張玉仙，王文利，王金秋，曹 靜，陳耀星，王子旭

（1.北京農業(yè)職業(yè)學院畜牧獸醫(yī)系，北京 房山102442；2.中國農業(yè)大學動物醫(yī)學院，北京 海淀100193）

同源益生素是從肉雞腸道內分離出來的一類活性微生物添加劑。研究表明[1]，益生素被畜禽采食后能在腸道發(fā)育、繁殖并可促進畜禽生長，提高飼料用利率，防止腹瀉，提高機體的抗病力，被認為是一種多功能的綠色飼料添加劑。益生素具有無污染、抗病力強、安全性高、無耐藥性、無殘留、低成本等優(yōu)點且不會對人和動物產生“三致現(xiàn)象”，可替代抗生素，被廣泛應用于畜牧業(yè)[1]。

小腸不僅是營養(yǎng)物質消化和吸收重要場所，也具有重要的免疫屏障功能。良好的小腸黏膜結構是營養(yǎng)物質的消化、吸收和動物正常生長的生理基礎[2-4]。本試驗目的在于探討肉仔雞飼料中添加不同劑量的益生素對肉仔雞小腸黏膜結構的影響，也為益生素在肉雞飼養(yǎng)中應用提供參考依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 動物分組 1 500羽1日齡AA肉雞（公母半），由北京華都肉雞場提供，平均體重42.90±0.26 g。隨機分為5個組：對照組飼喂全價基礎日糧；試驗1、2、3、4組，分別在基礎日糧的基礎上添加0.1%、0.2%、0.3%、0.4%同源益生素，每組設10個重復,每個重復30羽。試驗期為21 d。飼養(yǎng)管理按照北京市地方標準DB23/T169-93肉雞飼養(yǎng)管理技術規(guī)程進行。按照所在地的防疫部門制定的免疫程序進行常規(guī)免疫。

1.2 益生素的來源 同源益生素菌種的來源是從肉雞腸道中篩選出的，采用現(xiàn)代發(fā)酵技術提純，配以相應的載體，其中含芽孢桿菌、乳酸菌、雙歧桿菌等多種益生菌，產品為棕色粉末，活菌數(shù)為20億CFU/g。

1.3 樣品處理 在試驗第21天剖殺，迅速取十二指腸、空腸、回腸中段各2～3mm，浸入新配置的生理鹽水涮洗掉內容物后，用40 g/L多聚甲醛磷酸緩沖液(0.1mol/L，pH值7.4)固定48 h，常規(guī)石蠟包埋，制備連續(xù)橫斷切片10張（厚5um），常規(guī)蘇木精-伊紅（H.E.）染色。

1.4 測定項目

1.4.1 生長性能指標 在試驗開始到結束稱重并記錄體重、耗料量，數(shù)據(jù)采用SPSS17.0統(tǒng)計軟件分析進行兩組間獨立樣本雙尾t檢驗。

1.4.2 組織學指標 經H.E.染色后，在光學顯微鏡下觀察小腸的黏膜結構。每段小腸取5張切片，每張切片選2～5個視野，應用Moditec照相處理軟件拍照，每張照片測量5根最長腸絨毛的長度（以腸腺絨毛連接處到絨毛頂端為準）、最深隱窩深度（以腸腺絨毛連接處到腸腺基部為準）、黏膜厚度和腸壁厚度。所得數(shù)據(jù)用SPSS17.0統(tǒng)計軟件對測量數(shù)據(jù)進行單因素方差分析和多重比較。試驗結果用均數(shù)±標準差（-X±S）表示。

2 結果

2.1 各組肉仔雞的體重變化情況 見表1。

表1 同源益生素對21日齡肉仔雞生產指標的影響

從表1中可以看出，各組仔雞初生重沒有差異，平均體重42.90±0.26 g，飼喂21 d后，從整體來看各試驗組在末重、日增重、料重比等方面都優(yōu)于對照組，而且是增重快，耗料量低。在5個試驗組中0.3%組增重最快，顯著高于對照組，差異極顯著（P＜0.01），也顯著高于其他各組；料重比0.3%組在5個試驗組中最低，說明該組肉仔雞吃料少長肉快。

