黃堅，沈佳慶，湯海波，孔小明，沈月平，何楊

（蘇州大學(xué)1.附屬第一醫(yī)院急診內(nèi)科；2.醫(yī)學(xué)部公共衛(wèi)生學(xué)院流行病與衛(wèi)生統(tǒng)計系；3.附屬第一醫(yī)院血栓與止血研究室，江蘇蘇州215006）

sE?Cadherin早期評價急性胰腺炎嚴(yán)重程度的臨床價值

黃堅1，沈佳慶1，湯海波2，孔小明1，沈月平2，何楊3

（蘇州大學(xué)1.附屬第一醫(yī)院急診內(nèi)科；2.醫(yī)學(xué)部公共衛(wèi)生學(xué)院流行病與衛(wèi)生統(tǒng)計系；3.附屬第一醫(yī)院血栓與止血研究室，江蘇蘇州215006）

目的探討可溶性E-鈣黏素（sE-Cadherin）對早期判斷急性胰腺炎嚴(yán)重程度的臨床價值。方法選擇急性胰腺炎患者69例［輕度急性胰腺炎（MAP）30例、中度急性胰腺炎（MSAP）23例、重度急性胰腺炎（SAP）16例］，其他急腹癥20例，健康個體20例。采用雙抗體夾心ELISA法分別檢測腹痛開始12、24、48 h血漿sE-Cadherin值，評價與胰腺炎嚴(yán)重程度關(guān)聯(lián)性的敏感度和特異度，并分析與臨床檢測指標(biāo)的相關(guān)性。結(jié)果血漿sE-Cadherin值在發(fā)病12、24、48 h均呈陽性，但MAP組、健康組、其他急腹癥組相互之間無統(tǒng)計學(xué)差異（P＞0.05）；MSAP組、SAP組血漿sE-Cadherin值分別較其他3組明顯升高（P＜0.001），且SAP組高于MSAP組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.001）。sE-Cadherin對判斷中度以上胰腺炎敏感度92.3%，特異度90%，判斷SAP敏感度81.3%，特異度98.1%。sE-Cadherin與乳酸脫氫酶、高敏C反應(yīng)蛋白、血糖、白細(xì)胞呈線性正相關(guān)，與白蛋白呈線性負(fù)相關(guān)（P均＜0.05）。結(jié)論sE-Cadherin對早期判斷急性胰腺炎嚴(yán)重程度具有重要的臨床價值，同時有很高的敏感度、特異度，與臨床判斷嚴(yán)重程度指標(biāo)呈線性相關(guān)。

急性胰腺炎；可溶性E-鈣黏素

急性胰腺炎（acute pancreatitis，AP）是一種常見的消化系統(tǒng)急腹癥，近年來發(fā)病率逐漸上升。重癥急性胰腺炎（severe acute pancreatitis，SAP）可并發(fā)多器官功能衰竭（multiple organ failure，MOF），危及患者生命。因此，早期判斷AP嚴(yán)重程度具有很重要的臨床意義。盡管檢測AP的指標(biāo)很多，如血清淀粉酶、脂肪酶、血糖及細(xì)胞炎性因子等，但目前尚無某個單一指標(biāo)可早期預(yù)測AP的嚴(yán)重性。E-鈣黏素（ECadherin）是一類鈣依賴性跨膜糖蛋白，存在于上皮細(xì)胞中，主要介導(dǎo)細(xì)胞間連接以維持組織結(jié)構(gòu)的完整性和細(xì)胞間黏附［1］。本研究擬通過對AP患者外周靜脈血漿動態(tài)可溶性E-鈣黏素（soluble E-Cadherin，sE-Cadherin）進(jìn)行檢測，探討其對早期評價AP嚴(yán)重程度的臨床價值。

1 材料與方法

1.1 資料

選擇2012年1月至2013年12月于我院住院的AP患者69例，年齡（46.2±10.5）歲。所有患者符合2013年中國急性胰腺炎診治指南［2］。其中，輕度急性胰腺炎（mild acute pancreatitis，MAP）30例，中度急性胰腺炎（moderately severe acute pancreatitis，MSAP）23例，重度急性胰腺炎（severe acute pancreatitis，SAP）16例。按病因分類：膽源性胰腺炎35例（輕14例、中12例、重9例）、酒精性胰腺炎9例（輕4例、中3例、重2例）、高脂性8例（輕3例、中3例、重2例）、暴飲暴食6例（輕3例、中2例、重1例）、藥物性3例（輕1例、中1例、重1例）、其他8例（輕5例、中2例、重1例）。另選擇其他急腹癥患者（other patients with acute abdomen，OPAA）20例（急腹癥組），年齡（47.1±9.9）歲，其中急性膽囊炎6例、腸梗阻4例、急性闌尾炎4例、消化性潰瘍穿孔3例、胃腸炎3例；選擇健康體檢者（Healthy control，HC）20例，年齡（44.9±8.7）歲，男性12例，女性8例。所有受試者均除外腫瘤。本研究獲得患者知情同意及我院倫理委員會的同意。

