張艷慧，王麗娜

(1.黃河科技學(xué)院醫(yī)學(xué)院，鄭州 450063； 2.河南中醫(yī)學(xué)院第一附屬醫(yī)院婦產(chǎn)科，鄭州 450003)

多囊卵巢綜合征(polycystic ovary syndrome,PCOS)是育齡婦女常見(jiàn)的一種極為復(fù)雜的內(nèi)分泌及糖代謝異常所致的病理狀態(tài)，以雄激素過(guò)多以及長(zhǎng)期無(wú)排卵為特征[1]。其臨床表現(xiàn)為高雄激素血癥、胰島素抵抗及高胰島素血癥、促性腺激素水平異常、月經(jīng)異常、閉經(jīng)、無(wú)排卵、多毛、肥胖、不孕、卵巢多囊性改變，高雄激素血癥是其突出的特征。本研究采用PCOS模型大鼠為研究對(duì)象，旨在探討抑睪調(diào)經(jīng)湯對(duì)PCOS模型大鼠高雄激素血癥的影響及其機(jī)制。

1 材料與方法

1.1實(shí)驗(yàn)材料 SD大鼠(河南省實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供，動(dòng)物合格證號(hào)：510216)60只,均為雌性，體質(zhì)量為(180±10)g。將60只SD大鼠依據(jù)隨機(jī)數(shù)字表法分為5組：正常對(duì)照組(A組)、模型對(duì)照組(B組)、達(dá)英-35對(duì)照藥組(C組)、抑睪調(diào)經(jīng)湯高劑量治療組(D組)、抑睪調(diào)經(jīng)湯低劑量治療組(E組)，各12只。

1.2主要藥品、試劑 抑睪調(diào)經(jīng)湯(黨參15 g、白術(shù)12 g、姜半夏10 g、云苓 25 g、香附12 g、木香9 g、制大黃9 g、焦楂 20 g、雞血藤20 g、車(chē)前子15 g、石菖蒲15 g)(河南中醫(yī)學(xué)院第一附屬醫(yī)院制劑室生產(chǎn)，批號(hào)：200810)；中性胰島素注射液(江蘇徐州萬(wàn)邦生化制藥有限公司生產(chǎn)，批號(hào)0106225)；人絨毛膜促性腺激素粉針劑(上海第一生化藥業(yè)有限公司提供，批號(hào):H31020520)；達(dá)英-35片(德國(guó)Shering GmbH Und Co.Produktions KG 生產(chǎn)，批號(hào)：174A)；血清黃體生成素(luteinizing hormone,LH)、放免試劑盒(深圳拉爾文生物工程技術(shù)有限公司提供，批號(hào):200704)；血清胰島素放免試劑盒(北京原子高科技術(shù)有限公司提供，批號(hào)：200703)；血清雄激素放免試劑盒(深圳拉爾文生物工程技術(shù)有限公司提供，批號(hào):200704)。

1.3模型制備 正常對(duì)照組每日皮下注射等量生理鹽水，其余大鼠按照Poresky L法皮下注射人絨毛膜促性腺激素 15 U，每日2次，共22 d；胰島素于第1～11日內(nèi)自0.5 U/d開(kāi)始，逐漸遞增至6.0 U/d，按此劑量維持至第22日。以5%葡萄糖溶液替代日常飲水。造模最后1 d禁食過(guò)夜，大鼠每周稱體質(zhì)量1次，連續(xù)進(jìn)行陰道上皮細(xì)胞涂片檢查兩個(gè)性周期(每個(gè)性周期4 d)。以大鼠陰道角化細(xì)胞持續(xù)出現(xiàn)，涂片失去完整動(dòng)情周期及血清胰島素、雄激素升高者，提示PCOS大鼠模型制作成功。

1.4給藥方法 各組動(dòng)物等容灌胃，正常對(duì)照組、模型對(duì)照組給予生理鹽水20 mL/(kg·d) 灌胃；達(dá)英-35對(duì)照藥組、給予達(dá)英-35 0.435 g/(kg·d)；抑睪調(diào)經(jīng)湯高劑量組、抑睪調(diào)經(jīng)湯低劑量組分別給予抑睪調(diào)經(jīng)湯48.6 g/(kg·d)、32.4 g/(kg·d)。測(cè)定大鼠體質(zhì)量變化以及血清LH、胰島素、雄激素的水平。

