吳晶晶，黃國(guó)利，詹睿，劉瑩，陳業(yè)高

（云南師范大學(xué)化學(xué)化工學(xué)院，云南昆明650500）

百日青（Podocarpus neriifolius），是羅漢松科（Podocarpaceae）羅漢松屬（Podocarpus）植物，產(chǎn)于浙江、福建、臺(tái)灣、江西、湖南、貴州、四川、西藏、云南、廣西、廣東等省區(qū).尼泊爾、錫金、不丹、緬甸、越南、老撾、印度尼西亞、馬來(lái)西亞的沙撈越也有分布[1].羅漢松屬植物在傳統(tǒng)中醫(yī)藥中常用于治療熱病、哮喘、咳嗽、霍亂、慍怒、胸口發(fā)悶和性病等[2].國(guó)內(nèi)外對(duì)該屬植物研究較多，發(fā)現(xiàn)了一些具有較好生物活性的二萜和雙黃酮.為了從該種植物中發(fā)現(xiàn)新的藥用活性成分，本文對(duì)滇產(chǎn)百日青的化學(xué)成分進(jìn)行了分離純化，得到5個(gè)化合物.經(jīng)過(guò)波譜分析（核磁共振氫譜、碳譜）確定它們的結(jié)構(gòu)分別為異香草醛（isovanillin）（1）、對(duì)羥基苯甲酸（4-hydroxybenzoic acid）（2）、原兒茶酸（protocatechuic acid）（3）、松甾酮A（ponasterone A）（4）、stigmast-5-ene-3 β,7 αdiol（5）.其中化合物（1）、（3）、（4）、（5）為首次從該植物中分離得到，結(jié)構(gòu)式見(jiàn)圖1.

1 儀器和藥材

1.1 儀器

紫外分析儀（ZF-II型上海顧村中實(shí)儀器廠）；質(zhì)譜（Varian Mat-711質(zhì)譜儀）；超導(dǎo)核磁共振儀（Bruker DRX-500型，瑞士布魯克公司）；旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀（SB-2000系列，日本東京理化）.

1.2 試劑

層析硅膠（青島海洋化工廠），Sephadex LH-20:20-80 μm（Pharmacia Fine Chemical Co.,Ltd.）；反相RP-18:40-60 μm（德國(guó)Merck公司），高效薄層層析硅膠G板（煙臺(tái)化工研究院），顯色劑為10%硫酸乙醇溶液，所用溶劑（石油醚，氯仿，乙酸乙酯，丙酮，甲醇）為工業(yè)純（重蒸后使用），其它試劑為化學(xué)純或分析純.

1.3 藥材

百日青葉采自云南西雙版納，由中國(guó)醫(yī)學(xué)科學(xué)院藥用植物開(kāi)發(fā)研究所云南分所彭朝中先生采集，并鑒定為Pterospermum menglunense Hsue.

2 試驗(yàn)方法

干燥的百日青葉3.6 kg，用甲醇浸提4次，合并提取物并減壓蒸干后得浸膏650 g.將浸膏懸溶于水中，再用乙酸乙酯反復(fù)萃取8次，合并乙酸乙酯萃取物并減壓蒸干后得到浸膏78 g，再經(jīng)硅膠柱層析、葡聚糖凝膠柱層析以及反相柱層析等分離方法反復(fù)分離純化得到化合物1～5.

3 結(jié)果與討論

從滇產(chǎn)百日青葉的甲醇提取物中分離得到5個(gè)化合物，利用現(xiàn)代核磁共振波譜法分別鑒定為異香草醛（isovanillin）（1）、對(duì)羥基苯甲酸（4-hydroxy?benzoic acid）（2）、原兒茶酸（protocatechuic acid）（3）、松甾酮A（ponasterone A）（4）、stigmast-5-ene-3 β,7 α-diol（5）.其中化合物（1）、（3）、（4）、（5）為首次從該植物中分離得到.

化合物（1）：無(wú)色油狀物，分子式為C8H8O3，易溶于氯仿.1H-NMR（500 MHz,CDCl3）δ∶9.86（1H,s,CHO），7.46（1H,br d,J=8.5 Hz,H-6），7.45（1H,br s,H-2），7.07（1H,d,J=8.5 Hz,H-5），4.00（3H,s,CH3）；13C-NMR（125 MHz,CDCl3）δ∶129.9（s,C-1）,108.7（d,C-2），147.1（s,C-3），151.2（s,C-4），114.4（d,C-5），127.6（d,C-6），190.9（CHO），56.1（OCH3）.以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[3]對(duì)照一致，故鑒定化合物（1）為異香草醛.

