張學(xué)東，李曉華，李建華，王新杰，侯志偉，楊 帆

(承德市中心醫(yī)院，河北承德 067000)

原發(fā)性肝癌血清腫瘤標(biāo)志物的研究進(jìn)展

張學(xué)東，李曉華，李建華，王新杰，侯志偉，楊 帆

(承德市中心醫(yī)院，河北承德 067000)

原發(fā)性肝癌;血清學(xué);腫瘤標(biāo)志物

原發(fā)性肝癌(PHC)是指來源于肝臟上皮細(xì)胞的惡性腫瘤，包括肝細(xì)胞癌、肝內(nèi)膽管細(xì)胞癌、肝細(xì)胞膽管細(xì)胞混合癌等，是目前世界上第五大惡性腫瘤，居癌癥死亡原因的第三位，每年大約有60萬以上的人死于肝癌，其中有一半新發(fā)病人在我們國家[1]，其發(fā)病率在全球范圍內(nèi)呈上升趨勢[2]。外科手術(shù)切除是治療原發(fā)性肝癌(PHC)的首選方法，但是大多數(shù)病人來就診時(shí)已是中晚期，絕大部分人都失去了手術(shù)的機(jī)會(huì)。即使勉強(qiáng)切除，但術(shù)后復(fù)發(fā)率高，且易轉(zhuǎn)移，因此，人們一直在期盼著能夠早期診斷原發(fā)性肝癌(PHC)的新的方法的出現(xiàn)。甲胎蛋白(AFP)是目前臨床上最常見的診斷PHC的血清學(xué)指標(biāo)，但仍有大約30%-40%的PHC患者AFP的血清學(xué)沒有變化[3]。在良性或特殊疾病等情況下，血清AFP可為陽性[4]，這些都不同程度的影響了血清AFP對(duì)PHC診斷的特異性。因此，探求新的對(duì)PHC敏感特異的血清腫瘤標(biāo)志物，并與AFP聯(lián)合檢測，以期提高PHC診斷準(zhǔn)確率，就成為一直以來眾多學(xué)者研究的課題。

1 甲胎蛋白(Alpha-fetoprotein,AFP)

AFP是一種糖蛋白,由哺乳動(dòng)物胚胎和卵黃囊合成，在出生后不久，AFP濃度迅速下降，正常人體血清中AFP濃度一般低于10μg/L。在肝癌患者特定的細(xì)胞周期，由于低甲基化作用使血清AFP的基因表達(dá)開放，AFP對(duì)原發(fā)性肝癌的早期診斷、治療、預(yù)后判斷等意義重大，可反映病情的變化和治療的效果，其敏感性達(dá)75%，特異性僅次于病理診斷[5]。PHC患者血清AFP≥20μg/L者約占90%[6]。AFP存在異質(zhì)性,臨床常遇到一些慢性肝炎及肝硬化患者AFP值明顯升高，還有一些原發(fā)性肝癌患者AFP值反而降低[7]。如果單憑AFP單項(xiàng)檢測值去判斷，會(huì)有一定的誤診和漏診，故其臨床應(yīng)用受到一些限制。

2 磷脂?；嫉鞍拙厶?3(glypican-3,GPC3)

GPC3是一種硫酸乙酰肝素糖蛋白，是一類分布在細(xì)胞膜表面的蛋白聚糖，由核心蛋白和糖胺聚糖(GAG)側(cè)鏈組成，其羧基末端與一個(gè)糖基化磷脂酰肌醇(GPI)共價(jià)結(jié)合而連接在細(xì)胞膜上，調(diào)節(jié)細(xì)胞增殖、分化、黏附和遷移等，還可能涉及到抑制或調(diào)節(jié)大部分中胚層組織和器官的生長。GPC3在體內(nèi)分布有明顯的組織特異性和組織分化的時(shí)相特異性。研究顯示[8]，在154例原發(fā)性肝癌組織中，74.8%檢測到GPC3-mRNA，而只有3.2%正常肝和肝炎組織中檢測到GPC3基因。表明GPC3在肝細(xì)胞癌組織中過表達(dá)，而在成人正常組織、癌旁組織、肝炎、肝硬化組織中僅低表達(dá)或不表達(dá)，因而認(rèn)為大多數(shù)情況下GPC3能鑒別良惡性肝臟疾病，有助于早期發(fā)現(xiàn)肝硬化的惡變，提高原發(fā)性肝癌早期診斷率。

