朱林燕，孔子銘，韓泳平

·炮制制劑·

藏藥二十一味寒水石丸的定性鑒別

朱林燕，孔子銘，韓泳平

目的：建立藏藥二十一味寒水石丸的定性鑒別方法。方法：采用薄層色譜法對(duì)制劑中訶子、藏木香、木香和牛黃進(jìn)行了薄層色譜鑒別。結(jié)果：在薄層色譜中均能檢測(cè)出訶子、木香、藏木香、牛黃四味藥材，薄層色譜斑點(diǎn)清晰，陰性對(duì)照品溶液無(wú)干擾。結(jié)論：本文所建立的方法靈敏、可靠，專屬性強(qiáng)，可為二十一味寒水石丸的質(zhì)量控制提供一定的依據(jù)。

]藏藥；二十一味寒水石丸；薄層色譜

藏藥二十一味寒水石丸為藏醫(yī)臨床常用藥，用于治療“培根木布”引起的各種胃炎、胃潰瘍等疾病，具有健脾和胃、理氣止痛、活血祛瘀，制酸、止痛，愈潰瘍等功效[1～2]。處方由寒水石、渣馴膏、波棱瓜子、止瀉木子、木瓜、紫檀香、石榴子、豆蔻子、牛黃、甘青青蘭、蓮座虎耳草、綠絨蒿、余甘子、榜嘎、沙棘膏、蓽菝、獐牙菜、藏木香、塞北紫堇、木香、訶子等21味藥材組成。由于藏醫(yī)的用藥習(xí)慣和發(fā)展水平，加之處方組成本身比較復(fù)雜，因此針對(duì)二十一味寒水石丸能夠保證療效、符合現(xiàn)代要求的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)尚未建立。

為保證制劑臨床應(yīng)用的安全性和有效性，考慮到方中訶子[3]、木香[4]、藏木香[5]和牛黃[6]等藥材活性較強(qiáng)，且與復(fù)方的臨床應(yīng)用相關(guān)，因此本文建立了針對(duì)上述藥材的薄層鑒別方法。本文的研究為該制劑質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的建立提供了較為可靠的依據(jù)。

1 儀器和試藥

METTLEB TOLEDO AE240 電子分析天平（梅特勒-托利多儀器（上海）有限公司）；KQ-250B型超聲波清洗器（昆山市超聲儀器有限公司）；DZF-6065型真空干燥箱（上海一恒科技有限公司）；紫外燈（北京智源通生物技術(shù)研究所）；硅膠G（青島海洋化工集團(tuán)有限公司）。

試驗(yàn)中所用對(duì)照品均購(gòu)自中國(guó)藥品生物制品檢定所，沒食子酸對(duì)照品（批號(hào)：0831-9501）；木香烴內(nèi)酯對(duì)照品（批號(hào)：111524-200503）；去氫木香內(nèi)酯對(duì)照品（111525-200505）；烏頭堿對(duì)照品(批號(hào)：110720-200410）；膽酸對(duì)照品（批號(hào)：100078-200414）；藏木香對(duì)照藥材（批號(hào)：8821-0338）；二十一味寒水石丸（由阿壩藏族羌族自治州藏醫(yī)院提供，批號(hào)：20120712）。試劑乙醇、異辛烷、乙酸乙酯、冰乙酸、甲苯、氯仿、環(huán)己烷、正己烷、甲酸、硫酸等為分析純，均購(gòu)自成都恒力化玻實(shí)驗(yàn)儀器經(jīng)營(yíng)部。

2 方法與結(jié)果

2.1 薄層色譜鑒別

2.1.1訶子 取本品粉末2 g，加乙醇10 mL，超聲處理30分鐘，濾過(guò)處理后，水浴上蒸干，殘?jiān)砸掖? mL溶解后作為供試品溶液。另取沒食子酸對(duì)照品,以乙醇制成濃度為0.5 mg．mL-1的溶液作為對(duì)照品溶液。再取缺訶子的陰性藥材2 g，按照上述方法制成缺訶子的陰性樣品溶液。

