倪友香紀(jì)樂軍

（1 江蘇省金湖縣食品藥品監(jiān)督管理局，江蘇 金湖 211600；2 江蘇神華藥業(yè)有限公司，江蘇 金湖 211600）

超聲提取虎杖中大黃素的工藝研究

倪友香1紀(jì)樂軍2

（1 江蘇省金湖縣食品藥品監(jiān)督管理局，江蘇 金湖 211600；2 江蘇神華藥業(yè)有限公司，江蘇 金湖 211600）

目的 研究虎杖中大黃素超聲法提取工藝。方法 通過正交試驗考察料液比、酒精濃度、提取時間3個因素，以提取浸膏得率和大黃素含量為評價指標(biāo)，采用加權(quán)評分法進(jìn)行綜合評價分析。結(jié)果 超聲提取虎杖中大黃素的最佳工藝參數(shù)為：料液比1∶10、酒精濃度80%、提取時間60 min，在此條件下進(jìn)行提取，干膏得率最高可達(dá)18.87%，干膏中大黃素含量最高可達(dá)0.69%。結(jié)論 超聲提取虎杖中大黃素提取時間短、提取率高。

超聲提??；虎杖；大黃素

虎杖系蓼科蓼屬多年生草本植物Poligonum Cuspidatum Sieb eucc的根和根莖[1]，又稱假川七、土川七、紅三七、三七或日本蓼。微苦，微寒。歸肝、膽、肺經(jīng)。根、莖用藥，有活血散痰、祛風(fēng)解毒、消炎止痛、去濕熱黃疸、治慢性氣管炎、降低血脂等功效。虎杖中含有多種有效成分，包括蒽酮類、黃酮類等化合物[2]。其中蒽酮類化合物的主要代表為大黃素。臨床研究表明虎杖中的大黃素具有抗腫瘤、抗微生物[3]、免疫調(diào)節(jié)、降壓功效等多種藥理作用[4,5]。

超聲提?。ㄒ卜Q為超聲波萃?。┦墙鼛啄臧l(fā)展起來的一種中藥提取新技術(shù)，由于其提取溫度低、提取率高、提取時間短的獨(dú)特優(yōu)勢被普遍應(yīng)用于各種中藥材有效含量的提取，是替代傳統(tǒng)剪切工藝方法實現(xiàn)高效、節(jié)能、環(huán)保式提取的現(xiàn)代高新技術(shù)手段[6]。

1 材料與儀器

1.1 材料：大黃素對照品（含量測定用），中國藥品生物制品檢定所；甲醇，色譜醇；三氯甲烷、硫酸等其他為分析純；水為超純水；虎杖，安徽市亳州恒誠醫(yī)藥有限公司，經(jīng)檢測合格。

1.2 儀器：SY-超聲波提取器，上海寧商超聲儀器有限公司；FA22048萬分之一天平，上海精密科學(xué)儀器有限公司；DZF-0B型真空干燥箱，上海躍進(jìn)醫(yī)療器械廠；RE-52AA旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器，上海亞榮生化儀器廠；LC-10AT高效液相色譜儀，日本島津。

2 方法與結(jié)果

2.1 試驗方法：選出料液比（A）、乙醇濃度（B）和提取時間（C）三個試驗因素，每個因素分3個水平（表1），設(shè)計正交試驗。藥材粉碎后按照試驗設(shè)計進(jìn)行提取，提取結(jié)束后進(jìn)行離心分離。離心濾液進(jìn)行減壓濃縮至稠膏，放入真空烘箱中進(jìn)行減壓干燥至干膏。計算干膏得率并檢測干膏中大黃素的含量[7,8]。

表1 因素水平表

2.2 評價指標(biāo)的確定：以大黃素含量和干膏得率作為綜合評價指標(biāo)，采用加權(quán)評分法進(jìn)行綜合評價。以大黃素含量為主要指標(biāo)，權(quán)重系數(shù)取0.6，干膏得率為輔助指標(biāo)，權(quán)重系數(shù)取0.4，綜合評分=（大黃素含量/最高大黃素含量）×100×0.6+（干膏得率/干膏最高得率）×100×0.4[9]。2.3 大黃素含量測定方法[10]

