施貴榮，郭美仙，李冬梅，劉 熙，楊 靜，劉光明

（1.大理學(xué)院藥學(xué)與化學(xué)學(xué)院，云南大理 671000；2.大理州食品藥品檢驗(yàn)所，云南大理 671000）

思茅松松塔化學(xué)成分研究

施貴榮1，郭美仙1，李冬梅1，劉 熙1，楊 靜2，劉光明1

（1.大理學(xué)院藥學(xué)與化學(xué)學(xué)院，云南大理 671000；2.大理州食品藥品檢驗(yàn)所，云南大理 671000）

目的：對(duì)思茅松松塔的化學(xué)成分進(jìn)行研究。方法：采用95%乙醇提取思茅松松塔的化學(xué)成分，用正相硅膠柱色譜、Sep?hadex LH-20柱色譜、重結(jié)晶等方法進(jìn)行分離純化，利用波譜數(shù)據(jù)鑒定化合物的結(jié)構(gòu)。結(jié)果：從中分離鑒定了5個(gè)化合物，分別為：15-hydroxydehydroabietic acid（1），15-hydroxylabd-8（17）-en-19-oic acid（2），junicedric acid（3），β-谷甾醇（4），胡蘿卜苷（5）。結(jié)論：除化合物（1）外均首次從該植物中分離得到。

思茅松；松塔；化學(xué)成分；萜類

思茅松（Pinus kesiya R.）松塔為松科（Pinaceae）松屬（Pinus）植物的球果，可入藥。經(jīng)體內(nèi)、體外藥理研究表明，松屬植物的松塔提取物有抗腫瘤、抗HIV、抗氧化、抗菌等作用〔1-5〕。思茅松主產(chǎn)于云南思茅、德宏、臨滄、西雙版納等地，現(xiàn)在已經(jīng)引種栽培至大理、紅河、文山、楚雄、昆明等地區(qū)，資源十分豐富?，F(xiàn)階段對(duì)思茅松的研究利用較少，其松塔常被當(dāng)作燃料燒掉。前期我們對(duì)思茅松的化學(xué)成分進(jìn)行了初步研究并進(jìn)行了報(bào)道〔6-7〕，本文繼續(xù)報(bào)道從中分離鑒定的5個(gè)化合物，為深入研究思茅松松塔的化學(xué)成分提供理論依據(jù)。

1 儀器與材料

1.1儀器與試劑瑞士Büchi R-210型旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀；Bruker AM-400型核磁共振儀；柱色譜硅膠（80～100目，100～200目，200～300目）及薄層色譜硅膠GF254（青島海洋化工廠）；Sephadex LH-20（Phar?macia公司）；其他化學(xué)試劑均為工業(yè)純。

1.2試驗(yàn)材料樣品采自云南省思茅市，由大理學(xué)院藥學(xué)與化學(xué)學(xué)院周濃副教授鑒定為思茅松，樣品標(biāo)本保存于大理學(xué)院藥學(xué)與化學(xué)學(xué)院生藥學(xué)教研室。

2 提取與分離

思茅松松塔干燥，粉碎，取樣8 kg用95%乙醇在室溫條件下冷浸提取3次，每次48 h；合并3次提取液濃縮回收乙醇，加蒸餾水分散，依次用石油醚、乙酸乙酯、正丁醇萃取，得石油醚組分（40 g）、乙酸乙酯組分（100 g）、正丁醇組分（77 g）。取乙酸乙酯萃取組分經(jīng)硅膠柱層析，用石油醚：丙酮梯度洗脫（v∕v=20：1，10：1，8：2，7：3，5：5），得到5個(gè)流分FrA-E。流分FrD和FrE中析出沉淀，經(jīng)重結(jié)晶得化合物（5）（100 mg）。流分FrB共26 g，經(jīng)硅膠柱層析，用石油醚：乙酸乙酯梯度洗脫（v∕v=10：1，9：1，8：2，7：3，6：4，5：5），得流分：FrB1-B6；FrB2有沉淀析出，經(jīng)重結(jié)晶得化合物（4）（40 mg）；流分FrB3、FrB6經(jīng)Sephadex LH-20（氯仿：甲醇=1：1）柱層析，反復(fù)硅膠柱層析（流動(dòng)相：環(huán)己烷∕乙酸乙酯、環(huán)己烷∕異丙醇、氯仿∕丙酮等）得化合物（1）（70 mg）、化合物（2）（120 mg）、化合物（3）（32 mg）。