2 結(jié) 果

2.15組大鼠用藥前后體質(zhì)量的變化 用藥前A組體質(zhì)量顯著低于B、C、D、E組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(t=-21.90、-26.20、-20.03、-25.50，P<0.05)；用藥后C、D、E組體質(zhì)量顯著低于B組(t=27.73、31.83、34.13，P<0.05)與正常對(duì)照的A組相近；B、C、D、E組治療前后體質(zhì)量比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)(表1)。

表1 抑睪調(diào)經(jīng)湯對(duì)大鼠體質(zhì)量的影響 (g)

A組：正常對(duì)照組；B組：模型對(duì)照組；C組：達(dá)英-35組;D組:抑睪調(diào)經(jīng)湯高劑量組；E組:抑睪調(diào)經(jīng)湯低劑量組；a與A組比較，P<0.05；b與B組比較，P<0.05

2.25組大鼠用藥前后黃體生成素的變化 用藥前A組血黃體生成素水平顯著低于B、C、 D、 E組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(t=-0.18、-0.18、-0.30、-0.29，P<0.05)；用藥后C、D、E組血黃體生成素水平顯著降低,與B組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(t=0.31，0.19、0.11，P<0.05)，C組黃體生成素下降水平較D組顯著(t=-0.12，P<0.05)，D組黃體生成素下降水平較E組顯著(t=-0.08，P<0.05)；C、D、E組大鼠治療前后比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)(表2)。

2.35組大鼠用藥前后胰島素的變化 用藥前B、C、D、E組血胰島素水平顯著高于A組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(t=-10.35、-9.35、-9.96、-9.51，P<0.05)，用藥后B、C組胰島素水平高于與D、E組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(t=10.61、7.26，P<0.05)，D組胰島素下降水平較E組顯著(t=-3.35，P<0.05)；D、E組大鼠治療前后胰島素水平比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)(表3)。

表2 抑睪調(diào)經(jīng)湯對(duì)大鼠血清LH的影響 (mIU/mL)

A組：正常對(duì)照組；B組：模型對(duì)照組；C組：達(dá)英-35組;D組:抑睪調(diào)經(jīng)湯高劑量組；E組:抑睪調(diào)經(jīng)湯低劑量組;a與A組比較，P<0.05；與B組比較，bP<0.01,cP<0.05，；c與D組比較，P<0.01

2.45組大鼠用藥前后雄激素水平的變化 用藥前A組血雄激素水平顯著低于B、 C、 D、E組差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意(t=-18.29、-16.70、-17.51、-17.46，P<0.05),用藥后B組雄激素水平顯著高于C、D、E組(t=19.47、14.29、9.70，P<0.05)，且C組雄激素下降水平較D組顯著(t=-5.18，P<0.05)，D組雄激素下降水平較E組顯著(t=-4.59，P<0.05)；C、D、E組大鼠治療前后雄激素水平比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)(表4)。

表3 抑睪調(diào)經(jīng)湯對(duì)大鼠血清胰島素的影響 (mIU/mL)

A組：正常對(duì)照組；B組：模型對(duì)照組；C組：達(dá)英-35組;D組:抑睪調(diào)經(jīng)湯高劑量組；E組:抑睪調(diào)經(jīng)湯低劑量組;a與A組比較，P<0.05；b與B組比較；P<0.05；c與D組比較，P<0.05

表4 抑睪調(diào)經(jīng)湯對(duì)大鼠血清雄激素的影響 (mIU/mL)

A組：正常對(duì)照組；B組：模型對(duì)照組；C組：達(dá)英-35組;D組:抑睪調(diào)經(jīng)湯高劑量組；E組:抑睪調(diào)經(jīng)湯低劑量組;a與A組比較，P<0.05；b與B組比較；P<0.05；c與D組比較，P<0.05;a與A組比較，P<0.05；b與B組比較，P<0.01；c與C組比較，P<0.05；d與D組比較，P<0.05

