng)的研究,即用電流刺激神經系統(tǒng)某一部位, 記錄該部位或單個神經元的電位變化。電生理學研究方法在神經生物學研究應用中優(yōu)點頗多: 對被測樣本損害小; 測量精度高; 重復性強; 實驗方式多樣化, 可針對不同的研究需要采取不同記錄方式; 可以對神經系統(tǒng)功能活動進行定量分析; 便于和其他研究方法配合使用等[3,5,6]。電生理技術發(fā)展至今, 演化出了適合各種不同研究的記錄方式, 如: 胞外記錄(單細胞記錄、多細胞記錄)、胞內記錄(電壓鉗、電流鉗)、膜片鉗記錄等。

1.1 電生理技術的發(fā)展

人類對于生物電現象的記錄可以追溯到 2000多年前。據記載, 古埃及尼羅河中有一種鯰魚(Phractocephalus hemioliopterus)可產生高達350V的電壓脈沖[7]。羅馬帝王Claudius時代(公元41—54年)的Scribonius Largus曾詳細描述人們利用電鰩治療頭痛病[8]。1791年, Galvani首次報道用金屬弓觸碰蛙腿肌肉或刺激神經時看到了肌肉的收縮, 提出了動物電的概念, 奠定了現代電生理學的基礎[1,2]。1849年Du Bois-Reymond發(fā)現了生物電的兩種基本形式: 靜息電位和動作電位, 使電生理學開始成為一門獨立的學科[5]。20世紀中葉, Hodgkin, et al.成功證明了電興奮現象和動作電位的產生是緣于特定的離子電導變化, 基于此, Cole, et al.發(fā)明了電壓鉗技術, 后經Hodgkin, et al.改進[9,10]。1976年Neher和Sakmann創(chuàng)建的膜片鉗技術為電生理學和細胞生物學的發(fā)展乃至整個生物學研究帶來了一場革命, 人類對離子通道本質的認識也因此有了一個質的飛躍[5—7]。

1.2 常用電生理技術

細胞外記錄 細胞外記錄是電生理技術常用的記錄方式之一, 其方便之處在于記錄電極不需要插入細胞,可用一根電極記錄單細胞或同時記錄多個細胞的電活動。由于活動部位的神經元產生去極化, 不活動部位的處于正常極化狀態(tài), 在容積導體中的兩部位間電位不同, 電流從一點流向另一點, 兩點間的電位差就會被記錄電極探測到。胞外記錄受樣本限制少, 記錄到的電活動穩(wěn)定性好, 可用于長時間電位誘導和記錄, 并能同時從不同的神經結構進行多導電位記錄。通過不斷地改進與發(fā)展, 該方法由僅限于固定、半固定動物上的應用, 逐漸發(fā)展應用于自由活動的動物[5,7,11]。

細胞內記錄 1939年, Hodgkin, et al.將毛細玻璃微電極從槍烏賊巨軸突切口縱向插入巨軸突內, 首次實現了靜息電位和動作電位的細胞內記錄[12]。記錄膜電位需要在膜的兩側各放置一個電極形成一個環(huán)路, 因此記錄電極要插入細胞膜內, 這種記錄方法即為電生理細胞內記錄。細胞內記錄可以準確測量靜息膜電位的絕對值,還能測定興奮性突觸后電位、抑制性突觸后電位及動作電位。細胞內記錄技術的發(fā)明, 使得研究個別單一的神經細胞的活動機理、神經元膜的生理物理特性以及個別神經元在神經回路中的位置和作用成為可能[5,13]。

膜片鉗技術 膜片鉗技術屬于現代微電極技術,是傳統(tǒng)微電極技術的重大進步。通常采用尖端經過加熱拋光的玻璃微電極吸管與細胞膜發(fā)生緊密接觸, 在吸管內施加負壓, 使微電極尖端與細胞膜表面形成 G?級(10—100 G?)的高阻封接(Giga-seal)從而記錄穿過細胞膜的微弱的電流變化。膜片鉗技術共有四種基本記錄模式: 細胞貼附式(Cell-attached recording)、內面向外記錄模式(Inside-out recording)、外面向外記錄模式(Outside-out recording)以及全細胞記錄模式(Whole-cell recording)[14—16]。該技術可用來記錄反應細胞膜上離子通道分子活動的離子電流, 并能與其他生物學方法結合進行多領域研究。隨著膜片鉗技術的不斷發(fā)展, 研究對象也逐漸擴展到離子泵、交換體以及可興奮細胞的胞吞、胞吐機制等方面[6]。

