胡志輝等

摘 要：以在食用菌培養(yǎng)基中最常見的3種菌（大腸桿菌、枯草芽孢桿菌、黑曲霉菌）作為消毒滅菌試驗(yàn)對(duì)象，用過氧化苯甲酰和微波及二者聯(lián)合進(jìn)行消毒滅菌效果試驗(yàn)，以檢測(cè)其消毒滅菌效果。試驗(yàn)結(jié)果表明，隨著微波時(shí)間的增加，菌的數(shù)量逐漸減少，微波時(shí)間為120 s時(shí)大腸桿菌全部被殺死，160 s時(shí)黑曲霉全部被殺死，180 s時(shí)枯草芽孢桿菌全部被殺死；隨著過氧化苯甲酰濃度的升高，3種菌的數(shù)量均在減少，大腸桿菌與黑霉菌在濃度為10 000 mg/L時(shí)全部被殺死，枯草芽孢桿菌在濃度為20 000 mg/L時(shí)全部被殺死；在微波與過氧化苯甲酰共同作用試驗(yàn)中選用最難殺滅的枯草芽孢桿菌作為試驗(yàn)菌種，在過氧化苯甲酰濃度為1 000 mg/L、微波90 s時(shí)全部被殺死。

關(guān)鍵詞：食用菌；微波時(shí)間；過氧化苯甲酰；消毒滅菌

中圖分類號(hào)：S646 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A 文章編號(hào)：1001-3547（2014）04-0063-04

隨著消毒學(xué)的發(fā)展，消毒方法日益增多，一般分為物理法、化學(xué)法與生物法三大類。目前在我國(guó)使用較多的物理法有加熱、過濾和各種輻射處理等；化學(xué)消毒法是利用化學(xué)藥物殺滅病原微生物；生物消毒法是利用一些生物來殺滅或去除病原微生物，其作用緩慢、效果有限。微波消毒滅菌是近年來發(fā)展較快的一項(xiàng)新技術(shù)，已在食品工業(yè)和醫(yī)藥衛(wèi)生領(lǐng)域的某些方面推廣應(yīng)用。本試驗(yàn)測(cè)定了微波不同作用時(shí)間下，食用菌3種常見雜菌的滅菌效率，并且與傳統(tǒng)的高壓蒸汽滅菌效果進(jìn)行比較。在一般生產(chǎn)中，與目前的蒸汽滅菌方法相比，高溫蒸汽滅菌[1]更節(jié)能、更快捷、更方便、更容易操作和控制[2～6]。

過氧化苯甲酰（Benzoyl Peroxide，BPO）為一種食品添加劑，主要用來使小麥粉增白，俗稱面粉增白劑。過氧化苯甲酰可釋放出原子態(tài)活性氧，破壞微生物新陳代謝相關(guān)酶的功能，使雜菌無法生存，因其具有殺菌防蟲作用，故有利于面粉保管和儲(chǔ)存[7]。本次試驗(yàn)主要采用過氧化苯甲酰作為滅菌的消毒劑，觀測(cè)過氧化苯甲酰的滅菌效率，并將其與微波滅菌的效率比較，以探索最佳的滅菌濃度，尋求最優(yōu)的滅菌方法。

1 材料與方法

1.1 菌種培養(yǎng)

①大腸桿菌的培養(yǎng) 取凍存的大腸桿菌涂布于牛肉膏蛋白胨平板上，37℃培養(yǎng)24～48 h，挑取光滑的磚紅色菌落接種至牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)液中，37℃振蕩培養(yǎng)18 h備用。

②黑曲霉菌的培養(yǎng) 取凍存的木霉菌涂布于馬鈴薯葡萄糖平板上，37℃培養(yǎng)24～48 h，挑取活性菌落接種至馬鈴薯葡萄糖培養(yǎng)液中，37℃振蕩培養(yǎng)18 h備用。

③枯草芽孢桿菌的培養(yǎng) 取凍存的枯草芽孢桿菌涂布于LB培養(yǎng)平板上，37℃培養(yǎng)24～48 h，挑取活性菌落接種至LB培養(yǎng)液中，37℃振蕩培養(yǎng)