3 討 論

PCOS發(fā)病原因很多，臨床主要表現(xiàn)為雄性激素過(guò)多、持續(xù)無(wú)排卵，導(dǎo)致生育期婦女月經(jīng)紊亂、不孕。高LH促使卵巢卵泡內(nèi)膜細(xì)胞及間質(zhì)細(xì)胞合成過(guò)多雄激素，并抑制性激素結(jié)合蛋白的合成，使游離的雄激素增多。PCOS伴有明顯的胰島素抵抗與高胰島素血癥，高胰島素血癥又可引起高雄激素血癥[2]。其機(jī)制有：①直接作用。體外培養(yǎng)發(fā)現(xiàn)，胰島素可通過(guò)胰島素受體或胰島素樣生長(zhǎng)因子受體刺激卵巢雄激素的合成[1]，在體內(nèi)胰島素可能影響17α-羥化酶、17，20-碳鏈酶系統(tǒng)(P450c17)的作用[3]。②間接作用。胰島素可提高性腺細(xì)胞對(duì)促性腺激素釋放激素的敏感性而影響促性腺激素的分泌，抑制性激素結(jié)合蛋白的合成，從而導(dǎo)致游離睪酮水平的升高，促進(jìn)卵巢與胰島素樣生長(zhǎng)因子1的結(jié)合并抑制肝臟合成胰島素樣生長(zhǎng)因子結(jié)合球蛋白1，而胰島素樣生長(zhǎng)因子1可促進(jìn)卵巢雄激素的分泌并可同時(shí)增強(qiáng)LH促卵巢雄激素合成的作用[4]。PCOS的高雄激素血癥治療多采用減輕體質(zhì)量、降低胰島素水平、抗雄激素。由于藥物的療效維持時(shí)間短，多數(shù)患者不能接受，因而探索中醫(yī)藥治療PCOS具有重要意義。中醫(yī)學(xué)認(rèn)為，本病屬本虛標(biāo)實(shí)證，腎虛為本，病位在沖任，脾虛、痰濕與瘀血內(nèi)阻。中醫(yī)治療多采用“補(bǔ)腎舒肝，活血化痰”等治療，對(duì)恢復(fù)月經(jīng)、促進(jìn)排卵取得較好療效。

目前，對(duì)PCOS的研究偏重于腎臟,對(duì)它臟的研究較少,研究角度比較單一；研究偏重臨床,基礎(chǔ)研究開(kāi)展較少；中醫(yī)發(fā)病機(jī)制研究不夠深入，對(duì)痰、瘀、虛、郁等主要病機(jī)因素的實(shí)質(zhì)及其在PCOS形成和進(jìn)展中的作用和相互聯(lián)系缺乏深入研究，對(duì)不同治法的療效的比較研究較少[5]。經(jīng)過(guò)長(zhǎng)期臨床實(shí)踐，得出“脾陽(yáng)虛”為本病一重要癥型，“痰、瘀”為本病之標(biāo)，認(rèn)為健脾化痰、調(diào)經(jīng)助孕可作為PCOS的主要治療方法之一。本實(shí)驗(yàn)結(jié)果說(shuō)明，抑睪調(diào)經(jīng)湯可降低PCOS大鼠體質(zhì)量，降低大鼠血清LH、胰島素、雄激素水平，促使卵巢恢復(fù)排卵的作用。

本方以黨參、白術(shù)為君藥，功于健脾燥濕；以半夏、茯苓、石菖蒲、木香、香附為臣藥，共湊化痰理氣調(diào)經(jīng)之功。以大黃、焦山楂、車(chē)前子、雞血藤為佐藥，有利濕活血調(diào)經(jīng)的功效?？v觀全方標(biāo)本兼治、攻補(bǔ)兼施，具有健脾化痰、活血化瘀、調(diào)經(jīng)助孕的功效。本方應(yīng)在臨床應(yīng)用方面進(jìn)行更多的實(shí)踐和研究，并且在中西醫(yī)結(jié)合方面進(jìn)行探索。

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