李 飛

(鶴壁市衛(wèi)生監(jiān)督局，河南 鶴壁458030)

培養(yǎng)基是生物實驗中一種為微生物、植物及動物組織提供生存及生長的人工配制養(yǎng)料。養(yǎng)料中含有多種生物所需的水、維生素、碳水化合物、含氮物質以及微量元素等。同時也有專用的培養(yǎng)基，其中含有特定抗生素及色素，是專門用于某些單種微生物培養(yǎng)及鑒定。然而隨著近年來生物科學技術的突飛猛進，生物實驗及微生物檢驗中所需的培養(yǎng)基逐漸呈現(xiàn)出越來越廣泛的運用趨勢，而隨之培養(yǎng)基生產廠商在市面上也不斷增多［1］。規(guī)?；a的培養(yǎng)基雖然為微生物檢驗提供了極大的方便，但據市場調查及研究結果顯示，市場化生產的培養(yǎng)基存在有制作工藝、生產質量等還未達到規(guī)范化指標，整體水平有待提高。而培養(yǎng)基的質量是微生物實驗室檢驗結果的保障，同時也是微生物實驗室質量控制的重要環(huán)節(jié)之一。筆者就商品培養(yǎng)基和自制培養(yǎng)基從其采購、制備、滅菌、儲存及性能測試和人員素質等方面所應采用的質量控制方法作一簡要的闡述。

1 培養(yǎng)基的采購及驗收

1.1 培養(yǎng)基的采購 如今市面上的培養(yǎng)基生產廠家很多，但其產品質量均存在一定的差異。因此在進行實驗室微生物培養(yǎng)基的采購方面，需要嚴格控制其采購質量。首先應盡量選擇通過ISO9001 或其他國家認可的質量認證體系的商家，其次實驗室采購者必須讓生產企業(yè)提供培養(yǎng)基名稱、獨立成分、添加成分、有效期、性能評價、所用的測試菌株、技術數(shù)據清單、質控證書以及必要的安全危害數(shù)據等，以利于使用者對產品進行記錄和比較驗收［2］。市場信譽度高并且質量確實經得住實踐考驗的供貨商可以考慮并且長期合作，以利于培養(yǎng)基的一致性和穩(wěn)定性。

1.2 培養(yǎng)基的驗收 包含了對采購完成后培養(yǎng)基進行的各項檢驗工作，微生物實驗室收到培養(yǎng)基后應有專人負責做好培養(yǎng)基的接收與驗收工作。并且負責制作培養(yǎng)基的入庫記錄，內容應詳細記錄生產商家、培養(yǎng)基的名稱、接收日期、批號、有效期、包裝及其完整性。即使是長期合作的供應商也應該認真完成以上手續(xù)，一旦發(fā)現(xiàn)采購后的培養(yǎng)基任何一項有差異及問題，一律歸為驗收不合格，并且不得使用。

2 培養(yǎng)基的制備

2.1 培養(yǎng)基的配制 配制培養(yǎng)基要按照嚴格、科學的流程進行，依據處方進行認真操作，并且將操作流程記錄下來。應考慮到培養(yǎng)基處方需要的生物制品種類繁多，而不同的廠家、批次、日期都會造成產品質量存在差異，所以在配制過程中一定要注意原料成分之間的差異性，做好嚴格的質量控制工作。同時記錄不同成分的具體情況，從而方便查詢和檢驗。自制培養(yǎng)基過程中應嚴格按照培養(yǎng)要求和順序放入成分，確保滅菌有效及成分均勻，最大程度避免出現(xiàn)成分間互斥以及分布不均的情況。

2.2 培養(yǎng)基的稱量 稱量培養(yǎng)基時避免使用手或其他非專用工具進行操作，要使用專門稱量培養(yǎng)基的角匙，從而降低發(fā)生交叉污染的概率，保證檢驗結果的準確性。特別值得注意的是在稱量選擇性培養(yǎng)基時要觀察是否有粉末吸入現(xiàn)象，同時還要考慮到實驗環(huán)境的濕度問題，濕度高的空間會讓培養(yǎng)基吸潮，導致pH 升高，性狀發(fā)生改變，在條件允許的情況下盡量選擇干燥度較高的房間進行稱?。?］。而對干粉培養(yǎng)基的配置要符合生產標準和要求。

