徐向勇 劉顯暢 李正峰 祝成亮

1.武漢鋼鐵（集團(tuán)）第二職工醫(yī)院心內(nèi)科，湖北武漢430085；2.武漢市兒童醫(yī)院，湖北武漢430080；3.武漢大學(xué)人民醫(yī)院檢驗(yàn)科，湖北武漢430060

高爾基體蛋白聯(lián)合甲胎蛋白檢測(cè)在原發(fā)性肝癌早期診斷中的價(jià)值

徐向勇1劉顯暢1李正峰2祝成亮3

1.武漢鋼鐵（集團(tuán)）第二職工醫(yī)院心內(nèi)科，湖北武漢430085；2.武漢市兒童醫(yī)院，湖北武漢430080；3.武漢大學(xué)人民醫(yī)院檢驗(yàn)科，湖北武漢430060

目的探討血清高爾基體蛋白73（GP73）、甲胎蛋白（AFP）聯(lián)合檢測(cè)對(duì)原發(fā)性肝癌（PHC）早期診斷中的作用。方法選取2007年7月～2012年7月武漢鋼鐵（集團(tuán)）第二職工醫(yī)院PHC患者76例（PHC組）、肝硬化患者53例（肝硬化組）和正常人群50例（對(duì)照組），采用酶偶聯(lián)吸附法和化學(xué)發(fā)光免疫分析法進(jìn)行血清GP73、AFP檢測(cè)，分析兩者單獨(dú)及聯(lián)合檢測(cè)在早期診斷PHC中的價(jià)值。結(jié)果①PHC組患者血清GP73[（208.3±53.6）μg/L]、AFP [（871.2±497.6）μg/L]明顯高于肝硬化組[（74.8±26.4）、（91.7±68.5）μg/L]和對(duì)照組[（31.6±7.7）、（12.7±7.9）μg/L]，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。②PHC組患者血清GP73和AFP陽(yáng)性檢出率[81.6%（62/76）、63.2%（48/76）]分別高于肝硬化組[15.1%（8/53）、17.0%（9/53）]和對(duì)照組[0.0%（0/50）、0.0%（0/50）]，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。③聯(lián)合檢測(cè)對(duì)PHC診斷靈敏度[96.1%（73/76）]高于GP73和AFP單項(xiàng)檢測(cè)[81.6%（62/76）、63.2%（48/76）]，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）；而檢測(cè)的特異性與單項(xiàng)檢測(cè)相比差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。結(jié)論P(yáng)HC患者血清中GP73和AFP水平較高，兩者聯(lián)合檢測(cè)可以顯著提高對(duì)PHC早期診斷的能力。

高爾基體蛋白；甲胎蛋白；原發(fā)性肝癌；診斷

原發(fā)性肝癌（PHC）是全球第六位常見(jiàn)的惡性腫瘤，是第三位常見(jiàn)的腫瘤相關(guān)死亡原因[1-2]。甲胎蛋白（AFP）是目前最重要的也是臨床使用最頻繁的肝癌標(biāo)記物[3-4]，但AFP正常不能排除肝癌，有18%～20%的PHC患者特別是老年人血清AFP正常[5]，故需要結(jié)合臨床及其他檢測(cè)指標(biāo)做出正確診斷。高爾基體跨膜糖蛋白73（GP73）系列相關(guān)研究，證實(shí)GP73是肝癌早期診斷和術(shù)后復(fù)發(fā)病情評(píng)估的理想血清標(biāo)記物，敏感性、特異性高于AFP[6]。本研究通過(guò)測(cè)量患者血清GP73和AFP水平，探討聯(lián)合檢測(cè)在PHC早期診斷中的意義，為臨床預(yù)防和治療提供科學(xué)依據(jù)，現(xiàn)報(bào)道如下：

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2007年7月～2012年7月來(lái)武漢鋼鐵（集團(tuán)）第二職工醫(yī)院（以下簡(jiǎn)稱“我院”）心內(nèi)科住院治療76例PHC患者作為PHC組，男47例，女29例，平均年齡（47.4±11.5）歲；經(jīng)影像及肝組織病理檢測(cè)確診為PHC，且住院前未接受相關(guān)治療。肝硬化組選擇同期住院的53例肝硬化患者，男33例，女20例，平均年齡（45.7±9.6）歲；患者經(jīng)臨床、CT聯(lián)合檢查確診為肝硬化，排除肝占位相關(guān)疾病。對(duì)照組為來(lái)我院體檢中心體檢的50名健康人群，男29名，女21名，平均年齡（43.1±10.7）歲。三組年齡、性別構(gòu)成比一般資料比較，差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），具有可比性。研究對(duì)象均自愿簽署知情同意書(shū)。