2 CNSS及Dahlgren細胞

2.1 CNSS的形態(tài)結構

1914年美國學者Dahlgren首次報道在魚類脊髓末端發(fā)現有一種不同尋常的具有腺細胞形態(tài)特征的巨大細胞,這些巨大細胞后來被命名為 Dahlgren細胞。作為魚類所特有的神經分泌系統(tǒng), CNSS在維持魚體內的滲透壓平衡及生殖調控等方便發(fā)揮著至關重要的作用。CNSS由位于尾部脊髓中具有神經內分泌功能的 Dahlgren細胞、Dahlgren細胞向尾端發(fā)出的軸突以及富含軸突末梢和毛細血管網的尾垂體三部分組成[4,17—19]。Dahlgren細胞為大型神經分泌細胞, 分泌物通過軸突運送到尾垂體, 再由尾垂體直接分泌進入尾靜脈, 這樣可以使這些分泌物迅速抵達靶器官—腎、腸、性腺和肝臟[4], 這恰好便于研究者隨時間推移測定分泌差異[20]。此外, CNSS作為研究神經分泌機制的良好系統(tǒng)模型, 優(yōu)勢在于體內和體外都能對其進行研究, 麻醉魚體的CNSS可完全裸露出來, 便于標記[21, 22]。

2.2 Dahlgren細胞形態(tài)、位置、大小

Dahgren細胞是存在于魚類CNSS中的大型神經分泌細胞, 通常位于脊髓末端的 1—8節(jié), 其主要分泌物有尾加壓素I(UI)、尾加壓素II(UII)、促腎上腺皮質激素釋放激素(CRH)、甲狀旁腺激素相關蛋白(PTHrP)等, 這些神經肽能夠調節(jié)體內滲透壓和離子平衡[4,17]。Onstott和 Elde發(fā)現UI肽和UII肽集中在軸突膨大部位—尾垂體, 這里是存儲分泌物的部位, 隨后這些分泌物進入循環(huán)[23]。Dahlgren細胞是一種多突起的細胞, 其形態(tài)和大小通常是變化的, 而且在不同種類的魚中各不相同。細胞體的形狀有很多種, 如圓形、橢圓形、梭型或不規(guī)則型。細胞核通常很大, 核中有明顯的核仁。在充滿分泌物的細胞中,大多數只有一個核, 但在缺乏分泌物的細胞中則可觀察到雙核、三核等多核現象[24]。

3 電生理技術在CNSS研究中的應用

魚類尾部神經分泌系統(tǒng)中的 Dahlgren細胞能夠自發(fā)產生特征性的動作電位, 從而影響神經肽的分泌, 隨著魚體內滲透壓的變化, Dahlgren細胞的動作電位發(fā)放模式也會隨之作出相應的改變[25]。Brierley對Dahlgren細胞幾種放電模式進行了定義: 暴發(fā)型(Burst): 由大于20s的不連續(xù)暴發(fā)型動作電位構成, 每次暴發(fā)之間有大于20s靜息態(tài)間隔; 位相型(Phasic): 表現出不規(guī)則的動作電位發(fā)放,包括周期性的高頻(1—3 Hz)和低頻放電(＜1 Hz); 緊張型(Tonic): 由連續(xù)的動作電位(約1 Hz)構成, 中間只有很少或幾乎沒有間隔[26]。根據電生理特性的不同, Dahlgren細胞可分為T1型和T2型兩種, T1型細胞表現較為活躍, 常會產生特征性的暴發(fā)放電, 而T2型Dahlgren細胞則相對安靜且興奮性較低, 在輸入去極化電流后只能誘發(fā)單個的動作電位, 這說明T2細胞對于峰頻具有很強的適應能力[27]。