1.2 方法

分別取AP、OPAA患者腹痛發(fā)作后12、24、48 h靜脈血及我院體檢中心提供健康體檢者靜脈血，分離血漿后置于-40℃冰箱內(nèi)保存待測。sE-Cadherin定量分析試劑盒為我院臨床免疫實驗室自主研發(fā)，采用雙抗體夾心ELISA法，ANTHOS2010全自動酶標(biāo)儀（ANTHOS公司，奧地利）進(jìn)行檢測。

1.3 統(tǒng)計學(xué)分析

采用IBM SPSS Statistics 21軟件進(jìn)行統(tǒng)計分析，計量資料以表示。經(jīng)正態(tài)性檢驗（Shapiro-Wilk法），本研究資料為非正態(tài)性分布，故多樣本分布差異采用Kruskal-WallisH檢驗，兩兩比較采用Bonferroni法（α=0.005）；采用直線相關(guān)系數(shù)描述兩定量變量之間關(guān)聯(lián)的方向和密切程度；通過制作ROC曲線確定某診斷指標(biāo)的cut-off值及相應(yīng)的靈敏度和特異度。

2 結(jié)果

2.1 腹痛后12 h各組血漿sE-Cadherin值的比較

腹痛后12 h，多組sE-Cadherin值均數(shù)分布差異有統(tǒng)計學(xué)意義（H=64.966，P＜0.001）。兩兩比較急腹癥組與健康組（Z=1.177，P=0.239），MAP組與健康組（Z=2.337，P=0.019），急腹癥組與MAP組（Z= 0.713，P=0.476），差異無統(tǒng)計學(xué)意義。但是，MSAP組、SAP組分別與健康組（Z=5.503，P＜0.001；Z= 4.888，P＜0.001），與急腹癥組（Z=4.943，P＜0.001；Z=4.648，P＜0.001）比較差異顯著，MSAP組和SAP組較健康組和急腹癥組高。與MAP組比較，MSAP組（Z=5.178，P＜0.001），SAP組（Z=4.913，P＜0.001）sE-Cadherin水平顯著升高；MSAP組與SAP組之間的差異亦有統(tǒng)計學(xué)意義（Z=3.31，P＜0.001）。說明腹痛后12 h不同嚴(yán)重程度的胰腺炎組sE-Cadherin值存在統(tǒng)計學(xué)差異。見表1。

表1 不同時間點AP組與其他組血漿sE?Cadherin值的比較Tab.1 Comparison of plasma sE?Cadherin values between AP group and other groups at different time points

2.2 腹痛后24 h各組血漿sE-Cadherin值的比較

健康組、急腹癥組、MAP組、MSAP組以及SAP組5組相比，24 h檢驗統(tǒng)計量H=73.462，P＜0.001，差異有統(tǒng)計學(xué)意義。兩兩比較急腹癥組與健康組（Z=0.135，P=0.892），MAP組與健康組（Z=2.267，P=0.023），急腹癥組與MAP組（Z=1.000，P= 0.317），差異無統(tǒng)計學(xué)意義。MSAP組、SAP組血漿sE-Cadherin值較健康組（Z=5.600，P＜0.001；Z= 5.094，P＜0.001）和急腹癥組（Z=5.138，P＜0.001；Z=4.903，P＜0.001）差異有統(tǒng)計學(xué)意義。MSAP組、SAP組的血漿sE-Cadherin值較MAP組（Z=6.03，P＜0.001；Z=5.397，P＜0.001）顯著升高，MSAP組與SAP組之間差異亦具有統(tǒng)計學(xué)意義（Z=3.283，P＜0.001）。見表1。

2.3 腹痛后48 h各組血漿sE-Cadherin值的比較

健康組、急腹癥組、MAP組、MSAP組以及SAP組5組相比，48 h檢驗統(tǒng)計量H=75.684，P＜0.001，差異有統(tǒng)計學(xué)意義。急腹癥組與健康組（Z=0.460，P=0.646），MAP組與健康組（Z=1.634，P=0.102），急腹癥組與MAP組（Z=1.228，P=0.219），血漿sECadherin值差異無統(tǒng)計學(xué)意義。MSAP組、SAP組血漿sE-Cadherin值較健康組（Z=5.601，P＜0.001；Z= 5.094，P＜0.001）與急腹癥組（Z=5.333，P＜0.001；Z=5.030，P＜0.001）差異有統(tǒng)計學(xué)意義。MSAP組、SAP組的血漿sE-Cadherin值較MAP組（Z=6.156，P＜0.001；Z=5.443，P＜0.001）顯著升高，MSAP組與SAP組之間同樣有統(tǒng)計學(xué)差異（Z=3.969，P＜0.001）。見表1。