3 結(jié)構(gòu)鑒定

化合物1：白色粉末，易溶于丙酮；C20H28O3；1H NMR（400 MHz，CD3COCD3）δ：7.26（1H，s，H-11），7.22（1H，s，H-12），7.20（1H，s，H-14），2.88（2H，m，H-7），2.38（1H，d，J=12 Hz，H-1a），2.21（1H，d，J=9.3 Hz，H-5），1.67～1.90（6H，m，H-2，3，6），1.54（1H，m，H-1b），1.50（3H，s，H-16），1.50（3H，s，H-17），1.30（3H，s，H-19），1.22（3H，s，H-20）.13C NMR（100 MHz，CD3COCD3）δ：39.0（t，C-1），19.3（t，C-2），37.6（t，C-3），47.7（s，C-4），46.0（d，C-5），22.5（t，C-6），31.0（t，C-7），134.8（s，C-8），148.2（s，C-9），37.5（s，C-10），123.1（d，C-11），124.6（d，C-12），148.1（s，C-13），125.9（d，C-14），71.8（s，C-15），32.6（q，C-16），32.6（q，C-17），179.8（s，C-18），16.9（q，C-19），25.4（q，C-20）。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)〔8〕對(duì)照基本一致，故鑒定該化合物為15-hydroxydehy-droabietic acid。

化合物2：黃色油狀物，易溶于氯仿；C20H34O3；1H NMR（400 MHz，CDCl3）δ：4.83（1H，s，H-17a），4.49（1H，s，H-17b），3.66（2H，m，H-15），1.23（3H，s，H-18），0.89（3H，d，J=6.4 Hz，H-16），0.59（3H，s，H-20）.13C NMR（100 MHz，CDCl3）δ：39.2（t，C-1），20.0（t，C-2），36.4（t，C-3），44.2（s，C-4），56.4（d，C-5），26.1（t，C-6），38.0（t，C-7），148.3（s，C-8），56.6（d，C-9），40.6（s，C-10），21.1（t，C-11），39.3（t，C-12），30.3（d，C-13），38.8（t，C-14），61.0（t，C-15），19.9（q，C-16），106.4（t，C-17），29.1（q，C-18），183.4（s，C-19），12.8（q，C-20）。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)〔9〕對(duì)照基本一致，故鑒定該化合物為15-hy?droxylabd-8（17）-en-19-oic acid。

化合物3：黃色油狀物，易溶于氯仿；C20H32O4；1H NMR（400 MHz，CDCl3）δ：4.83（1H，s，H-17a），4.49（1H，s，H-17b），1.24（3H，s，H-18），0.85（3H，d，J=5.6 Hz，H-16），0.58（3H，s，H-20）.13C NMR（100 MHz，CDCl3）δ：39.1（t，C-1），19.9（t，C-2），37.9（t，C-3），44.3（s，C-4），56.4（d，C-5），26.0（t，C-6），38.8（t，C-7），148.0（s，C-8），56.4（d，C-9），40.6（s，C-10），21.4（t，C-11），36.2（t，C-12），30.9（d，C-13），41.5（t，C-14），180.1（s，C-15），20.3（q，C-16），106.5（t，C-17），29.0（q，C-18），184.5（s，C-19），12.8（q，C-20）。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)〔10〕對(duì)照基本一致，故鑒定該化合物為junicedric acid。

化合物4：白色針晶，易溶于氯仿；TLC多個(gè)展開(kāi)體系與β-谷甾醇對(duì)照品Rf值一致，混合點(diǎn)樣展開(kāi)為單一斑點(diǎn)，故鑒定該化合物為β-谷甾醇。

化合物5：白色粉末，易溶于甲醇，TLC多個(gè)展開(kāi)體系與胡蘿卜苷對(duì)照品Rf值一致，混合點(diǎn)樣展開(kāi)為單一斑點(diǎn)，故鑒定該化合物為胡蘿卜苷。

〔1〕SAKAGAMI H，KUSHIDA T，OIZUMI T，et al.Distribu?tion of lignin-carbohydrate complex in plant kingdom and its functionality as alternative medicine〔J〕.Pharmacology &Therapeutics，2010，128（1）：91-105.