3.1 Dahlgren細胞burst發(fā)放的研究

能夠產生長時間高頻率的暴發(fā)(Burst)型放電是脊椎動物和無脊椎動物神經分泌細胞的的共同特征, 如哺乳動物下丘腦神經元[28]、胰腺 β細胞[29]、巴西利亞海兔(Aplysia brasiliana)R15神經元[30]。暴發(fā)放電會提高神經肽的分泌率, 隨著放電頻率的增高, 軸突末端神經肽的分泌量也隨之增加[31]。Brierley, et al. 用高敏微電極和玻璃吸電極分別對單個Dahlgren細胞和Dahlgren細胞群進行研究, 從而對 Dahlgren細胞產生的電活動模式及細胞膜固有的性質有了很好的了解。離體和在體情況下許多Dahlgren細胞都表現活躍, 且這兩種情況下 Dahlgren細胞的動作電位發(fā)放模式也非常相似。Dahlgren細胞暴發(fā)放電的產生機制與已報道的哺乳動物神經元細胞類似, 如垂體后葉荷爾蒙神經元[32,33]。在歐洲川鰈Dahlgren細胞中, 暴發(fā)放電的產生基于膜本身的性質, 一次長時間的暴發(fā)放電能夠由短暫的(小于 5s)去極化或超級化電流刺激所激發(fā), 而隨后的后去極化電位(ADP)刺激能夠維持長達200s的暴發(fā)放電。ADP的產生與一種凹電位(sag電位)相關, sag電位是在膜電位為–50mv的情況下, 注入500ms的超級化電流導致的下凹型超級化應答, 由某些離子通道產生的內向電流激活。而ADP和sag都是電壓依賴性的, 只有膜電位大于–60mv的情況下才能出現, 并且當膜電位接近–50mv時, 能夠激發(fā)動作電位, 所以暴發(fā)放電只能產生于去極化狀態(tài)的細胞[34]。

藥理學研究表明ADP的產生依賴于L型Ca2+通道[17]。當缺乏外部鈣離子或者存在 L型 Ca2+通道阻斷劑nifedipine(硝苯吡啶)時, ADP的持續(xù)時間會明顯減少。BayK 8644(能夠增加L型離子通道開放時間)會顯著增加ADP持續(xù)時間, 但 Ca2+激活非選擇性陽離子通道阻斷劑flufenamic acid(氟滅酸)對ADP的持續(xù)時間沒有效果。用apamin(蜜蜂神經毒素)和 charybdotoxin(卡律布德蝎毒素)對Ca2+激活K+通道抑制, 會增加ADP和暴發(fā)放電的持續(xù)時間。然而, 動作電位的波形卻不會受到 apamin/charybdotoxin, nifedipine,BayK 8644以及移除外部Ca2+的影響。在一次暴發(fā)放電過程中, 動作電位的發(fā)放由短持續(xù)時間(小于100ms)的去極化后電位(DAP)維持, DAP同樣具有電壓和L型Ca2+通道依賴性。這些動作電位的發(fā)放是電壓依賴性的, 當細胞膜逐漸去極化, 細胞從靜息態(tài)(約–70mv)轉為暴發(fā)型和位相型, 最后轉為緊張型(小于–65mv)。持續(xù)10s的暴發(fā)放電之后伴隨著一個緩慢的 ADP(振幅為 10mv,持續(xù) 10—200s), 并且能夠激發(fā)一個持續(xù)時間更長的暴發(fā)放電[34]。