2.2 腸黏膜上皮的形態(tài)結構的變化 H.E.染色后在光學顯微鏡下觀察發(fā)現(xiàn)，5個試驗組肉仔雞的腸黏膜結構均完整，層次分明，腸黏膜上皮細胞的輪廓清晰，染色鮮明，排列規(guī)則，小腸腸絨毛頂端均無脫落現(xiàn)象。

2.3 小腸絨毛長度、黏膜厚度、腸壁厚度和絨毛長度/隱窩深度比值的變化 見表2、3、4。

21日齡肉仔雞小腸絨毛從前至后，即從十二指腸、空腸至回腸，小腸絨毛長度、黏膜厚度、腸壁厚度逐漸降低。從表2中可以看出在十二指腸黏膜結構指標方面，0.3%組在絨毛長度、黏膜厚度、腸壁厚度及絨毛長度與隱窩深度的比值（C/V值）等方面顯著優(yōu)于其他試驗組，表明在肉雞飼料中添加益生素時0.3%的濃度最佳。從表3中可以看出在空腸黏膜結構指標方面，0.3%組在絨毛長度、黏膜厚度、腸壁厚度及絨毛長度與隱窩深度的比值（C/V值）等方面顯著優(yōu)于其他試驗組，表明在肉雞飼料中添加益生素時0.3%的濃度最佳。從表4中可以看出在回腸黏膜結構指標方面，0.3%組極顯著高于對照組、0.2%組和0.4%組（P＜0.01）。在回腸V/C指標方面，0.3%組極顯著地高于對照組和其他試驗組（P＜0.01）。

表2 不同濃度的同源益生素對21日齡肉仔雞十二指腸的小腸絨毛長度、黏膜厚度、腸壁厚度及絨毛長度與隱窩深度的比值的影響

表3 不同濃度的同源益生素21日齡肉仔雞空腸的小腸絨毛長度、黏膜厚度、腸壁厚度及絨毛長度與隱窩深度的比值的影響

表4 不同濃度的同源益生素對21日齡肉仔雞回腸的小腸絨毛長度、黏膜厚度、腸壁厚度及絨毛長度與隱窩深度的比值的影響

3 討論與分析

3.1 不同劑量的同源益生素對肉仔雞體重增長的影響 從試驗結果來看，試驗采用的益生素是從肉仔雞腸道中提取的芽孢桿菌、乳酸菌、雙歧桿菌等有益菌。其中芽孢桿菌是一種需氧菌，這給乳酸菌創(chuàng)造了一個缺氧的生長環(huán)境，同時將淀粉轉化為單糖，供乳酸菌利用[9]?；o[10]等研究表明，枯草芽孢桿菌可以促進肉仔雞體內蛋白質、脂類的合成代謝，促進骨骼和肌肉的生長發(fā)育，有利于促進動物生長。本試驗是將不同濃度的同源益生素飼喂肉雞，結果表明，在肉仔雞飼料中添加0.1%、0.2%、0.3%、0.4%的濃度均可提高肉仔雞的增重，提高飼料的利用率，降低料重比，但以0.3%濃度的效果最佳，取得的經濟效益最高。