2.3 培養(yǎng)基的溶解 溶解培養(yǎng)基是分裝滅菌前的重要步驟，要保證不同組分能夠均勻溶解和分布，通常采取水浴加熱溶解的方式。而對于含有瓊脂粉末的培養(yǎng)基可以先進行浸泡處理然后再加熱溶解，這樣有助于加快溶解的過程。一旦將培養(yǎng)基放入電爐內就應用小火加熱煮沸，同時利用攪拌來防止爆沸和焦化，如果培養(yǎng)基燒糊就極有可能產生有毒物質，對操作人員和環(huán)境造成威脅，因此一旦發(fā)現(xiàn)焦化或爆沸培養(yǎng)基就要安全處理掉。

3 培養(yǎng)基的滅菌和儲存

3.1 培養(yǎng)基的滅菌 通常針對培養(yǎng)基的滅菌一般采取高壓蒸汽滅菌法，在121.3 ℃持續(xù)15 min，如果廠家定制了特殊或含有糖分的培養(yǎng)基，則需要按照說明流程進行專門滅菌。培養(yǎng)基配制完成后要就應該馬上進行滅菌，在滅菌過程中要特別注意操作的完整性、科學性，同時標注好時間和名稱，避免出錯。

3.2 培養(yǎng)基的儲存 商品化規(guī)格的培養(yǎng)基和干粉培養(yǎng)基要按照其說明書標識的存放環(huán)境要求進行存放。通常放于干燥陰涼避光處，有效期一般為2 a。一旦開封應注意防潮，盡快用完。檢驗人員還要對各類培養(yǎng)基做定期排查，并詳細登記，避免其超過有效期。發(fā)現(xiàn)有硬化結塊，過期變色現(xiàn)象應及時廢棄。

4 培養(yǎng)基的性能測試

當經過上述步驟制備好的培養(yǎng)基會顯現(xiàn)出不同的顏色及質感。因此對培養(yǎng)基的性能測定可以根據其顏色、形態(tài)、質感及檢驗經驗來做初步判定，完整的培養(yǎng)基應該是顏色清晰，質感明顯，沒有脫水、渾濁及沉淀等現(xiàn)象?；A培養(yǎng)基不僅要求細菌能夠生長，還必須發(fā)育良好并能使細菌充分表現(xiàn)出其典型的特征，如典型菌落形態(tài)、溶血特征等。選擇性培養(yǎng)基應分別選擇1 株可生長、1 株可抑制的菌株進行接種培養(yǎng)，鑒別培養(yǎng)基應選擇已知陽性和陰性菌接種分別培養(yǎng)，以證實應有的生化反應能力。

5 提高檢驗人員的水平素質

通過以上環(huán)節(jié)可以有效地提高培養(yǎng)基的質量，但人為因素也是影響實驗室微生物檢驗的重要因素之一。微生物檢測是一項要求高、分化細的工作，只有綜合素質強、專業(yè)技術硬的技術人員才能勝任和做好。為了有效地做好微生物檢驗中培養(yǎng)基的質量控制，要嚴格篩選操作人員，要求其擁有扎實的微生物檢驗基礎和能力，能良好地判斷和處理各種檢驗情況，對工作有責任心。為了不斷提高檢驗人員的素質和能力，要定期或不定期組織檢驗人員進行專業(yè)培訓和學習，在更新知識的過程中掌握新技能，跟隨檢驗科學的發(fā)展而進步。

綜上所述，培養(yǎng)基的質量是微生物檢驗過程中不可或缺的關鍵因素，事關檢測工作的科學性、準確性和可靠性。在微生物監(jiān)測工作中地位舉足輕重，如果忽視任何一個環(huán)節(jié)，就會導致實驗結果出現(xiàn)偏差?？梢酝ㄟ^嚴格產品的采購、規(guī)范其操作以及提高檢驗人員專業(yè)素質等手段來進一步加強培養(yǎng)基的質量控制，從而有效地提高微生物檢驗的準確性和科學性?？傊?，只有真正把微生物培養(yǎng)基的質量控制重視起來，才能有利于提高微生物實驗室檢測工作的成效。

［1］顧文輝. 微生物實驗室質量控制［J］. 職業(yè)與健康，2010，26(16):1 906 -1 908.

［2］周小明.微生物實驗室質量控制和質量保證［J］.職業(yè)與健康，2009，25(15):1 667 -1 668.

［3］賈月波.論食品微生物檢驗中培養(yǎng)基的質量控制措施［J］.中國保健營養(yǎng)，2013，(4):18 -19.