3 轉(zhuǎn)化生長因子β1(transforming growth factor-betal,TGF-β1)

TGF-β 1可以調(diào)節(jié)細(xì)胞的增殖、分化及凋亡和遷移，還參與細(xì)胞外基質(zhì)的產(chǎn)生，最初是由Assoian等從血小板中提取出來的，在人類胚胎發(fā)育及組織修復(fù)、免疫調(diào)節(jié)中也起重要作用。研究顯示，TGF-β1參與細(xì)胞周期的調(diào)節(jié)、細(xì)胞生長與分化，參與誘導(dǎo)免疫調(diào)節(jié)和細(xì)胞凋亡等，而且是一種負(fù)性調(diào)控因子。幾乎所有的腫瘤細(xì)胞內(nèi)均可檢測到mRNA，TGF-β1能抑制腫瘤免疫，尤其在腫瘤免疫逃逸機(jī)制中起重要作用。研究發(fā)現(xiàn)[9]，在肝癌組織TGF-β 1蛋白癌旁組織明顯高表達(dá)。

4 高爾基體糖蛋白73(Golgi protein 73,GP73)

GP73于2000年由美國學(xué)者Kladney等[10]首次發(fā)現(xiàn)報(bào)道，其基因位于第9號(hào)染色體，蛋白相對(duì)分子質(zhì)量為4.5×104。研究顯示，GP73存在于人體的多個(gè)器官組織中，在各個(gè)器官中的表達(dá)各不相同，但顯著表達(dá)于上皮細(xì)胞，正常肝臟表達(dá)甚微，但在發(fā)生病變的肝細(xì)胞中表達(dá)上調(diào)。2005年，Marrero等通過研究分析發(fā)現(xiàn)，GP73診斷原發(fā)性肝癌的敏感度和特異度均超過70%，在AFP<20ng/L的肝癌患者中，超過50%的人群GP73顯著升高。GP73和AFP聯(lián)合檢測能有效避免部分AFP陰性的漏檢病例，對(duì)AFP陰性PHC患者的早期診斷具有一定的臨床實(shí)用價(jià)值。

5 a-L-巖藻糖苷酶(alpha-L-fucosidase,AFU)

a-L-巖藻糖苷酶(AFU)是一種存在于所有哺乳動(dòng)物細(xì)胞溶酶體中的能分解糖蛋白鏈中巖藻糖苷鍵的溶酶體酸性水解酶，廣泛分布于人體各種組織細(xì)胞和體液中，參與體內(nèi)糖蛋白、糖脂的代謝，以肝、腎等組織活性較高。AFU的化學(xué)本質(zhì)是一種糖蛋白，其分子量為2.7×105-3.9×105，在人體中呈多型性，利用等電聚焦電泳分析發(fā)現(xiàn)其存在6種同工酶，且在等點(diǎn)聚焦電泳中行為發(fā)生顯著變化，在pH值3.8-3.9時(shí),其酶活性基本消失，在pH值6.2-7.0時(shí),酶活性上升。在正常情況下，AFU為細(xì)胞新陳代謝所生成的少量產(chǎn)物，除孕婦外，正常人血清AFU含量基本穩(wěn)定在一個(gè)低水平范圍內(nèi)。PHC患者血清AFU水平升高的機(jī)制目前尚不清楚，腫瘤細(xì)胞酶蛋白合成加速，AFU的降解減慢是引起PHC患者血清AFU活性增高的主要原因，但也可能與腫瘤細(xì)胞新合成異常AFU有關(guān)。在良性肝病患者中,AFU也有升高，但陽性率低于32%，主要是由于肝細(xì)胞受損時(shí)，血中AFU的清除能力下降，也可能是由于肝細(xì)胞膜或溶酶體膜通透性升高，使得滲入血液中的AFU增加所致[11]。

6 谷氨酰胺轉(zhuǎn)移酶(GGT)