按照《中國(guó)藥典》（一部）附錄ⅥB進(jìn)行試驗(yàn)，分別移取供試品溶液、沒食子酸對(duì)照品溶液、缺訶子的陰性樣品溶液4 μL點(diǎn)于同一硅膠G板上進(jìn)行薄層展開，展開系統(tǒng)為三氯甲烷-乙酸乙酯-甲酸(6:4:：1)，展開，取出，晾干，噴以2 %三氯化鐵乙醇試液為顯色劑。置紫外光燈(365 nm)下檢視。結(jié)果顯示，供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的熒光斑點(diǎn)，而缺訶子的陰性樣品無(wú)干擾，見圖1。

圖1 二十一味寒水石丸訶子的TLC鑒別

2.1.2 木香 取本品粉末2 g，加氯仿10 mL，超聲處理30分鐘，濾過(guò)，濾液濃縮至約1 mL，作為供試品溶液。另取去氫木香內(nèi)酯、木香烴內(nèi)酯對(duì)照品，以氯仿制成濃度為0.5 mg．mL-1的溶液作為對(duì)照品溶液。取缺木香的陰性藥材2 g，按照上述方法制備成缺木香的陰性樣品溶液。按照《中國(guó)藥典》（一部）附錄ⅥB進(jìn)行試驗(yàn)，分別移取供試品溶液、去氫木香內(nèi)酯對(duì)照品溶液、木香烴內(nèi)酯對(duì)照品溶液、缺木香的陰性樣品溶液4 μL點(diǎn)于同一硅膠G板上進(jìn)行薄層展開，以氯仿-環(huán)己烷（5:1）為展開劑展開，取出，晾干，噴以1%香草醛乙醇試液為顯色劑。在105 ℃加熱至斑點(diǎn)顯色清晰。結(jié)果表明，供試品與對(duì)照品相近位置顯相同顏色的熒光斑點(diǎn)，而缺木香的陰性樣品無(wú)干擾，見圖2。

圖2 二十一味寒水石丸樣品木香TLC鑒別

2.1.3 藏木香 取藏木香對(duì)照藥材0.5 g，加氯仿10 mL，超聲5分鐘，濾過(guò)，濾液濃縮至1 mL作為對(duì)照藥材溶液。取本品粉末3 g，加氯仿15 mL，超聲處理30分鐘，濾過(guò)，濾液濃縮至1 mL作為供試品溶液。取缺藏木香藥材的陰性樣品3 g，同樣的制備方法制成缺藏木香藥材的陰性樣品溶液。

按照《中國(guó)藥典》（一部）附錄ⅥB進(jìn)行試驗(yàn)，分別移取供試品溶液、藏木香對(duì)照藥材溶液、缺藏木香的陰性樣品溶液4 μL點(diǎn)于同一硅膠G板上進(jìn)行薄層展開，以氯仿－環(huán)己烷(5:1)為展開劑展開，取出，晾干，噴以5%香草醛硫酸溶液，在105 ℃加熱至斑點(diǎn)顯色清晰。供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上顯相同顏色斑點(diǎn)。缺藏木香的陰性樣品無(wú)干擾，見圖3。

圖3 二十一味寒水石丸樣品藏木香TLC鑒別

2.1.4 牛黃 取本品粉末2 g，加氯仿10 mL，超聲處理30分鐘，濾過(guò)，濾液濃縮蒸干加1 mL乙醇溶液溶解，作為供試品溶液。取膽酸對(duì)照品，以乙醇制成濃度為0.5 mg．mL-1的溶液作為對(duì)照品溶液。取缺牛黃的陰性藥材2 g，同法制成缺牛黃的陰性樣品溶液。按照《中國(guó)藥典》（一部）附錄ⅥB進(jìn)行試驗(yàn)，分別移取供試品溶液、膽酸對(duì)照品溶液、缺牛黃的陰性樣品溶液4 μL點(diǎn)于同一硅膠G板上進(jìn)行薄層展開，以異辛烷-乙酸乙酯-冰醋酸（15:7:5）為展開劑，展開，取出，晾干，噴以10%硫酸乙醇試液為顯色劑。在105 ℃加熱至斑點(diǎn)顯色清晰。結(jié)果顯示，供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的熒光斑點(diǎn)，而缺牛黃的陰性樣品無(wú)干擾，見圖4。

