任 橋，鄒 明，張啟迪

（青島農(nóng)業(yè)大學(xué)動物科技學(xué)院，山東 青島266109）

2012年2月25日，青島紅島一水貂養(yǎng)殖場水貂出現(xiàn)發(fā)病癥狀。該場共飼養(yǎng)了水貂960只，其中母貂800只，公貂160只。飼喂自家配制的混合飼料，將生魚、雞頭、雞蛋、豬肝與膨化玉米面拌勻、和稀后進(jìn)行飼喂。23日上午開始發(fā)病，且有2只公貂死亡，下午又有10多只出現(xiàn)發(fā)病癥狀的病貂；24日早上有40～50只死亡貂，均為公貂。臨床癥狀表現(xiàn)為患病水貂精神沉郁，食欲下降或不食，拉黑色糞便，個體大的先死，死后倒提喘后吐血水，口流發(fā)白或紅色的黏液。大部分水貂后肢癱瘓。發(fā)病急，死亡率高。通過臨床癥狀、病理剖檢及實驗室檢驗，初步診斷為水貂肉毒梭菌中毒。

1 材料與方法

1.1 材料 病料來自青島紅島某養(yǎng)殖場的6只發(fā)病水貂；培養(yǎng)基及試劑：普通瓊脂、普通肉湯，均購自中國進(jìn)出口商品檢驗技術(shù)研究所；藥敏紙片，購自杭州天和微生物試劑有限公司；小鼠購自青島市藥品檢驗所。

1.2方法

1.2.1 剖檢 肺臟局部淤血；脾臟腫大，邊緣有黑色壞死點；肝臟有不同程度的彌漫性出血，邊緣變薄；腎臟顏色變暗，表面有大小不等的灰白色壞死灶；腸系膜淋巴結(jié)腫大、出血。

1.2.2 涂片鏡檢 取新鮮病死貂的心血、肺臟、肝臟、脾臟直接進(jìn)行涂片，分別進(jìn)行吉姆薩染色和革蘭染色，顯微鏡下觀察。

1.2.3 細(xì)菌分離 挑取肺臟、肝臟、脾臟、胃腸內(nèi)容物分別接種于普通瓊脂平板、血瓊脂平板和肉湯培養(yǎng)基，并分別進(jìn)行有氧培養(yǎng)和厭氧培養(yǎng)，37℃培養(yǎng)24 h，觀察有無菌落生長及菌落形態(tài)。

1.2.4 毒物接種試驗 將死貂的胃腸內(nèi)容物和剩余飼料，等量加入滅菌生理鹽水，在無菌狀態(tài)下研碎，室溫浸放1 h～2 h，濾過使之透明。將濾液分為2份，1份不做任何處理對5只小鼠進(jìn)行腹腔注射，每只0.5mL；另1份經(jīng)高溫處理30min后，再對5只小鼠進(jìn)行腹腔注射，每只0.5mL，同一環(huán)境下飼養(yǎng)觀察。

1.2.5 藥敏試驗 將純化的菌落接種于普通肉湯，37℃厭氧培養(yǎng)12 h。用滅菌的棉棒蘸取肉湯培養(yǎng)物在普通瓊脂平板上涂抹，之后將藥敏紙片貼在培養(yǎng)基的表面，37℃厭氧培養(yǎng)24 h。

2 結(jié)果

2.1 涂片鏡檢 顯微鏡下觀察，可見有一種梭形產(chǎn)芽孢的革蘭陽性桿菌，同時發(fā)現(xiàn)肝臟細(xì)胞破壞嚴(yán)重。

2.2 細(xì)菌培養(yǎng) 有氧培養(yǎng)無細(xì)菌生長，厭氧培養(yǎng)菌落生長良好。其特性是：普通瓊脂培養(yǎng)基，接種24 h～48 h后，長出邊緣不整齊、顆粒狀、圓形扁平、中央突起光滑的白色菌落，培養(yǎng)5 d以上時變?yōu)辄S棕色菌落。血瓊脂平板，可見圓形或圓形不規(guī)則，半透明的露滴樣菌落，有溶血環(huán)。肉湯培養(yǎng)基，呈渾濁生長，具有均勻的白色沉淀或絮狀沉淀。細(xì)菌形態(tài)：取培養(yǎng)物涂片染色鏡檢，為兩端鈍圓的大桿菌，單獨或成雙排列，有芽孢，芽孢呈橢圓形，偏于一端較菌體膨大。

