閆俊琴，閻敏娜，李 偉，馬朋朋，李雙霞

(1.萬全縣中醫(yī)院檢驗科，河北 張家口 075000； 2.河北北方學院第一附屬醫(yī)院檢驗科，河北 張家口 075000；3.中國人民解放軍251醫(yī)院病理科，河北 張家口 075000； 4.河北北方學院第一附屬醫(yī)院骨科，河北 張家口 075000；5.中國人民解放軍251醫(yī)院檢驗科，河北 張家口 075000)

近年來，角膜潰瘍的發(fā)病率顯著升高。該病病因復雜，可影響患者的視力和生活質量，治愈后常會留下瘢痕，且致病菌因地域及氣候不同而發(fā)生變化，據(jù)估計每年全球范圍內因眼外傷和角膜潰瘍導致的失明人數(shù)高達200萬[1]。正常角膜防御機制損傷后，幾乎所有的病原體均可侵入角膜基質，造成復雜的角膜感染[2]。但因缺乏明確且特殊的臨床特征，很難明確導致角膜潰瘍的病因，因此確定為何種病原體引發(fā)的感染以明確診斷,從而確保角膜潰瘍得到準確具體的治療非常重要[3]。張家口地處高寒地區(qū)，環(huán)境條件復雜，角膜潰瘍多發(fā)，對致病菌病原學和流行病學特點了解不多。本研究旨在調查確定張家口地區(qū)角膜潰瘍相關的病原體流行病學特點及風險因素，以期為疾病控制和臨床診治提供一定的依據(jù)。

1 資料與方法

1.1一般資料 選取2010年12月至2012年6月張家口地區(qū)萬全縣中醫(yī)院、河北北方學院第一附屬醫(yī)院及解放軍251醫(yī)院收治的367例角膜潰瘍患者作為研究對象，其中男253例、女114例，年齡(33.8±2.7)歲；職業(yè)構成：農民141例，體力勞動者87例，商人63例，學生22例，其他職業(yè)54例。患者主訴視物模糊，有異物感、輕度眼痛、畏光、流淚、眼瞼痙攣等癥狀，球結膜充血或混合性充血、睫狀體充血、前房積膿。

1.2方法

1.2.1標本采集與診斷 首先對患者實施詳細的眼部檢查，進行麻醉后在無菌條件下從患者潰瘍邊緣取得病灶組織，取適量涂布于載玻片上，用制備好的10%氫氧化鉀(購于上海生物工程公司)溶液處理后行革蘭染色鏡檢，進行初步判斷。

1.2.2病原體培養(yǎng)與鑒定 ①細菌培養(yǎng)：將獲得的角膜潰瘍組織接種于平板上進行培養(yǎng)。每日觀察培養(yǎng)板生長情況，若7 d后仍無任何生長情況即棄去；②真菌培養(yǎng)：將獲得的角膜潰瘍組織接種于含有氯霉素的沙氏葡糖瓊脂(sabouraud′s dextrose glucose agar，SDA)固體平板上(培養(yǎng)液配制試劑購于上海生物工程公司)，每個標本接種兩塊平板，分別置于25 ℃和37 ℃進行培養(yǎng)。每日觀察SDA平板生長情況，3周后仍無任何生長情況即棄去。

待形成菌落后鏡下觀察病原體生長情況，根據(jù)病原體形態(tài)和結構特點及菌落特征使用鑒定標準進行菌種鑒定[4]。

2 結 果

2.1角膜潰瘍患者基本情況 367例角膜潰瘍患者中男性占68.9%，其中以21～30歲年齡段居多，占38.7%(98/253)；女性占31.1%，以31～40歲年齡段居多，占30.7%(35/144)。

2.2微生物培養(yǎng)及鑒定情況 所有角膜潰瘍患者中，共有218例(59.4%)病原體培養(yǎng)顯示陽性，其中130例(59.6%)為真菌性感染，88例(40.4%)為細菌性感染。對細菌培養(yǎng)陽性的患者進一步評估其職業(yè)和易患風險因素，其中潰瘍發(fā)生率由高到低依次為農民(114例，52.3%)，勞動者(50例，22.9%)，商人(24例，11.0%)，學生(8例，3.7%)；203例患者有明確外傷史，其中植物劃傷136例、塵埃21例、白內障手術19例、糖尿病13例、其他傷14例，15例無外傷史。

2.3微生物流行病學情況 真菌性角膜潰瘍中分離出的真菌以鐮刀菌屬最為常見，其次為曲霉菌屬和假絲酵母屬，其他菌屬占28.5%，多種感染形式并存(表1)；在細菌性角膜潰瘍中，革蘭陽性球菌為分離出的最主要的細菌類型以肺炎鏈球菌最常見。假單胞菌是分離出的最主要的革蘭陰性桿菌，多種感染形式并存(表2)。

表1 角膜潰瘍患者分離出的真菌情況

表2 角膜潰瘍患者分離出的細菌情況

3 討 論

角膜潰瘍可由細菌、真菌、寄生蟲和病毒及其他多種原因引發(fā)[5]，危害非常嚴重，其迅速發(fā)展造成的眼部損傷，可能對視力造成威脅并有可能引起角膜穿孔而導致失明[6]，是發(fā)展中國家導致失明的一個主要原因，因此及時準確的病因判定對其臨床有效治療非常重要[7]。

角膜潰瘍的發(fā)病范圍廣，可影響所有的年齡段[8]。張家口地區(qū)地理環(huán)境復雜，部分地區(qū)處高寒區(qū)域，風沙較大，農業(yè)人口居多，經(jīng)濟作物以玉米為主。本研究中角膜潰瘍患者以男性為主(68.9%)，以21～30歲年齡段居多；女性患者占31.1%，以31～40歲年齡段居多。男性發(fā)病率高于女性，與其在戶外工作期間容易受傷有關；中年階段潰瘍發(fā)生率較高，這也與該年齡段人群從事戶外工作為主有關，符合本地區(qū)人群分布特點。結合研究對象工作情況分析得出，大部分患者從事農業(yè)相關工作，多與農作物種植有關，其中玉米秸稈葉和塵埃造成的眼部損傷是角膜損傷的主要風險因素。

多種因素決定微生物性角膜潰瘍的臨床治療效果[9]，病原學與流行病學調查顯示該病有明顯的氣候特異性和地域性差異，可因條件不同而存在區(qū)別[10]。本研究367例角膜潰瘍患者中，有218例(59.4%)病原體培養(yǎng)陽性，149例(40.6%)培養(yǎng)陰性，未發(fā)現(xiàn)病原體的例數(shù)較高，可能與這些患者入院就診前已經(jīng)進行局部用藥治療有關。培養(yǎng)陽性標本中以真菌較多(130例，59.6%)，主要致病菌屬為鐮刀菌屬(49.2%)，其次為曲霉屬(13.1%)和假絲酵母屬(9.2%)；細菌檢出率為40.4%，革蘭陽性球菌是分離出的最主要的細菌類型，其中肺炎鏈球菌最常見(25例，28.4%)，葡萄球菌次之(19例，21.6%)；假單胞菌(9例，10.2%)是分離出的最主要的革蘭陰性桿菌。本研究中，病原體培養(yǎng)陽性的患者中存在細菌/真菌復合感染的情況，且存在細菌和真菌的交叉感染，說明病原體危害嚴重，多種病原體的復合感染使患者的診治更加困難。本研究通過分析目前張家口地區(qū)角膜潰瘍致病病原體流行病學特點，初步了解了該病常見病原真菌菌種的種類和變化方向，為指導臨床疾病的控制和治療提供重要依據(jù)，具有重要意義。

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