3.2 環(huán)境鹽度變化對Dahlgren細胞放電的影響

鹽度是影響海水魚類生長的重要環(huán)境因素之一, 而滲透壓調節(jié)是魚類鹽度適應性的關鍵功能。應用膜片鉗技術研究發(fā)現, 參與魚類滲透壓調節(jié)的主要是直腸腺、鰓和腎等器官上的各種離子通道, 這些通道參與了魚體內NaCl 的動態(tài)平衡和水分代謝的調節(jié)作用[14]。川鰈Dahlgren細胞的特征性的動作電位發(fā)放會伴隨著魚體內滲透壓的變化而改變。與適應淡水(FWA)的川鰈相比, 適應海水(SWA)的川鰈離體CNSS標本中Dahlgren細胞暴發(fā)放電更為活躍。同樣的, CNSS在體實驗顯示, SWA川鰈中有更高比例的 Dahlgren細胞產生暴發(fā)型動作電位, 說明CNSS同樣在魚類滲透壓調節(jié)適應中起到關鍵作用[21,26]。在SWA和FWA標本中, T1 Dahlgren細胞的后超級化電位(AHP)持續(xù)時間約為 T2細胞的 5倍, 而 SWA標本中T1、T2型 Dahlgren細胞動作電位的持續(xù)時間明顯大于FWA標本。SWA 標本中T1型細胞在超級化電流刺激下會產生sag電位, 而FWA標本sag電位的產生具有電壓依賴性, 只有當膜電位大于–50mv時, 超級化電流才能激發(fā)明顯的sag電位。T1、T2型Dahlgren細胞在SWA和FWA標本中的膜參數(靜息膜電位、輸入阻抗)和動作電位參數(閾值、振幅、持續(xù)時間等)均無明顯區(qū)別。Dahlgren細胞的放電模式會隨著外部鹽度環(huán)境的變化, 在不同放電模式間轉換[26]。

3.3 神經內分泌物質對Dahlgren細胞放電調控的研究

CNSS會受到來自后腦的下行輸入調控[35], 免疫組化和生物化學研究表明有腎上腺素、血清素、泌乳刺激素以及膽堿能和肽能等神經內分泌物質輸入到CNSS中[36—38]。電生理研究發(fā)現, 這些神經調質能夠促進或抑制Dahlgren細胞的放電, 并會改變動作電位發(fā)放的類型[26,39]。Dahlgren細胞放電類型的不同或者暴發(fā)放電的持續(xù)時間長短和強度大小都會在很大程度上影響神經肽的分泌。例如, 臨產和泌乳時, 下丘腦催產素神經元同時產生高頻率暴發(fā)動作電位會脈沖式地釋放神經肽, 高頻率暴發(fā)放電能提高神經末梢肽的分泌效率, 如細胞群同時產生暴發(fā)放電會分泌高濃度的神經肽。與催產素神經元的染色耦合不同,盡管目前還沒有證據表明 Dahlgren細胞之間存在直接連接或突觸連接, 但這些 Dahlgren細胞動作電位的協同發(fā)放可能會隨著魚類滲透壓水平改變[40]。

一氧化氮(NO) 在神經系統(tǒng)中, NO作為一種重要的信使分子參與了學習與記憶等重要的神經生理活動,同時對腦部血流具有調節(jié)作用, 并參與神經系統(tǒng)的免疫防御[41]。已有報道表明 NO在哺乳動物下丘腦大型神經分泌細胞中起到神經調控的作用。在魚類多個神經系統(tǒng)中檢測到NOS(一氧化氮合酶)的存在, 如腦電機系統(tǒng)[42]、視網膜[43]、視前區(qū)-下丘腦-垂體系統(tǒng)[44]以及CNSS[45]。在離體CNSS標本藥理學實驗中發(fā)現, NO供體(SNAP, SNP)會增加Dahlgren細胞動作電位發(fā)放頻率(包括之前處于靜息態(tài)的細胞), 大部分Dahlgren細胞表現出位相型(phasic)動作電位。NOS(一氧化氮合酶)底物L-arginine(左旋精氨酸)會導致放電頻率的增加, 激活靜息態(tài) Dahlgren細胞放電并增強暴發(fā)放電。這些不會受到NOS抑制劑L-NAME(L-硝基精氨酸甲酯)的阻斷, 放電頻率反而會隨著 L-NAME的作用而提高?？梢奛O在CNSS中起到調控作用, 能夠有效提高Dahlgren細胞電活動及神經肽的分泌[40]。