18 h備用。

1.2 微波爐滅菌試驗(yàn)

每種液體培養(yǎng)基用500 mL，每種固體培養(yǎng)基用2 000 mL。

①菌原液數(shù)量測(cè)定 取3種菌液5 mL分置于3支試管中，靜置10 min后用稀釋平板計(jì)數(shù)法計(jì)數(shù)，方法如下。

a.編號(hào)。取無菌培養(yǎng)皿分別用記號(hào)標(biāo)明10-4、10-5、10-6各3套。另取6支盛有無菌水的試管，排于試管架上，依次標(biāo)明10-1、10-2、10-3、10-4、10-5、10-6。

b.倒平板。將牛肉膏蛋白胨瓊脂培養(yǎng)基融化后冷卻至45°C左右倒入無菌平板，凝固后，倒置于37℃恒溫箱中放置24 h，使其干燥備用。

c.稀釋。用1 mL無菌吸管精確地吸取1 mL菌體懸液放入10-1的試管中，吸吹3次使其均勻，依次配制濃度10-1、10-2、10-3、10-4、10-5、10-6的菌液。

d.取樣。用3支0.2 mL的無菌吸管分別從10-4、10-5、10-6的稀釋液取0.2 mL菌液，對(duì)號(hào)放入無菌平皿中。

e.涂布。用3支0.2 mL的無菌吸管分別從10-4、10-5、10-6的稀釋液中吸取0.2 mL菌液，再用無菌玻璃刮棒將菌液在平板上涂布均勻，放在實(shí)驗(yàn)臺(tái)上20～30 min，使菌液滲透于培養(yǎng)基 37℃倒置培養(yǎng)

24 h。

f.計(jì)數(shù)。培養(yǎng)24 h的平板進(jìn)行計(jì)數(shù)，算出同一稀釋度3個(gè)平板上的菌落平均數(shù)，每1 mL活菌總數(shù)=同一稀釋度3次重復(fù)的菌落平均數(shù)×稀釋倍數(shù)×5。

②取菌液 3種菌液中各取5 mL，分裝于10支試管中。

③密封 注意3種不同菌試管各用一種，保證每次作用強(qiáng)度一樣。微波爐小火強(qiáng)度分別作用各管20，40，60，80，100，120，140，160，180，200 s。滅菌完成后放置10 min，采用稀釋平板計(jì)數(shù)法計(jì)數(shù)。

④重復(fù)以上步驟3次 放到培養(yǎng)箱中培養(yǎng)

24 h以后，照相并且記錄數(shù)據(jù)。

1.3 過氧化苯甲酰消毒效果試驗(yàn)

①菌原液細(xì)菌數(shù)量測(cè)定 取菌液5 mL入試管，靜置10 min 搖勻后，用無菌吸管吸1 mL入試管，用稀釋平板計(jì)數(shù)法計(jì)數(shù)。

②消毒液作用 a.消毒液制備。稱取過氧化苯甲酰5，25，50，500，5 000，10 000 mg在500 mL容量瓶中分別配制10.0，50.0，100.0，1 000.0，10 000.0，

20 000.0 mg/L過氧化苯甲酰溶液。

b.從培養(yǎng)的3種菌液中各取5 mL分裝于6支試管中。

c.分別取10.0，50.0，100.0，1 000.0，10 000.0，

20 000.0 mg/L 6種濃度的過氧化苯甲酰對(duì)試管中的菌液進(jìn)行滅菌，作用10 min。

d.采用平板計(jì)數(shù)法計(jì)數(shù)。

e.重復(fù)以上步驟3次。

將平板放到培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24 h以后，取出照相并且記錄數(shù)據(jù)。

1.4 微波與氧化劑共同作用試驗(yàn)

根據(jù)微波滅菌和過氧化苯甲酰滅菌試驗(yàn)結(jié)果，選擇2種處理下都比較難滅的枯草芽孢桿菌對(duì)其進(jìn)行共同作用試驗(yàn)，并且觀察試驗(yàn)結(jié)果。