2.3.1 色譜條件。填充劑：十八烷基硅烷鍵合硅膠；流動相：甲醇-0.1%磷酸溶液（80∶20）；檢測波長：254 nm；柱溫：25 ℃。

2.3.2 對照品的制備：大黃素對照品24 h減壓干燥，精密稱定，加入甲醇，制成每1 mL含48 μg的溶液，即得。

2.3.3 供試品溶液的制備：取干膏粉碎，過40目篩，取粉末約0.1 g，精密稱定，精密加入三氯甲烷25 mL和2.5 moL/L硫酸溶液20 mL，稱定重置，80 ℃水浴回流2 h，放冷至室溫，再稱定重置，應(yīng)三氯甲烷補(bǔ)足減失的重量，搖勻。分取三氯甲烷液，精密量取10 mL蒸干，殘渣加甲醇使溶解，轉(zhuǎn)移至10 mL量瓶中，加甲醇稀釋至刻度，搖勻，過濾，取濾液即得。

2.3.4 樣品含量的測定：分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液各5 μL，注入液相色譜儀，測定，即得。

表2 超聲提取正交試驗設(shè)計及結(jié)果

2.4 試驗結(jié)果：見表2。

由表2中的極差分析可以看出，影響超聲提取虎杖中大黃素的主要因素為提取時間，其次為酒精濃度，料液比影響不大。因此虎杖超聲提取工藝定為：提取時間60 min，提取酒精濃度80%，由于料液比影響不大，因此為了節(jié)約酒精用量，選用1∶10的料液比。由此確定工藝為A1B3C3。

2.5 驗證試驗：為考察上述工藝參數(shù)的穩(wěn)定性，設(shè)計驗證試驗進(jìn)行工藝驗證，取虎杖三等份，加入10倍80%的酒精，提取60 min，提取液過濾，濾液減壓濃度至稠膏，稠膏在真空烘箱中進(jìn)行減壓干燥，計算三批干膏得率和大黃素含量，結(jié)果見表3。

表3 3批工藝驗證試驗

3 結(jié) 論

通過料液比、酒精濃度和提取時間三因素三水平正交試驗研究得出，超聲提取虎杖中大黃素的最佳工藝條件：料液比為1∶10，提取時間60 min，提取酒精濃度為80%。在此條件下進(jìn)行提取，干膏得率最高可達(dá)18.87%，干膏中大黃素含量最高可達(dá)0.69%。

[1] 楊秀賢,王昕.從虎杖中提取大黃素的生產(chǎn)工藝[J].天津市醫(yī)藥科學(xué)研究所,1996,27(2):87.

[2] 劉樹興,程麗英.虎杖有效成分的開發(fā)現(xiàn)狀及展望[J].中國食品添加劑,2004,15(6):80-82.

[3] 劉曉蓉.虎杖提取物抑菌作用的研究[J].廣州食品工業(yè)科技,2003,19(3):18-20.

[4] 張喜平.大黃素的藥理作用研究概況[J].中國藥理學(xué)通報,2003, 19(8): 851.

[5] 陽崇德,張秀賢.大黃素的藥理研究進(jìn)展[J].中國藥業(yè),2003,12(3):78-79.

[6] 秦梅頌.超聲提取技術(shù)在中藥中的研究進(jìn)展[J].安徽農(nóng)學(xué)通報,2010,(13):54-56.

[7] 趙瑞芝,袁小紅.均勻設(shè)計法優(yōu)選虎杖提取工藝[J].中國醫(yī)藥學(xué)雜質(zhì),2006,26(1):17-18.

[8] 胡春霖,正可利.超聲波法虎杖中總黃酮提取工藝研究[J].寶雞文理學(xué)院學(xué)報,2013,33(4):1-8.

[9] 陳飛龍,譚曉梅.正交試驗法優(yōu)選沈爽片提取工藝的研究[J].中藥材,2009,32(1):129-131.

[10] 國家藥典委員會.中華人民共和國藥典2010年版一部[M].中國醫(yī)藥科技出版社,2010:194-195.

The Research for Ultrasonic Extraction of Emodin in Giant Knotweed

NI You-xiang1, JI Le-jun2
(1 Jinhu Food and Drug Administration, Jinhu 211600, China; 2 Jiangsu Shenhua Pharmaceutical Co., Ltd., Jinhu 211600, China)

Objective To study the ultrasonic extraction of emodin in giant knotweed. Methods Examined the solid-liquid ratio, alcohol concentration, extraction time, three factors through the orthogonal experiments. The evaluation index is extract dry ointment yield and the content of emodin. Using the weighted scoring method for comprehensive evaluation analysis. Results Ultrasonic extraction of emodin in the giant knotweed optimum technological parameters are: solid-liquid ratio 1∶10; alcohol concentration 80%, extraction time 60 min. Under this condition, the dry ointment yield up to 18.87%, the content of emodin up to 0.69%. Conclusion Ultrasonic extraction of emodin in giant knotweed, shorten the time and increase the yield.

Ultrasonic extraction; Giant knotweed; Emodin

R286.1

：B

：1671-8194（2014）31-0020-02