圖4 二十一味寒水石丸樣品牛黃TLC鑒別

3 討論

本文研究主要采用薄層色譜方法對(duì)二十一味寒水石丸中的訶子、木香、藏木香、牛黃等藥材進(jìn)行鑒別。所建立的方法重現(xiàn)性好、可操作性強(qiáng)。實(shí)驗(yàn)表明，在薄層層析之前薄層板應(yīng)進(jìn)行預(yù)飽和，以防止斑點(diǎn)的擴(kuò)散及產(chǎn)生邊緣效應(yīng)，從而達(dá)到更好的分離效果。通過(guò)TLC實(shí)驗(yàn)，制定了訶子、木香、藏木香、牛黃等藥材的薄層色譜鑒別方法，特征斑點(diǎn)明顯，色譜分離清晰，可用作制劑中訶子、木香、藏木香、牛黃等的專屬性鑒別。本文的研究結(jié)果可為二十一味寒水石丸質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的制定提供依據(jù)。

[1] 西藏、青海等衛(wèi)生局. 二十一味寒水石丸. 藏藥標(biāo)準(zhǔn)(第一版), 1978: 114.

[2] 羅布藏,旦增. 藏藥二十一味寒水石丸治療消化系潰瘍病50例臨床報(bào)告[J].中國(guó)民族醫(yī)藥雜志,1997,3 (2):11.

[3] 劉芳,秦紅飛,劉松青.訶子化學(xué)成分與藥理活性研究進(jìn)展[J].中國(guó)藥房,2012,23(7):670.

[4] 王永兵,王強(qiáng),毛福林,等.木香的藥效學(xué)研究[J].中國(guó)藥科大學(xué)學(xué)報(bào),2001,32(2):66.

[5] 張婷.藏木香和云木香化學(xué)成分及生物活性研究[D].北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院博士論文,2011.

[6] 閆煥,趙文靜,常惟智.牛黃的藥理作用及臨床應(yīng)用研究進(jìn)展[J].中醫(yī)藥信息,2013,30(2),114.

（責(zé)任編輯：何瑤）

The qualitative identifcation of Tibetan medicine Ershiyiwei Hanshuishi pill/

ZHU Lin-yan,KONG Zi-ming, HAN Yong-ping//(Southwest University for Nationalities, Chengdu 610041, Sichuan)

Objective: To establish the method of qualitative identifcation of Ershiyiwei Hanshuishi pill. Method: Thin-layer chromatography (TLC) was used to identify Hezi, Zangmuxiang, Muxiang and Niuhuang. Result: Hezi, Zangmuxiang, Muxiang and Niuhuang were detected by TLC. The spots in chromatogram were clear, and no disturb could be found in negative sample. Conclusion: The method is sensitive, reliable and specifc, and can be used for quality control of Ershiyiwei Hanshuishi pill.

Tibetan medicine; Ershiyiwei Hanshuishi pill; TLC

R 283.6

A

1674-926X(2014)02-017-03

國(guó)家科技部十二五支撐計(jì)劃資助(2012BAI27B07)；西南民族大學(xué)研究生創(chuàng)新型科研項(xiàng)目資助(CX2014SP262)

西南民族大學(xué)，四川 成都 610041

朱林燕（1990-），女，湖南汝城人，在讀研究生， 研究方向：民族藥物化學(xué)

韓泳平，教授，碩士生導(dǎo)師

Tel:(028)85522315 Email:yphan65@tom.com

2013-10-08