原菌液計(jì)數(shù)，取菌液5 mL入試管，靜置10 min 搖勻，用無菌吸管吸1 mL入試管，用稀釋平板計(jì)數(shù)法計(jì)數(shù)（方法如上）。

①消毒液處理 取菌液5 mL入試管分別編號(hào)，分別加入10.0，50.0，100.0，1 000.0，10 000.0， 20 000.0 mg/L 6種濃度的過氧化苯甲酰對(duì)試管中的菌液進(jìn)行滅菌，作用10 min（使用四氯化碳作為溶劑）。

②微波爐處理 密封后，放入微波爐中分別作用30，60，90，120，180 s，然后取出在無菌工作臺(tái)上用稀釋平板計(jì)數(shù)法計(jì)數(shù)。

將平板放到培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24 h，第二天取出照相并記錄數(shù)據(jù)。

2 結(jié)果與分析

2.1 微波作用對(duì)3種菌種的殺菌效果

試驗(yàn)結(jié)果（表1）顯示，微波20 s后大腸桿菌還剩（4.5±0.2）×109，黑曲霉菌還剩（2.9±0.1）×108，枯草芽孢桿菌還剩（5.5±0.3）×107；微波40 s后大腸桿菌還剩（4.6±0.3）×108，黑曲霉菌還剩（9.5±0.2）×107，枯草芽孢桿菌還剩（2.6±0.1）×107；微波60 s后大腸桿菌還剩（7.2±0.5）×106，黑曲霉菌還剩（3.8±0.4）×107個(gè)，枯草芽孢桿菌還剩（4.8±0.2）×106；微波80 s后大腸桿菌還剩（5.7±0.2）×106，黑曲霉菌還剩（1.8±0.4）×107個(gè)，枯草芽孢桿菌還剩（3.3±0.3）×106。

在微波爐滅菌的試驗(yàn)中，隨著微波時(shí)間的增加，菌的數(shù)量逐漸減少。微波時(shí)間為120 s時(shí)，大腸桿菌全部被殺死，160 s時(shí)黑曲霉菌全部被殺死，180 s時(shí)枯草芽孢桿菌全部被殺死，達(dá)到了徹底滅菌的效果。微波可使物質(zhì)中偶極子（如水分子）產(chǎn)生高頻運(yùn)動(dòng)，從而將存在的微生物殺滅。由于該法兼有熱和其他效應(yīng)，故其殺菌作用與紅外線加熱方法相比，具有作用溫度低、所需時(shí)間短等優(yōu)點(diǎn)。

2.2 不同濃度過氧化苯甲酰對(duì)枯草芽孢桿菌的殺菌效果

表2結(jié)果表明，過氧化苯甲酰濃度為10 mg/L時(shí)，大腸桿菌還剩（1.2±0.2）×108，黑曲霉菌還剩（2.1±0.3）×107，枯草芽孢桿菌還剩（5.0±0.1）×108；濃度為50 mg/L時(shí)，大腸桿菌還剩（4.0±0.2）×107，黑曲霉菌還剩（5.6±0.4）×106，枯草芽孢桿菌還剩（1.3±0.3）×108；濃度為100 mg/L時(shí)，大腸桿菌還剩（6.5±0.3）×106，黑曲霉菌還剩（3.3±0.2）×106，枯草芽孢桿菌還剩（5.4±0.2）×107。

試驗(yàn)結(jié)果顯示，隨著過氧化苯甲酰濃度的升高，3種菌的數(shù)量均減少。大腸桿菌與黑曲霉菌在濃度為10 000 mg/L時(shí)全部被殺死，枯草芽孢桿菌在濃度為20 000 mg/L時(shí)全部被殺死，同樣達(dá)到了徹底滅菌的效果。

2.3 過氧化苯甲酰和微波共同作用對(duì)3種菌種的殺菌效果

在微波與過氧化苯甲酰共同作用試驗(yàn)中選用最難殺滅的枯草芽孢桿菌作為試驗(yàn)菌種，試驗(yàn)結(jié)果（表3）表明，當(dāng)過氧化苯甲酰濃度為1 000 mg/L、微波90 s時(shí)枯草芽孢桿菌全部殺滅，達(dá)到了徹底滅菌的效果。相比于上述單一的滅菌方法，二者共同作用下明顯提高了滅菌效率。