1.2 檢測(cè)方法

三組研究對(duì)象均于清晨空腹肘靜脈取血5 mL，雙盲編號(hào)，離心后收集血清，置于-40℃冰箱保存?zhèn)溆谩P73采用酶偶聯(lián)吸附法（ELISA）檢測(cè)，試劑盒購(gòu)至康乃格公司，全自動(dòng)酶標(biāo)儀（美國(guó)熱電公司）測(cè)定A值。AFP采用全自動(dòng)化學(xué)發(fā)光分析系統(tǒng)檢測(cè)，儀器和試劑均購(gòu)至羅氏公司。所有操作嚴(yán)格按照試劑和儀器說(shuō)明書(shū)進(jìn)行。

1.3 判斷指標(biāo)

GP73的參考值為0～85.5 μg/L，當(dāng)≥85.5 μg/L時(shí)為陽(yáng)性；AFP參考值為0～200 μg/L，當(dāng)≥200 μg/L時(shí)為診斷PHC臨界值[7]。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

采用統(tǒng)計(jì)軟件SPSS 19.0對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行分析，正態(tài)分布計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（x±s）表示，兩獨(dú)立樣本的計(jì)量資料采用t檢驗(yàn)。計(jì)數(shù)資料以率表示，采用χ2檢驗(yàn)。以P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 三組血清GP73和AFP水平檢測(cè)結(jié)果對(duì)比

PHC組患者血清GP73[（208.3±53.6）μg/L]、AFP [（871.2±497.6）μg/L]明顯高于肝硬化組[（74.8±26.4）、（91.7±68.5）μg/L]和對(duì)照組[（31.6±7.7）、（12.7±7.9）μg/L]，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。見(jiàn)表1。

2.2 三組血清GP73和AFP陽(yáng)性檢測(cè)率比較

PHC組患者血清GP73和AFP陽(yáng)性檢出率[81.6%（62/76）、63.2%（48/76）]分別高于肝硬化組[15.1%（8/53）、17.0%（9/53）]和對(duì)照組[0.0%（0/50）、0.0%（0/50）]，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。見(jiàn)表2。

表1 三組血清GP73和AFP水平檢測(cè)結(jié)果比較（μg/L，x±s）

表2 三組血清GP73和AFP陽(yáng)性檢測(cè)率比較[n（%）]

2.3 GP73和AFP單項(xiàng)檢測(cè)及聯(lián)合檢測(cè)對(duì)PHC診斷價(jià)值比較

聯(lián)合檢測(cè)對(duì)PHC診斷靈敏度[96.1%（73/76）]高于GP73和AFP單項(xiàng)檢測(cè)[81.6%（62/76）、63.2%（48/76）]，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）；而檢測(cè)的特異性與單項(xiàng)檢測(cè)相比差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。見(jiàn)表3。

表3 GP73和AFP單項(xiàng)檢測(cè)及聯(lián)合檢測(cè)靈敏度和特異性對(duì)比

3 討論

PHC是全球第六位常見(jiàn)的惡性腫瘤，也是第三位常見(jiàn)的腫瘤相關(guān)死亡原因。PHC通常為生長(zhǎng)緩慢、潛伏期長(zhǎng)，肝癌的預(yù)后非常不好，主要原因在于當(dāng)發(fā)現(xiàn)肝癌時(shí)，大多數(shù)已經(jīng)處于中末期[8-9]，而處于初始階段尤其是肝功能良好、癌細(xì)胞沒(méi)有轉(zhuǎn)移時(shí)預(yù)后較好。日本有報(bào)道這種患者的5年生存率在89%～93%（外科切除）和71%（經(jīng)皮治療）[10]。所以在早期階段發(fā)現(xiàn)PHC對(duì)患者的預(yù)后至關(guān)重要，臨床急切需要敏感的PHC標(biāo)記物，用來(lái)診斷早期階段PHC和觀察對(duì)治療的反映以及監(jiān)測(cè)切除術(shù)后的復(fù)發(fā)情況。血清AFP是目前最重要的也是臨床使用最頻繁的PHC標(biāo)記物[11-12]，AFP常用于PHC臨床輔助診斷及高危人群的篩查。持續(xù)1個(gè)月以上AFP＞500 μg/L，并能排除妊娠、活動(dòng)性肝炎、睪丸癌或卵巢畸胎瘤等，基本可確診為PHC。AFP也用于PHC的治療效果及預(yù)后評(píng)估，PHC徹底切除后，血清中的AFP濃度將迅速下降，1周內(nèi)可降至正常水平[13]。若增高則可能復(fù)發(fā)，其增高比肝功能異常出現(xiàn)得更早。但AFP正常不能排除肝癌，有18%～20%的PHC患者特別是老年人血清AFP正常故需要結(jié)合臨床及其他檢測(cè)指標(biāo)做出正確診斷[14]，且它的敏感性一直不高，文獻(xiàn)報(bào)道，診斷肝癌的敏感性為40%～69%。其次，在其他一些疾病中也有AFP高于臨界值的報(bào)道[15-16]。