皮質醇 皮質醇作為廣鹽性魚類適應鹽度環(huán)境的一種重要激素, 能夠激發(fā)魚鰓氯化物分泌細胞的增殖,從而促進氯離子排放, 使魚能夠適應海水環(huán)境; 皮質醇同樣可以通過調節(jié)氯化物分泌細胞的功能使魚類適應淡水環(huán)境[46]。Marley, et al.對皮質醇調節(jié)Dahlgren細胞放電作用的研究顯示, 在對離體 CNSS標本進行皮質醇灌流(15min)期間, Dahlgren細胞的電活動沒有變化, 而經過4h的Ringer液沖洗后細胞才逐漸出現電生理應答, 這種應答延遲產生的原因可能是由于激活基因組應答需要時間。應答期間細胞電活性適度增強, 細胞放電模式沒有顯著變化, 但表現出激活靜息態(tài) Dahlgren細胞并增加暴發(fā)型細胞數量的趨勢[47]。

泌乳刺激素 泌乳刺激素能夠促使魚鰓氯化物分泌細胞去分化[46], 并降低滲透調節(jié)表面離子和水的通透率,從而使魚類在低滲環(huán)境中能夠存活[48]。Marley, et al.對離體CNSS標本進行泌乳刺激素灌流, 實驗結果顯示 Dahlgren細胞對于泌乳刺激素的應答延時較短, 在藥物灌流及4h的Ringer液沖洗期間內細胞放電頻率均有所增加, Dahlgren細胞的動作電位發(fā)放模式也發(fā)生了改變, 部分靜息態(tài)細胞被激活, 位相型和暴發(fā)型細胞數量有所增加[47]。

5-羥色胺 5-羥色胺(5-HT)出現在CNSS的中央神經元部分[49], 免疫組化結果顯示 Dahlgren細胞受到下行5-HT神經纖維的支配。Hubbard, et al.發(fā)現, 對離體CNSS標本灌流5-HT會引發(fā)T1型Dahlgren細胞的靜息膜電位產生濃度依賴性的可逆超級化(5-HT濃度越高, 超級化越明顯), 細胞膜的輸入阻抗和時間常數也會隨著細胞膜的超級化而減小。在胞內記錄點附近注射5-HT會立即中斷自發(fā)性的暴發(fā)放電; 同樣, 在細胞外記錄時, 灌流 5-HT會中斷所有記錄細胞的暴發(fā)放電, 停止灌流后15 min暴發(fā)放電恢復, 這表明5-HT對于CNSS活性具有抑制作用。灌流更低濃度的 5-HT1受體激動劑 5-carboxamidotryptamine(5-CT)同樣會產生上述效果。然而, T2型細胞對于5-HT或5-CT均未產生電生理應答, 說明T1、T2型細胞之間存在著功能上的差別[50]。

乙酰膽堿 Conlon, et al.在鮭魚CNSS標本中證實了有乙酰膽堿的分泌, 并發(fā)現隨著細胞膜的去極化, 乙酰膽堿分泌量明顯增加[51]。Brierley, et al.發(fā)現川鰈T1型Dahlgren細胞的一個亞群會受到乙酰膽堿的刺激而興奮,乙酰膽堿是迄今為止發(fā)現的唯一能使這些神經元細胞產生去極化的神經遞質[26]。已有研究表明哺乳動物垂體后葉荷爾蒙神經元會受到乙酰膽堿受體激動劑 Oxotremorine (氧化震顫素)和 Nicotine (尼古丁)的調節(jié)[52,53]。oxotremorine會在很大程度上抑制Dahlgren細胞放電, 并增加一種非Dahlgren細胞(α神經元)的電活性。分別對海水和淡水適應性川鰈 CNSS標本進行藥物灌流, 發(fā)現Nicotine能夠誘發(fā)SWA Dahlgren細胞產生暴發(fā)放電(對正在暴發(fā)放電的細胞無影響), 卻會抑制FWA Dahlgren細胞的放電[26]。