3 結(jié)論與討論

食用菌培養(yǎng)料消毒滅菌大多采用加熱蒸汽滅菌方法，雖然消毒滅菌效果徹底，但費(fèi)工、費(fèi)時(shí)、成本高。王衛(wèi)國(guó)等[8]研究表明，用一定功率的微波加熱食用菌栽培料袋時(shí)，菌袋內(nèi)物料的增溫與加熱時(shí)間成正比，與物料質(zhì)量成反比；在 0.15 MPa微波加熱加壓維持15 min 與高壓蒸汽維持1.5 h 的滅菌效果相當(dāng)；兩種滅菌方法對(duì)食用菌料袋栽培金針菇?jīng)]有明顯差別。本試驗(yàn)中采取微波滅菌的方法，大腸桿菌與黑曲霉菌在2～3 min完全被殺滅，枯草芽孢桿菌則在3 min能全部被殺滅。在實(shí)際測(cè)試中，微波3 min時(shí)溫度大概能達(dá)到95℃，而在相對(duì)較低的溫度下一樣能殺滅細(xì)菌。所以關(guān)于微波殺菌的機(jī)理，除了熱效應(yīng)外，還可能有非熱效應(yīng)，尚需進(jìn)一步研究。

通過過氧化苯甲酰滅菌試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，相比微波滅菌，過氧化苯甲酰的滅菌效率要高，然而其成本相對(duì)較高。本試驗(yàn)采用微波爐與過氧化苯甲酰2種方式開展滅菌消毒試驗(yàn)，通過對(duì)試驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行分析表明，微波消毒后廢物無毒性、無殘留物、損壞輕，且微波消毒所需工作環(huán)境與占地面積小，對(duì)周圍環(huán)境不致形成高溫，清潔、衛(wèi)生，而氧化劑滅菌相較于高壓蒸汽滅菌更加高效，但是成本卻相對(duì)較高。

參考文獻(xiàn)

[1] 蔡愛群.淺談?dòng)绊懯秤镁腆w培養(yǎng)基滅菌的因素[J].中國(guó)食用菌，1999，17（6）：6-7.

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[4] 葛新鋒，劉存祥.微波對(duì)固體培養(yǎng)物料的滅菌工藝的試驗(yàn)研究[J].河南農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào)，2007，41（3）：322-325.

[5] 姚開，武麗榮，譚敏.微波加熱條件下的細(xì)菌死亡特性值研究[J].食品科學(xué)，1999（4）：20-23.

[6] 顏志紅.超聲微波連續(xù)逆流提取、微波滅菌、真空帶式干燥技術(shù)及設(shè)備的特點(diǎn)[J].中國(guó)制藥裝備，2010（3）：18-23.

[7] 楊其林，李俊超，陳海峰，等.面粉改良劑應(yīng)用問題及對(duì)策[J].糧食與油脂，2007（11）：33-35.

[8] 王衛(wèi)國(guó)，李玉薇，王芳，等.食用菌栽培袋的微波滅菌研究[J].食用菌，2011（2）：60-63.

1.4 微波與氧化劑共同作用試驗(yàn)

根據(jù)微波滅菌和過氧化苯甲酰滅菌試驗(yàn)結(jié)果，選擇2種處理下都比較難滅的枯草芽孢桿菌對(duì)其進(jìn)行共同作用試驗(yàn)，并且觀察試驗(yàn)結(jié)果。

原菌液計(jì)數(shù)，取菌液5 mL入試管，靜置10 min 搖勻，用無菌吸管吸1 mL入試管，用稀釋平板計(jì)數(shù)法計(jì)數(shù)（方法如上）。

①消毒液處理 取菌液5 mL入試管分別編號(hào)，分別加入10.0，50.0，100.0，1 000.0，10 000.0， 20 000.0 mg/L 6種濃度的過氧化苯甲酰對(duì)試管中的菌液進(jìn)行滅菌，作用10 min（使用四氯化碳作為溶劑）。