3.2 不同劑量的同源益生素對肉仔雞小腸黏膜結構的影響 小腸的正常結構與功能是營養(yǎng)物質被充分消化與吸收的基本保證，特別是小腸的腸絨毛長度、隱窩深度、黏膜厚度及絨毛表面積是衡量小腸消化吸收功能的重要指標[4-5]。本試驗結果表明，5個試驗組肉仔雞腸黏膜結構完整，層次分明，腸黏膜上皮細胞的輪廓清晰，染色鮮明，排列規(guī)則，腸黏膜上皮無脫落現(xiàn)象，尤其在絨毛頂端。肉仔雞飼料中添加益生素后，小腸絨毛高度在十二指腸、空腸和回腸呈劑量依賴性增長，且益生素組小腸絨毛高度高于對照組。其中，0.3%組腸絨毛高度、黏膜厚度、腸壁厚度在十二指腸、空腸和回腸極顯著高于對照組（P＜0.01）。小腸絨毛V/C比值在十二指腸呈劑量依賴性增長，且0.3%組小腸絨毛V/C比值極顯著高于對照組（P＜0.01）。營養(yǎng)生理學的研究也表明，絨毛長度/隱窩深度比值綜合反映小腸的功能狀況，比值下降表明消化吸收功能下降[6]。動物生長發(fā)育受阻。本試驗表明，益生素對肉仔雞小腸消化吸收有影響，0.3%的濃度影響較大，不同濃度均可增強肉雞小腸的消化吸收能力，使肉仔雞的生長發(fā)育加快，但以0.3%益生素濃度最為合理，最能改善和維護肉仔雞小腸黏膜的正常結構，最能提高肉仔雞小腸的消化吸收能力，而且日增重最明顯，耗料量最少，生長發(fā)育最快，料重比最低，經濟效益最高。

4 結論

4.1 在肉仔雞基礎日糧中添加不同濃度的同源益生素，從增重、耗料量、料重比、飼料報酬及經濟效益分析結果看，在飼料中添加0.3%益生素效果最佳。

4.2 從21日齡肉仔雞小腸黏膜結構來看，0.3%組可使肉仔雞體重增加最多，使小腸的絨毛長度、隱窩深度及等指標最大，消化吸收能力最強；所以在促進肉仔雞生長時，0.3%的添加劑量最為合理。

4.3 從本試驗來看，益生素雖然是由雞的腸道中分離的有益菌，但也不是添加的濃度越大越好，一定要適度，才能取得事半功倍的效果。

[1]李焰，許正金，洪楓.復合益生素在規(guī)?；怆u生產中的應用效果觀察[J].中國家禽，2008，30（23）：55-56.

[2]Kelly D，Coutts A G P.Function in neonates：role of early nutri?tion[J].Livest Prod Sci，2000，66（2）：161-167.

[3]Gaskins H R.T he intestinal immune system：gut reaction and growth of the pig[J].Anim Sci，1996，74（Suppll）：169.

[4]張玉仙，王文利，陳耀星，等.不同濃度的大蒜溶液對小鼠小腸黏膜結構的影響[J].中國獸醫(yī)雜志，2008，44（5）：42-45.

[5]張玉仙，王文利，陳耀星，等.不同劑量的乳豬壯對仔豬小腸黏膜上皮內淋巴細胞核杯狀細胞數(shù)量變化的試驗[J].中國獸醫(yī)雜志，2012，48（5）：37-38.

[6]張玉仙，王文利，陳耀星，等.不同濃度的大蒜溶液對小鼠小腸黏膜上皮內淋巴細胞和杯狀細胞數(shù)量變化的研究[J].黑龍江畜牧獸醫(yī)雜志，2009，39（6）：42-45.

[7]李可洲，李寧，黎介壽，等.短鏈脂肪酸對大鼠移植小腸形態(tài)及功能的作用研究[J].世界華人雜志，2002，10（6）：720-722.

[8]常文環(huán).黃霉素對肉仔雞促生長機理的研究[D].北京：中國農業(yè)大學碩士學位論文，1996.

[9]張玉仙，王文利，張京和.不同濃度的同源益生素對肉雞生產性能和消化指標的影響[J].黑龍江畜牧獸醫(yī)雜志，2014，39（6）：42-45.

[10]滑靜，郭玉琴，張淑萍，等.肉仔雞日糧中添加枯草芽孢桿菌對平均日增質量和血液生化指標的影響[J].黑龍江畜牧獸醫(yī)雜志，2003，33（2）：14-15.