化合物（2）：白色晶體，分子式為C7H6O3，易溶于甲醇.1H-NMR（500 MHz,CD3OD）δ∶7.89（2H,d,J=8.5 Hz,H-3,7），6.83（2H,d,J=8.5 Hz,H-4,6）；13C-NMR（125 MHz,CD3OD）δ∶168.7（s,C-1），123.0（s,C-2），133.3（d,C-3），116.3（d,C-4），163.6（s,C-5），116.3（d,C-6），133.3（d,C-7）.以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[4]對(duì)照一致，故鑒定化合物（2）為對(duì)羥基苯甲酸.

化合物（3）：白色晶體，分子式為C7H6O4，易溶于甲醇.1H-NMR（500 MHz,CD3OD）δ∶7.44（d,J=2.0 Hz,H-2），6.82（d,J=8.0 Hz,H-5），7.46（dd,J=8.0,2.0 Hz,H-6）；13C-NMR（125 MHz,CD3OD）δ∶123.42（s,C-1），116.07（d,C-2），146.32（s,C-3），151.80（s,C-4），118.03（d,C-5），124.20（d,C-6），170.58（s,C-7）.以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[5]對(duì)照一致，故鑒定化合物（3）為原兒茶酸.

化合物（4）：白色針晶，分子式為C27H44O6，易溶于吡啶.1H-NMR（500 MHz,Pyridine-d5）δ∶2.11-2.23（1H,m,H-1a），1.85-1.97(1H,m,H-1b),4.17（1H,br dd,J=11.5,3.0 Hz,H-2），4.23（1H,br s,H-3），2.01-2.10（1H,m,H-4a），1.65-1.82（1H,m,H-4b），3.02（1H,d,J=13.0 Hz,H-5），6.27（1H,s,H-7），3.60（1H,br s,H-9），1.65-1.82（1H,m,H-11a），1.85-1.97（1H,m,H-11b），2.01-2.10（1H,m,H-12a），2.62（1H,dd,J=12.0,4.0 Hz,H-12b），1.85-1.97（1H,m,H-15a），2.11-2.23（1H,m,H-15b），2.01-2.10（1H,m,H-16a），2.47（1H,dd,J=20.0,11.0 Hz,H-16b），2.93（1H,t,J=9.0 Hz,H-17），1.23（3H,s,CH3-18），1.07（3H,s,CH3-19），1.58（3H,s,CH3-21），3.80（1H,d,J=10.5 Hz,H-22），1.54（1H,d,J=12.5 Hz,H-23a），1.65-1.82（1H,m,H-23b），1.36-1.43（1H,m,H-24a），1.65-1.82（1H,m,H-24b），1.43-1.50（1H,m,H-25），0.81（3H,d,J=5.5 Hz,CH3-26），0.80（3H,d,J=5.5 Hz,CH3-27）；13CNMR（125 MHz,Pyridine-d5）δ∶37.7（t,C-1），67.7（d,C-2），67.7（d,C-3），32.1（t,C-4），51.1（d,C-5），203.2（s,C-6），121.4（d,C-7），165.8（s,C-8），34.1（d,C-9），38.4（s,C-10），20.8（t,C-11），31.7（t,C-12），47.8（s,C-13），83.9（s,C-14），31.4（t,C-15），21.1（t,C-16），49.7（d,C-17），17.6（q,CH3-18），24.1（q,CH3-19），76.4（s,C-20），21.3（q,CH3-21），76.4（d,C-22），30.0（t,C-23），36.8（t,C-24），27.8（d,C-25），22.0（q,CH3-26），23.0（q,CH3-27）.以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[6]對(duì)照一致，故鑒定化合物（4）為松甾酮A.

化合物（5）：白色晶體，分子式為C29H50O2，易溶于氯仿.1H-NMR（500 MHz,CDCl3）δ∶3.59（1H,m,H-3），5.61（1H,d,J=3.5 Hz,H-6），3.86（1H,m,H-7），0.69（3H,s,H-18），1.00（3H,s,H-19），0.94（3H,d,J=6.5 Hz,H-21），0.82（3H,d,J=7.0 Hz,H-26），0.84（3H,d,J=6.5 Hz,H-27），0.86（3H,t,J=7.5 Hz,H-29）；13C-NMR（125 MHz,CDCl3）δ∶37.0（t,C-1），31.4（t,C-2），71.3（d,C-3），42.0（t,C-4），146.3（s,C-5），123.8（d,C-6），65.4（d,C-7），37.5（d,C-8），42.3（d,C-9），37.4（s,C-10），20.7（t,C-11），39.2（t,C-12），42.2（s,C-13），49.4（d,C-14），24.3（t,C-15），28.3（t,C-16），55.7（d,C-17），11.6（q,CH3-18），18.3（q,CH3-19），36.1（d,C-20），18.8（q,CH3-21），33.9（t,C-22），25.9（t,C-23），45.8（d,C-24），29.1（d,C-25），19.8（q,CH3-26），19.0（q,CH3-27），23.1（t,C-28），12.0（q,CH3-29）.以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[7]對(duì)照一致，故鑒定化合物（5）為stigmast-5-ene-3β,7α-diol.

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