②微波爐處理 密封后，放入微波爐中分別作用30，60，90，120，180 s，然后取出在無菌工作臺(tái)上用稀釋平板計(jì)數(shù)法計(jì)數(shù)。

將平板放到培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24 h，第二天取出照相并記錄數(shù)據(jù)。

2 結(jié)果與分析

2.1 微波作用對(duì)3種菌種的殺菌效果

試驗(yàn)結(jié)果（表1）顯示，微波20 s后大腸桿菌還剩（4.5±0.2）×109，黑曲霉菌還剩（2.9±0.1）×108，枯草芽孢桿菌還剩（5.5±0.3）×107；微波40 s后大腸桿菌還剩（4.6±0.3）×108，黑曲霉菌還剩（9.5±0.2）×107，枯草芽孢桿菌還剩（2.6±0.1）×107；微波60 s后大腸桿菌還剩（7.2±0.5）×106，黑曲霉菌還剩（3.8±0.4）×107個(gè)，枯草芽孢桿菌還剩（4.8±0.2）×106；微波80 s后大腸桿菌還剩（5.7±0.2）×106，黑曲霉菌還剩（1.8±0.4）×107個(gè)，枯草芽孢桿菌還剩（3.3±0.3）×106。

在微波爐滅菌的試驗(yàn)中，隨著微波時(shí)間的增加，菌的數(shù)量逐漸減少。微波時(shí)間為120 s時(shí)，大腸桿菌全部被殺死，160 s時(shí)黑曲霉菌全部被殺死，180 s時(shí)枯草芽孢桿菌全部被殺死，達(dá)到了徹底滅菌的效果。微波可使物質(zhì)中偶極子（如水分子）產(chǎn)生高頻運(yùn)動(dòng)，從而將存在的微生物殺滅。由于該法兼有熱和其他效應(yīng)，故其殺菌作用與紅外線加熱方法相比，具有作用溫度低、所需時(shí)間短等優(yōu)點(diǎn)。

2.2 不同濃度過氧化苯甲酰對(duì)枯草芽孢桿菌的殺菌效果

表2結(jié)果表明，過氧化苯甲酰濃度為10 mg/L時(shí)，大腸桿菌還剩（1.2±0.2）×108，黑曲霉菌還剩（2.1±0.3）×107，枯草芽孢桿菌還剩（5.0±0.1）×108；濃度為50 mg/L時(shí)，大腸桿菌還剩（4.0±0.2）×107，黑曲霉菌還剩（5.6±0.4）×106，枯草芽孢桿菌還剩（1.3±0.3）×108；濃度為100 mg/L時(shí)，大腸桿菌還剩（6.5±0.3）×106，黑曲霉菌還剩（3.3±0.2）×106，枯草芽孢桿菌還剩（5.4±0.2）×107。

試驗(yàn)結(jié)果顯示，隨著過氧化苯甲酰濃度的升高，3種菌的數(shù)量均減少。大腸桿菌與黑曲霉菌在濃度為10 000 mg/L時(shí)全部被殺死，枯草芽孢桿菌在濃度為20 000 mg/L時(shí)全部被殺死，同樣達(dá)到了徹底滅菌的效果。

2.3 過氧化苯甲酰和微波共同作用對(duì)3種菌種的殺菌效果

在微波與過氧化苯甲酰共同作用試驗(yàn)中選用最難殺滅的枯草芽孢桿菌作為試驗(yàn)菌種，試驗(yàn)結(jié)果（表3）表明，當(dāng)過氧化苯甲酰濃度為1 000 mg/L、微波90 s時(shí)枯草芽孢桿菌全部殺滅，達(dá)到了徹底滅菌的效果。相比于上述單一的滅菌方法，二者共同作用下明顯提高了滅菌效率。