2.3 毒素接種試驗 結(jié)果表明注射未經(jīng)任何處理濾液的小鼠在12 h內(nèi)先后死亡；而注射經(jīng)過高溫處理濾液的小鼠沒有任何變化，最終確定為肉毒梭菌中毒。

2.4 藥敏試驗 藥敏試驗結(jié)果見表1。試驗結(jié)果表明，新霉素、頭孢曲松、頭孢噻呋高敏；氨芐青霉素中敏；其他藥物均無明顯抑菌環(huán)。

表1 藥敏試驗 （直徑：mm）

3 防治措施

3.1 立即停用可疑飼料，更換無污染的新鮮飼料。對病貂和有癥狀的病貂進(jìn)行隔離，及時消毒貂舍，清理貂糞，加強(qiáng)飼養(yǎng)管理，提高貂的抗病力。

3.2 將所飼喂的魚、雞頭等動物性飼料解凍后，用0.3%高錳酸鉀液進(jìn)行清洗、浸泡5min～10min，然后用清水沖洗干凈，處理完再進(jìn)行煮熟、飼喂。每天對絞肉機(jī)及飼槽等進(jìn)行清洗。

3.3 根據(jù)藥敏試驗結(jié)果，在飼料中按臨床常規(guī)用量添加新霉素或頭孢曲松，每天2次，連用5 d～7 d。配合用葡萄糖、維生素C、維生素B進(jìn)行輔助治療，增強(qiáng)病貂抵抗力。

4 討論

水貂肉毒梭菌中毒是由于食入含有肉毒梭菌毒素的肉類飼料引起的一種急性致死性中毒，以呈現(xiàn)運(yùn)動中樞神經(jīng)麻痹和延腦麻痹癥狀為特征［1］。肉毒梭菌的芽孢分布廣泛，動物腸道內(nèi)容物、糞便、腐敗尸體、腐爛飼料中經(jīng)常含有肉毒梭菌。該菌在動物尸體、肉類、飼料內(nèi)繁殖產(chǎn)生毒素［2］。水貂肉毒梭菌中毒的傳染源主要是被該菌污染的飼料。當(dāng)肉、魚飼料被肉毒梭菌污染后，在繁殖過程中產(chǎn)生大量的外毒素，水貂吃了這種飼料，就會發(fā)生中毒；含有毒素的飼料外觀無異常變化，不易被發(fā)現(xiàn)；這種含毒素飼料即使放在低溫冷庫也不會被破壞，拿出喂貂還會引起中毒［3］。因此該病一年四季均可發(fā)生。同時不分年齡、性別均易中毒。

該養(yǎng)殖場暴發(fā)本病的起因懷疑是食用了被肉毒梭菌污染的飼料。通過詢問畜主得知，本場所用的飼料為自家配制的，且是采用生喂的方式飼喂水貂，22日曾采購一批豬肝，增加飼喂豬肝后出現(xiàn)發(fā)病，同時絞肉機(jī)用后不進(jìn)行清洗，這種飼喂模式存在著隱患。本病發(fā)病較快，常來不及治療，應(yīng)以預(yù)防為主。平時注意飼料及飲水衛(wèi)生，防止飼料和飲水被肉毒梭菌毒素污染。魚、肉類飼料應(yīng)保持新鮮，做到速凍、速融、速加工，防止污染或長期堆放而腐敗，嚴(yán)格禁止生喂，對于新引進(jìn)飼料原料，應(yīng)小區(qū)域預(yù)添加確保飼喂安全后再進(jìn)行全群添加。加工飼料的用具應(yīng)經(jīng)常消毒。治療此類疾病時最好盡早做出正確診斷，保證食物及飼喂器具的潔凈，并通過藥敏試驗，選擇敏感藥物，才能收到顯著的防治效果，避免浪費(fèi)藥物和延誤防治時機(jī)，減少損失。

［1］ 孫衛(wèi)東，劉家國.經(jīng)濟(jì)動物疾病診療與處方手冊［D］.北京：化學(xué)工業(yè)出版社，2007：41-42.

［2］ 林修光，寇運(yùn)口.肉毒梭菌與食物中毒［J］.食品科學(xué)，2003，24(8)：194-196．

［3］ 葛春艷，馬景芳，王紅梅，等.水貂肉毒梭菌中毒癥［J］.山東畜牧獸醫(yī).2003(2)：47-48.