2.4 血漿sE-Cadherin值的診斷敏感度和特異度

2.4.1 分析腹痛12 h血漿sE-Cadherin值在輕度AP（MAP）對中度以上AP（MSAP+SAP）鑒別診斷中的靈敏度和特異度：當(dāng)cut-off值≥7 300.5時，判斷中度以上AP的靈敏度為92.3%，特異度為90%，ROC曲線下面積0.929（95%CI：0.862～0.996）。見圖1A。

2.4.2 分析腹痛12 h血漿sE-Cadherin值在重度AP（SAP）對輕、中度AP（MAP+MSAP）鑒別診斷中的靈敏度和特異度：當(dāng)cut-off值≥16 205.0，判斷SAP，敏感度81.3%，特異度98.1%，ROC曲線下面積0.888（95%CI：0.769～1.000）。見圖1B。

圖1 血漿sE?Cadherin在不同嚴(yán)重程度AP患者鑒別診斷的敏感度和特異度Fig.1 Diagnostic sensitivity and specificity of plasma sE?Cadherin in patients with different severity of AP

2.5 AP患者血漿sE-Cadherin值與入院時臨床檢驗指標(biāo)相關(guān)性分析

Pearson相關(guān)分析顯示：sE-Cadherin與乳酸脫氫酶（lactate dehydragenase，LDH）、高敏C反應(yīng)蛋白（high-sensitivity C-reactive protein，hs-CRP）、血糖（glucose，GLU）以及白細(xì)胞（white blood cell，WBC）水平呈線性正相關(guān)，有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）；與白蛋白（albnmin，ALB）水平呈線性負(fù)相關(guān)，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）。見表2。

3 討論

目前，臨床上急需一種方便、有效、單一的檢測指標(biāo)用于早期判斷AP的嚴(yán)重性，判斷其是否會導(dǎo)致MOF和胰腺壞死［3］。CRP作為一種炎性反應(yīng)指標(biāo)，常用于判斷疾病的嚴(yán)重度，尤其當(dāng)CRP＞150 mg/L時，特異度和敏感度可超過80%，但CRP升高幾乎都發(fā)生在發(fā)病48 h后，對48 h內(nèi)的臨床意義不大；而其他炎性因子也同樣不能早期、可靠地預(yù)測AP的嚴(yán)重度。本研究通過對AP患者外周靜脈血漿sE-Cadherin進(jìn)行動態(tài)檢測，探討了其在早期判斷MAP、MSAP和SAP方面的臨床價值。

E-Cadherin是一種分子量為120 kDa的跨膜糖蛋白，產(chǎn)生于依賴鈣黏附的所有上皮細(xì)胞［4］，包括N端胞外區(qū)、高度疏水的跨膜區(qū)及C端胞內(nèi)區(qū)。sECadherin是一種分子量為80 kDa的縮氨酸，由ECadheaorin通過基質(zhì)金屬蛋白酶（matrix metalloproteinase，MMPs）和胰蛋白酶等水解胞外區(qū)后產(chǎn)生［5］。在MSAP和SAP導(dǎo)致的全身炎性反應(yīng)綜合征（systemic inflammation response syndrome，SIRS）反應(yīng)中，蛋白酶激活，作用于胰腺細(xì)胞膜，裂解E-Cadherin細(xì)胞外肽段，導(dǎo)致血漿sE-Cadherin濃度升高，其中MMPs最為關(guān)鍵［6］。另外，MSAP和SAP時，炎性因子釋放、微循環(huán)障礙、氧化應(yīng)激等可導(dǎo)致細(xì)胞凋亡，研究表明在細(xì)胞凋亡過程中E-Cadherin主要有2種蛋白水解途徑，除MMPs分解細(xì)胞膜外肽段，另有凋亡蛋白酶分解細(xì)胞質(zhì)區(qū)域E-Cadherin，分解成24、29、和84 kDa分子碎片［7］。