GGT是一種質(zhì)膜結(jié)合糖蛋白，廣泛存在于體內(nèi)腎、肝、胰腺、腸等組織。在原發(fā)性肝癌患者，肝細(xì)胞產(chǎn)生大量GGT，癌細(xì)胞也合成GGT，故GGT呈中度或高度增加[12]。研究顯示，肝臟實(shí)體腫瘤組織的壓迫可能會(huì)導(dǎo)致肝細(xì)胞擠壓刺激，從而合成和分泌GGT增加，釋放到外周血液中，故而在急性彌漫性肝炎，尤其是原發(fā)性肝癌和肝轉(zhuǎn)移癌時(shí)，血清 GGT急速升高。因此，可以認(rèn)為血清GGT活性明顯增高對(duì)原發(fā)性肝癌的早期診斷有一定的意義。單獨(dú)檢測血清GGT對(duì)原發(fā)性肝癌的診斷意義不大，但聯(lián)合檢測則可顯著提高診斷準(zhǔn)確率。

7 血管內(nèi)皮生長因子(VEGF)

VEGF是一類能促進(jìn)內(nèi)皮細(xì)胞增殖分裂，促進(jìn)新生血管形成，并提高血管通透性的生長因子。VEGF是一種糖蛋白，在正常血管的生長發(fā)育過程中起著重要作用，但與此同時(shí)，也能促進(jìn)腫瘤組織內(nèi)的血管生長。肝癌是一種富含血管的實(shí)體腫瘤，VEGF能調(diào)節(jié)血管通透性，可作為肝癌發(fā)生的一個(gè)強(qiáng)有力的預(yù)測診斷工具。研究表明[13]，肝癌組織中VEGF mRNA水平顯著高于良性肝病患者和健康人。閆兆平等[14]研究報(bào)道，原發(fā)性肝癌組患者血漿VEGF水平明顯高于肝硬化、慢性肝炎和對(duì)照組，VEGF診斷肝癌的靈敏度為85.7%，特異度為92.3%，提示血清VEGF檢測可以作為診斷原發(fā)性肝癌的一項(xiàng)指標(biāo)。

8 腫瘤相關(guān)抗原(CEA、CA199、CA125)

CEA由是一種酸性糖蛋白，內(nèi)胚層細(xì)胞分泌，具有人類胚胎抗原特性，對(duì)消化道腺癌靈敏度高。對(duì)胃癌和結(jié)腸癌均有輔助診斷作用，PHC患者可升高，但單獨(dú)檢測敏感度不高，對(duì)原發(fā)性肝癌早期診斷價(jià)值較低。CA199(carbohydrate antigen 199)是一種粘蛋白型的糖類蛋白腫瘤標(biāo)志物，為細(xì)胞膜上的糖脂質(zhì)，分子量大于1000kD。CA199在正常胰腺、膽管細(xì)胞、胃、結(jié)腸、唾液腺上皮細(xì)胞均可表達(dá)[15]，所以，可以應(yīng)用于消化道腫瘤的診斷及療效觀察，是迄今報(bào)道的對(duì)胰腺癌敏感性最高的標(biāo)志物。在血清中，它以唾液粘蛋白形式存在，是存在于血液循環(huán)的胃腸道腫瘤相關(guān)抗原。研究表明[16]，CA199水平與肝癌腫瘤的階段有關(guān)，血清中CA199含量的高低可提示手術(shù)的難易程度;術(shù)前血清CA199水平的高低對(duì)肝癌的預(yù)后有一定提示作用，低者預(yù)后較好;術(shù)后CA199水平降至正常者，其生存期長于未下降者;當(dāng)腫瘤復(fù)發(fā)時(shí)，血清CA199水平可再度升高，并且發(fā)生于影像學(xué)診斷之前，因此，血清CA199可用于監(jiān)測腫瘤的復(fù)發(fā)。CA125是一種大分子糖蛋白，在胚胎發(fā)育過程中由體腔上皮表達(dá)，是一種似粘液蛋白復(fù)合物，廣泛應(yīng)用于婦科良、惡性腫瘤的診斷，在消化系統(tǒng)腫瘤、肝硬化、妊娠等發(fā)生時(shí)，其水平也會(huì)升高[17]。