〔2〕SüNTAR I，TUMEN I，USTüN O，et al.Appraisal on the wound healing and anti-inflammatory activities of the es?sential oils obtained from the cones and needles of Pinus species by in vivo and in vitro experimental models〔J〕. Journal of Ethnopharmacology，2011，139（2）：533-540.

〔3〕SAKAGAMI H，HASHIMOTO K，SUZUKI F，et al.Mo?lecular requirements of lignin-carbohydrate complexes for expression of unique biological activities〔J〕.Phytochemis?try，2005，66（17）：2108-2120.

〔4〕張宇，王莉，傅宇明，等.樟子松松塔抗氧化及抗炎作用研究〔J〕.時(shí)珍國(guó)醫(yī)國(guó)藥，2010，21（6）：1549.

〔5〕劉光明，呂永俊，李好枝，等.云南松松塔中抗HIV活性成分的研究初報(bào)〔J〕.大理學(xué)院學(xué)報(bào)，2009，8（2）：69-71.

〔6〕施貴榮，馬慧敏，鄧應(yīng)飛，等.思茅松不同部位莽草酸含量的HPLC測(cè)定〔J〕.中國(guó)實(shí)驗(yàn)方劑學(xué)雜志，2013，19（10）：109-111.

〔7〕施貴榮，李冬梅，劉熙，等.思茅松松塔化學(xué)成分的初步研究〔J〕.大理學(xué)院學(xué)報(bào)，2013，12（9）：4-6.

〔8〕CHEUNG H T A，MIYASE T，LENGUYEN M P，et al. Further acidic constituents and neutral components of Pinus massoniana Resin〔J〕.Tetrahedron，1993，49（36）：7903-7915.

〔9〕KUO Y H，YU M T.Three Labdane-Type Diterpenes from the Bark of Juniperus foemosana Hay.var.concolor Hay〔J〕. Chem.Pharm.Bull，1996，44（6）：1242-1244.

〔10〕SU W C，F(xiàn)ANG J M，CHENG Y S.Diterpenoids from Leaves of Cryptomeria Japonica〔J〕.Phytochemistry，1996，41（1）：255-261.

（責(zé)任編輯 李 楊）

Chemical Constituents from Pinecone of Pinus kesiya R.

SHI Guirong1，GUO Meixian1，LI Dongmei1，LIU Xi1，YANG Jing2，LIU Guangming1
（1.College of Pharmacy and Chemistry，Dali University，Dali，Yunnan 671000，China；2.Dali Prefecture Institute for Food and Drug Control，Dali，Yunnan 671000，China）

Objective：To study the chemical constituents from pinecone of Pinus kesiya R.Methods：The constituents were extracted with 95%ethanol，isolated and purified by column chromatography with silica gel，Sephadex LH-20 and recrystallization. Then their structures were elucidated on the basis of spectroscopic data.Results：Five compounds were isolated and identified as 15-hydroxydehydroabietic acid（1），15-hydroxylabd-8（17）-en-19-oic acid（2），junicedric acid（3），β-sitosterol（4），and daucosterol（5）.Conclusion：This is the first report on the compounds 2-4 from Pinus kesiya R.

Pinus kesiya R.；pinecone；chemical constituents；terpenoids

R284

A

1672-2345（2014）02-0001-02

10.3969∕j.issn.1672-2345.2014.02.001

云南省教育廳科研基金資助項(xiàng)目（2013Y514）；國(guó)家自然科學(xué)基金資助項(xiàng)目（81260632）

2013-12-24

2014-01-04

施貴榮，實(shí)驗(yàn)師，主要從事民族藥物研究.