類腎上腺素 Hubbard, et al.發(fā)現對川鰈CNSS標本灌流腎上腺素或去甲腎上腺素會使 Dahlgren細胞靜息膜電位產生具有濃度依賴性的可逆大振幅超級化, 并可使Dahlgren細胞的自發(fā)性放電立即中止[50]。超級化會抑制去甲腎上腺素能神經元活性, 從而降低激素的分泌速率。輸入阻抗和膜時間常數的波動表明有多種細胞機制受到了超級化的影響, 如細胞膜表面選擇性離子通道的開放和關閉。灌流另一種內生性兒茶酚胺dopamine(多巴胺)沒有效果, 說明兒茶酚胺誘發(fā)的超級化只能通過腎上腺素受體調節(jié), 而多巴胺受體沒有參與。灌流β腎上腺素受體激動劑 isoprenaline(異丙腎上腺素)也會激發(fā)超級化(低于腎上腺素或去甲腎上腺素激發(fā)的超級化的最大值), 表明 β腎上腺素受體亞形具有一定的調節(jié)效果。灌流具有膜通透性的非水解 cAMP類似物 8-[4-chlorophenylthio]-cAMP則會引發(fā)一個小振幅的超極化, 并伴有小幅度膜電阻的增加, 說明 β腎上腺素受體在一定程度上能控制cAMP敏感性離子通道關閉[39]。已有報道表明α1腎上腺素受體激動劑 phenylephrine(苯腎上腺素)能夠增加哺乳動物視上核垂體后葉荷爾蒙神經元的放電頻率[54], 而 α2腎上腺素受體激動劑 clonidine(氯壓定)則對視上核神經分泌細胞起抑制作用[55]。Hubbard, et al.對Dahlgren細胞灌流 phenylephrine發(fā)現電生理參數沒有變化, 而灌流clonidine則會引發(fā)超級化(低于腎上腺素或去甲腎上腺素激發(fā)的超級化的最大值)。這些結果表明腎上腺素抑制Dahlgren細胞的活動會受到α2和β腎上腺素受體亞形的調節(jié)[39]。

4 總結與展望

電生理技術已滲透到生物學的各個領域, 成為生物學研究的一種重要技術手段。將該技術與分子生物學、免疫學、行為學等領域相結合, 能夠從細胞和分子水平揭示生命活動的內在機理及其與環(huán)境的相互作用。雖然已對Dahlgren細胞基本的電學特性進行了報道, 但往往局限于電活性較強的T1型細胞, 且主要集中在鹽度應激、神經調質刺激等條件下T1細胞放電的變化, 而對于相對活性較低的T2型Dahlgren細胞的電生理特點、興奮性較低的原因及其在神經內分泌調控中的作用有待進一步研究。隨著現代電生理技術的不斷發(fā)展, 魚類應對其他應激條件刺激時 Dahlgren細胞的放電變化、更多種類的神經調質對于Dahlgren細胞放電影響以及對于Dahlgren細胞膜上各種離子通道的開關機制、功能特點及離子的跨膜流動等方面的研究必將更加深入。

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THE APPLICATION OF ELECTROPHYSIOLOGICAL TECHNIQUES IN THE STUDY ON THE FISH CAUDAL NEUROSECRETORY SYSTEM

Lü Wei-Qun, CHENG Ruo-Bing and LAN Zhao-Hui
(Key Laboratory of Exploration and Utilization of Aquatic Genetic Resources, Shanghai Ocean University, Ministry of Education, Shanghai 201306, China)

電生理技術; 尾部神經分泌系統(tǒng); Dahlgren細胞; 動作電位

Electrophysiological techniques; Caudal neurosecretory system (CNSS); Dahlgren cell; Action potential

S917

A

1000-3207(2014)04-0780-06

10.7541/2014.109

2013-06-18;

2013-12-20

國家自然科學基金(31072228、41376134); 高等學校博士學科點基金(20113104110002); 上海市科學技術委員會項目(11PJ1404500); 上海高校水產學一流學科建設項目資助

呂為群, 教授, 博士生導師; 研究方向為適應生理學, E-mail: wqlv@shou.edu.cn