3 結(jié)論與討論

食用菌培養(yǎng)料消毒滅菌大多采用加熱蒸汽滅菌方法，雖然消毒滅菌效果徹底，但費(fèi)工、費(fèi)時(shí)、成本高。王衛(wèi)國(guó)等[8]研究表明，用一定功率的微波加熱食用菌栽培料袋時(shí)，菌袋內(nèi)物料的增溫與加熱時(shí)間成正比，與物料質(zhì)量成反比；在 0.15 MPa微波加熱加壓維持15 min 與高壓蒸汽維持1.5 h 的滅菌效果相當(dāng)；兩種滅菌方法對(duì)食用菌料袋栽培金針菇?jīng)]有明顯差別。本試驗(yàn)中采取微波滅菌的方法，大腸桿菌與黑曲霉菌在2～3 min完全被殺滅，枯草芽孢桿菌則在3 min能全部被殺滅。在實(shí)際測(cè)試中，微波3 min時(shí)溫度大概能達(dá)到95℃，而在相對(duì)較低的溫度下一樣能殺滅細(xì)菌。所以關(guān)于微波殺菌的機(jī)理，除了熱效應(yīng)外，還可能有非熱效應(yīng)，尚需進(jìn)一步研究。

通過過氧化苯甲酰滅菌試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，相比微波滅菌，過氧化苯甲酰的滅菌效率要高，然而其成本相對(duì)較高。本試驗(yàn)采用微波爐與過氧化苯甲酰2種方式開展滅菌消毒試驗(yàn)，通過對(duì)試驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行分析表明，微波消毒后廢物無毒性、無殘留物、損壞輕，且微波消毒所需工作環(huán)境與占地面積小，對(duì)周圍環(huán)境不致形成高溫，清潔、衛(wèi)生，而氧化劑滅菌相較于高壓蒸汽滅菌更加高效，但是成本卻相對(duì)較高。

參考文獻(xiàn)

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[8] 王衛(wèi)國(guó)，李玉薇，王芳，等.食用菌栽培袋的微波滅菌研究[J].食用菌，2011（2）：60-63.

1.4 微波與氧化劑共同作用試驗(yàn)

根據(jù)微波滅菌和過氧化苯甲酰滅菌試驗(yàn)結(jié)果，選擇2種處理下都比較難滅的枯草芽孢桿菌對(duì)其進(jìn)行共同作用試驗(yàn)，并且觀察試驗(yàn)結(jié)果。

原菌液計(jì)數(shù)，取菌液5 mL入試管，靜置10 min 搖勻，用無菌吸管吸1 mL入試管，用稀釋平板計(jì)數(shù)法計(jì)數(shù)（方法如上）。

①消毒液處理 取菌液5 mL入試管分別編號(hào)，分別加入10.0，50.0，100.0，1 000.0，10 000.0， 20 000.0 mg/L 6種濃度的過氧化苯甲酰對(duì)試管中的菌液進(jìn)行滅菌，作用10 min（使用四氯化碳作為溶劑）。

②微波爐處理 密封后，放入微波爐中分別作用30，60，90，120，180 s，然后取出在無菌工作臺(tái)上用稀釋平板計(jì)數(shù)法計(jì)數(shù)。

將平板放到培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24 h，第二天取出照相并記錄數(shù)據(jù)。

2 結(jié)果與分析

2.1 微波作用對(duì)3種菌種的殺菌效果

試驗(yàn)結(jié)果（表1）顯示，微波20 s后大腸桿菌還剩（4.5±0.2）×109，黑曲霉菌還剩（2.9±0.1）×108，枯草芽孢桿菌還剩（5.5±0.3）×107；微波40 s后大腸桿菌還剩（4.6±0.3）×108，黑曲霉菌還剩（9.5±0.2）×107，枯草芽孢桿菌還剩（2.6±0.1）×107；微波60 s后大腸桿菌還剩（7.2±0.5）×106，黑曲霉菌還剩（3.8±0.4）×107個(gè)，枯草芽孢桿菌還剩（4.8±0.2）×106；微波80 s后大腸桿菌還剩（5.7±0.2）×106，黑曲霉菌還剩（1.8±0.4）×107個(gè)，枯草芽孢桿菌還剩（3.3±0.3）×106。