9 結(jié)語

原發(fā)性肝癌惡性程度高、預(yù)后差，目前，診斷主要靠影像學(xué)檢查、細(xì)胞學(xué)與組織學(xué)檢查及化學(xué)診斷。影像學(xué)檢查對(duì)原發(fā)性肝癌的診斷和分期、分級(jí)起主要作用，但在很大程度上與操作者的經(jīng)驗(yàn)水平及檢測設(shè)備有關(guān)。肝穿刺活組織檢查對(duì)原發(fā)性肝癌的確診有一定幫助，但假陰性率較高，而且可能導(dǎo)致出血，故不作為常規(guī)檢查方法?；瘜W(xué)診斷主要是以血清腫瘤標(biāo)志物為觀察指標(biāo)，目前，臨床常用的、較好的指標(biāo)是AFP，但仍有不少PHC患者AFP呈陰性，由于缺乏理想的血清學(xué)檢測指標(biāo)，大多數(shù)患者確診時(shí)已經(jīng)處于中期甚至晚期，晚期PHC多不能耐受手術(shù)，即使可以勉強(qiáng)切除，但術(shù)后復(fù)發(fā)率高，且易轉(zhuǎn)移，故早期發(fā)現(xiàn)PHC對(duì)提高患者的生存率及生活質(zhì)量特別重要。這就給我們醫(yī)務(wù)工作者提出了更高的要求，需要將現(xiàn)有的腫瘤標(biāo)志物更加合理地運(yùn)用于肝癌的早期診斷，或是探究更高靈敏度、特異性、實(shí)用性的檢測新方法、新技術(shù)，以實(shí)現(xiàn)對(duì)PHC更準(zhǔn)確的早期診斷。

[1]Parkin DM,Bray F,Ferlay J,et al.Global cancer statistics,2002[J]. CA Cancer J Clin,2005,55(2): 74-108.

[2]Schafer DF,Sorrell MF.Hepatocellular carcinoma[J].Lancet,1999, 353(9160):1253-1257.

[3]Bruix J,Sherman M.Management of hepatocellular carcinoma[J]. Hepatocellular,2005,42(5): 1208-1236.

[4]Kwack MH,Choi BY,Sung YK.Cellular changes resulting from forced expression of glypican-3 in hepatocellular carcinoma cells[J].Mol Cells,2006,21(2):224-228.

[5]中國抗癌協(xié)會(huì)專家委員會(huì).原發(fā)性肝癌的診斷標(biāo)準(zhǔn)[J].中華肝臟病雜志,2000,8(3):135.

[6]楊秉輝.原發(fā)性肝癌的診斷:從臨床到亞臨床[J].中華消化雜志,2003,23(6):325-326.

[7]陳灝珠.實(shí)用內(nèi)科學(xué)[M].第11版.北京:人民衛(wèi)生出版社,2002.1868.

[8]周朝明,林志超,李漢權(quán),等.GPC3在肝癌患者血清、癌組織和肝細(xì)胞株中的表達(dá)[J].廣東醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào),2014,31 (4):367-369.

[9]季國忠,趙志泉,繆林,等.TGF-β1、TGF-β1RⅡ、NFKb在肝細(xì)胞癌血管生成中的作用及機(jī)制探討[J].中國實(shí)用內(nèi)科雜志,2002,22(12):729-731.

[10]Kladney RD,Bulla GA,Guo L,et a1.GP73,a novel Golgilocalized protein upregulated by viral in fection[J]. Gene,2000,249(1-2):53-65.

[11]陳煥文,張梅.AFU、AFP、GGT-II聯(lián)合檢測在原發(fā)性肝癌中的診斷價(jià)值[J].中外健康文摘,2014,11(3):344-345.

[12]黃敏娜.就醫(yī)者共性心理特征及護(hù)理調(diào)節(jié)[J].實(shí)用護(hù)理雜志,2001,17(4):60.

[13]Poon RT,Lau C,Pang R,et al.High serum vascular endothelial growth factor levels predict poor prognosis after radiofrequency ablation of hepatocellular carcinoma[J].Ann Surg Oncol,2007, 14(6):1835-1845.

[14]閆兆平,李群.VEGF檢測對(duì)肝細(xì)胞癌的診斷價(jià)值[J].齊魯醫(yī)學(xué)雜志,2009,24(1):13-14.

[15]李曦,李偉.CA199表達(dá)升高在良惡性疾病中的意義[J].中國實(shí)用醫(yī)藥,2013,8(24):9-10.

[16]陸瑋婷,趙建學(xué),郭海燕,等.CA199及CA125在不同程度的肝病患者中的診斷價(jià)值[J].實(shí)用臨床醫(yī)藥雜志,2013,15 (24):34-36.

[17]馬靈筠,楊五彪,萬學(xué)東,等.CA125、CEA、AFP檢測在結(jié)核性腹水及惡性腹水鑒別診斷中的價(jià)值[J].陜西醫(yī)學(xué)雜志,2004,33(11):995-997.

R735.7

A

1004-6879(2014)06-0526-03

2014-10-11)