AP的嚴(yán)重程度取決于器官功能衰竭的出現(xiàn)及持續(xù)時間（是否超過48 h）。MSAP伴有一過性器官功能衰竭，SAP為持續(xù)性器官功能衰竭。本研究中，血漿sE-Cadherin值在發(fā)病12、24、48 h均出現(xiàn)升高：MAP組、健康組、OPAA組之間無統(tǒng)計學(xué)差異（P＞0.005）；MSAP組、SAP組分別較前MAP組、健康組、OPAA組明顯升高（P＜0.001）；且SAP組較MSAP組升高，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.001）。說明MSAP、SAP患者SIRS加重，炎性因子瀑布樣釋放、血小板活化、微循環(huán)障礙等均可加速細(xì)胞凋亡，MMPs激活，sE-Cadherin釋放增多，導(dǎo)致器官損傷和功能障礙。sE-Cadherin變化發(fā)生在MSAP和SAP的早期，腹痛12 h即達(dá)高峰，對盡早判斷AP嚴(yán)重程度有重要的臨床指導(dǎo)意義。MSAP組與SAP組之間sECadherin值的差異反映了炎性反應(yīng)、細(xì)胞凋亡和胰腺細(xì)胞壞死程度、器官功能衰竭持續(xù)時間相關(guān)。研究表明SIRS早期即出現(xiàn)sE-Cadherin升高，且與疾病的進(jìn)展和嚴(yán)重程度密切相關(guān)［8］。本研究中，其他急腹癥組sE-Cadherin未見明顯升高，可能與未選擇合并有SIRS和器官功能衰竭的患者有關(guān)。sE-Cadherin在MSAP和SAP早期特異性地升高，與是否存在炎性疾病無關(guān)，而是與疾病的嚴(yán)重程度，尤其是MOF相關(guān)。

本研究結(jié)果發(fā)現(xiàn)：腹痛12 h，MAP對中度以上AP（MSAP+SAP）血漿sE-Cadherin，取cut-off值≥7 300.5，判斷中度以上AP敏感度92.3%，特異度90%；SAP對輕、中度AP（MAP+MSAP）血漿sE-Cadherin，取cut-off值≥16 205.0，判斷SAP敏感度81.3%，特異度98.1%。提示腹痛12 h高峰血漿sECadherin取合理cut-off值，對判斷MAP、MSAP、SAP，有很高的敏感度和特異度。

臨床檢驗指標(biāo)相關(guān)分析結(jié)果顯示：sB7-H3值與LDH、hs-CRP、GLU、WBC水平呈正相關(guān)，與ALB值呈負(fù)相關(guān)，與GLB值不相關(guān)。提示sE-Cadherin值與這些早期判斷胰腺炎嚴(yán)重程度的評分指標(biāo)有很好的相關(guān)性，更加佐證了sE-Cadherin值是一個較好的早期判斷AP嚴(yán)重程度的指標(biāo)。

綜上所述，sE-Cadherin檢測對早期區(qū)分MAP、MSAP、SAP，判斷AP的嚴(yán)重程度有較高的臨床價值，不僅具有很高的敏感度和特異度，且與其他臨床評分指標(biāo)有很強(qiáng)的相關(guān)性，具有潛在的臨床推廣價值。

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（編輯 王又冬）

The ClinicalSignificance ofsE-Cadherin for Early Evaluation ofthe Severity ofAcute Pancreatitis

HUANGJian1，SHENJia-qing1，TANG Hai-bo2，KONGXiao-ming1，SHENYue-ping2，HE Yang3
（1.Department of Emergency，The First Hospital Affiliated to Soochow University，Suzhou 215006，China；2.Department of Epidemiology and Biostatistics，Public Health School of Soochow University，Suzhou 215006，China；3.Thrombosis and Haemostasis Laboratory，The First Hospital Affiliated to Soochow University，Suzhou 215006，China）

ObjectiveTo explore the clinical value of sE-Cadherin for early judgment of the severity of acute pancreatitis.Methods69 cases of acute pancreatitis patients（MAP：30，MSAP：23，SAP：16），20 patients with other acute abdominal pain，and 20 cases of healthy individuals were enrolled for the study.Double antibody sandwich ELISA method was used to measure plasma sE-Cadherin at 12 h，24 h and 48 h after onset of abdominal pain.The correlation among sE-Cadherin expression，clinical detection index and severity degree of sensitivity and was evaluated in acute pancreatitis patients.ResultsNo statistical difference of plasma sE-Cadherin was found between each other among the MAP group，healthy group and other acute abdominal disease group at 12，24 and 48 hours（P＞0.05）；MSAP and SAP group was higher than any of the first three groups（P＜0.001）；SAP group was significantly higherthan MSAPgroup（P＜0.001）.By the cutoffofsE-Cadherin，the sensitivity and specificity to judge above moderate pancreatitis were 92.3%and 90%，which were 81.3%and 98.1%for SAP evaluation.sE-Cadherin is positively correlated with LDH，hs-CRP，GLU，WBC and negatively correlated with ALB（P＜0.05）.ConclusionsE-Cadherin has important clinical value in evaluation of the severity of acute pancreatitis at early time.Meanwhile，sE-Cadherin shows a high sensitivity and specificity，which is correlated with the clinical severity index.

acute pancreatitis；sE-Cadherin

R447

A

0258-4646（2014）10-0870-04

國家自然科學(xué)基金青年項目（81300357）

黃堅（1970-），男，副主任醫(yī)師，博士研究生. E-mail：huangjian1997@163.com

2014-07-02

網(wǎng)絡(luò)出版時間：