近年來(lái)的研究發(fā)現(xiàn)，GP73是一種新型的標(biāo)志物。Shi等[17]研究發(fā)現(xiàn)GP73對(duì)肝癌具有較高的診斷效率，其ROC曲線的AUC達(dá)到了0.94，高于AFP（AUC=0.79）（P＜0.01），若將GP73的診斷界值設(shè)置為8.5 RU，其診斷敏感性為74.6%，特異性為97.4%；而AFP在35 ng/mL的界值處，診斷敏感性僅為58.2%，特異性為85.3%。最重要的是，在AFP為陰性（＜35 ng/mL）的326例肝癌患者中，有218例GP73呈陽(yáng)性；在GP73為陰性（＜8.5 RU）的200例肝癌患者中，AFP陽(yáng)性的患者高達(dá)92例[18]。這提示，二者在肝癌的診斷上可能存在互補(bǔ)作用。本研究采用GP73聯(lián)合AFP檢測(cè)結(jié)果發(fā)現(xiàn)PHC組患者血清GP73、AFP、明顯高于肝硬化組和對(duì)照組（P＜0.05），該組患者血清GP73和AFP陽(yáng)性檢出率分別高于肝硬化組和對(duì)照組（P＜0.05），說(shuō)明PHC患者具有較高的血清GP73、AFP水平和檢測(cè)陽(yáng)性率，提示兩者存在作為PHC標(biāo)記物的可能。對(duì)GP73和AFP單項(xiàng)檢測(cè)及聯(lián)合檢測(cè)結(jié)果對(duì)比后發(fā)現(xiàn)，聯(lián)合檢測(cè)的靈敏度為96.1%，遠(yuǎn)高于單項(xiàng)檢測(cè)的兩組，而檢測(cè)的特異性與單項(xiàng)檢測(cè)相比差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，由此說(shuō)明兩者聯(lián)合檢測(cè)具有較高的互補(bǔ)性，避免早期PHC診斷過(guò)程中出現(xiàn)漏診，為臨床治療提供更為可靠的參考。

綜上所述，GP73與AFP聯(lián)合檢測(cè)可以為PHC早期診斷提供更有效的方法。但是本研究樣本數(shù)量有限，還需要進(jìn)一步擴(kuò)大樣本量進(jìn)行深入研究。

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Value of GP73 and AFP in early diagnosis of primary liver cancer

XU Xiangyong1LIU Xianchang1LI Zhengfeng2ZHU Chengliang3
1.Department of Cardiology,the Second Worker's Hospital of WISCO,Hubei Province,Wuhan430085,China; 2.Children's Hospital of Wuhan City,Hubei Province,Wuhan430080,China;3.Department of Clinical Laboratory, Renmin Hospital of Wuhan University,Hubei Province,Wuhan430060,China

Objective To explore the clinical value of combined detection of serum GP73,AFP in the early diagnosis of primary liver cancer(PHC).Methods 76 cases of PHC,53 cases of liver cirrhosis,50 cases of normal people from July 2007 to July 2012 in the Second Worker's Hospital of WISCO were selected as PHC group,liver cirrhosis group and control group respectively,the enzyme coupling adsorption method and chemiluminesent lmmunoassay assay were used to detect the serum GP73,AFP,the value of single and combined detection in early diagnosis of PHC were analyzed. Results①The serum GP73,AFP in PHC group[(208.3±53.6),(871.2±497.6)μg/L]were higher than those in liver cirrhosis group[(74.8±26.4),(91.7±68.5)μg/L]and control group[(31.6±7.7),(12.7±7.9)μg/L],the differences were statistically significant(P＜0.05).②Positive detection rate of serum GP73 and AFP in PHC group[81.6%(62/76), 63.2%(48/76)]were higher than those in liver cirrhosis group[15.1%(8/53),17.0%(9/53)]and control group[0.0%(0/50), 0.0%(0/50)],the differences were statistically significant(P＜0.05).③PHC diagnosis sensitivity by combined detection [96.1%(73/76)]was higher than that by GP73 and AFP single detection[81.6%(62/76),63.2%(48/76)],the differences were statistically significant(P＜0.05).The differences of PHC diagnosis specificity between combined detection and GP73 and AFP single detection was not statistically significant(P＞0.05).Conclusion PHC patients have a higher GP73 and AFP levels,the combined detection can significantly improve the diagnosis of early PHC.

GP73;Alpha fetal protein;Primary hepatic carcinoma;Diagnose

R735.7

B

1673-7210（2014）01（a）-0083-03

2013-10-16本文編輯：李繼翔）

國(guó)家自然科學(xué)基金項(xiàng)目（編號(hào)81101485）。