在微波爐滅菌的試驗(yàn)中，隨著微波時(shí)間的增加，菌的數(shù)量逐漸減少。微波時(shí)間為120 s時(shí)，大腸桿菌全部被殺死，160 s時(shí)黑曲霉菌全部被殺死，180 s時(shí)枯草芽孢桿菌全部被殺死，達(dá)到了徹底滅菌的效果。微波可使物質(zhì)中偶極子（如水分子）產(chǎn)生高頻運(yùn)動(dòng)，從而將存在的微生物殺滅。由于該法兼有熱和其他效應(yīng)，故其殺菌作用與紅外線加熱方法相比，具有作用溫度低、所需時(shí)間短等優(yōu)點(diǎn)。

2.2 不同濃度過氧化苯甲酰對(duì)枯草芽孢桿菌的殺菌效果

表2結(jié)果表明，過氧化苯甲酰濃度為10 mg/L時(shí)，大腸桿菌還剩（1.2±0.2）×108，黑曲霉菌還剩（2.1±0.3）×107，枯草芽孢桿菌還剩（5.0±0.1）×108；濃度為50 mg/L時(shí)，大腸桿菌還剩（4.0±0.2）×107，黑曲霉菌還剩（5.6±0.4）×106，枯草芽孢桿菌還剩（1.3±0.3）×108；濃度為100 mg/L時(shí)，大腸桿菌還剩（6.5±0.3）×106，黑曲霉菌還剩（3.3±0.2）×106，枯草芽孢桿菌還剩（5.4±0.2）×107。

試驗(yàn)結(jié)果顯示，隨著過氧化苯甲酰濃度的升高，3種菌的數(shù)量均減少。大腸桿菌與黑曲霉菌在濃度為10 000 mg/L時(shí)全部被殺死，枯草芽孢桿菌在濃度為20 000 mg/L時(shí)全部被殺死，同樣達(dá)到了徹底滅菌的效果。

2.3 過氧化苯甲酰和微波共同作用對(duì)3種菌種的殺菌效果

在微波與過氧化苯甲酰共同作用試驗(yàn)中選用最難殺滅的枯草芽孢桿菌作為試驗(yàn)菌種，試驗(yàn)結(jié)果（表3）表明，當(dāng)過氧化苯甲酰濃度為1 000 mg/L、微波90 s時(shí)枯草芽孢桿菌全部殺滅，達(dá)到了徹底滅菌的效果。相比于上述單一的滅菌方法，二者共同作用下明顯提高了滅菌效率。

3 結(jié)論與討論

食用菌培養(yǎng)料消毒滅菌大多采用加熱蒸汽滅菌方法，雖然消毒滅菌效果徹底，但費(fèi)工、費(fèi)時(shí)、成本高。王衛(wèi)國(guó)等[8]研究表明，用一定功率的微波加熱食用菌栽培料袋時(shí)，菌袋內(nèi)物料的增溫與加熱時(shí)間成正比，與物料質(zhì)量成反比；在 0.15 MPa微波加熱加壓維持15 min 與高壓蒸汽維持1.5 h 的滅菌效果相當(dāng)；兩種滅菌方法對(duì)食用菌料袋栽培金針菇?jīng)]有明顯差別。本試驗(yàn)中采取微波滅菌的方法，大腸桿菌與黑曲霉菌在2～3 min完全被殺滅，枯草芽孢桿菌則在3 min能全部被殺滅。在實(shí)際測(cè)試中，微波3 min時(shí)溫度大概能達(dá)到95℃，而在相對(duì)較低的溫度下一樣能殺滅細(xì)菌。所以關(guān)于微波殺菌的機(jī)理，除了熱效應(yīng)外，還可能有非熱效應(yīng)，尚需進(jìn)一步研究。

通過過氧化苯甲酰滅菌試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，相比微波滅菌，過氧化苯甲酰的滅菌效率要高，然而其成本相對(duì)較高。本試驗(yàn)采用微波爐與過氧化苯甲酰2種方式開展滅菌消毒試驗(yàn)，通過對(duì)試驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行分析表明，微波消毒后廢物無毒性、無殘留物、損壞輕，且微波消毒所需工作環(huán)境與占地面積小，對(duì)周圍環(huán)境不致形成高溫，清潔、衛(wèi)生，而氧化劑滅菌相較于高壓蒸汽滅菌更加高效，但是成本卻相對(duì)較高。

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