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        低氧脅迫下大豆發(fā)芽富集γ-氨基丁酸品種篩選及培養(yǎng)條件優(yōu)化

        2014-03-08 06:13:49王淑芳楊潤強(qiáng)顧振新
        食品科學(xué) 2014年21期
        關(guān)鍵詞:低氧培養(yǎng)液游離

        王淑芳,楊潤強(qiáng),顧振新*

        (南京農(nóng)業(yè)大學(xué)食品科技學(xué)院,江蘇 南京 2100 95)

        低氧脅迫下大豆發(fā)芽富集γ-氨基丁酸品種篩選及培養(yǎng)條件優(yōu)化

        王淑芳,楊潤強(qiáng),顧振新*

        (南京農(nóng)業(yè)大學(xué)食品科技學(xué)院,江蘇 南京 2100 95)

        比較理想M-7、95-優(yōu)1、蘇青1號(hào)和YH-NJ大豆品種培養(yǎng)4 d后的生理生化變化情況,結(jié)果表明:YH-NJ的發(fā)芽率、芽長和呼吸強(qiáng)度顯著高于其他品種,發(fā)芽4 d后YH-NJ的蛋白酶活力、游離氨基酸含量的增加量也顯著高于其他品種,γ-氨基丁酸(γ-aminobutyric acid,GABA)產(chǎn)量及增加量均為最大。由此篩選出大豆YH-NJ是發(fā)芽富集GABA的良好品種。以YH-NJ為原料,在單因素試驗(yàn)結(jié)果的基礎(chǔ)上,通過正交試驗(yàn),得到發(fā)芽大豆富集GABA的最佳培養(yǎng)條件為:正常培養(yǎng)4 d、低氧脅迫培養(yǎng)48 h、培養(yǎng)液pH 5.0、發(fā)芽溫度30 ℃。在此條件下,GABA產(chǎn)量達(dá)到1.97 mg/g,是隨機(jī)組的1.56 倍。

        大豆;發(fā)芽;γ-氨基丁酸;富集;品種篩選;條件優(yōu)化;低氧脅迫

        大豆發(fā)芽后,可提高蛋白質(zhì)和淀粉消化率以及某些限制性氨基酸和維生素等物質(zhì)含量,同時(shí)可降低或消除抗?fàn)I養(yǎng)因子含量[1],尤其可富集對(duì)人體有生理調(diào)節(jié)功能的γ-氨基丁酸(γ-aminobutyric acid,G ABA)等物質(zhì)[2]。植物正常生長條件下體內(nèi)GABA產(chǎn)量很低,通常在0.3~32.5 μmol/g之間,但受到熱激、機(jī)械損傷、低氧等逆境脅迫或植物激素作用時(shí)會(huì)提高數(shù)倍甚至數(shù)十倍[3-4],機(jī)械傷害可在1~5 min內(nèi)使大豆葉片內(nèi)的GABA含量提高17 倍,冷激5~15 mi n可使大豆葉片GABA含量提高19 倍。隨著年齡的增大,人體內(nèi)合成GABA的能力愈來愈低,不能滿足生理需要。因此,提高食品中GABA產(chǎn)量的方法成為研究的熱點(diǎn)。植物中,GABA合成通過谷氨酸直接脫羧和多胺降解途徑,其中谷氨酸脫羧酶(glutamate decarboxylase,GAD)和二胺氧化酶(diamine oxidase,DAO)分別為關(guān)鍵限速酶[5]。低氧處理對(duì)發(fā)芽大豆GABA富集的影響已有報(bào)道,但是前人研究中在籽粒發(fā)芽初期采用低氧脅迫處理,嚴(yán)重抑制大豆芽生長,從而降低了大豆芽菜的生物量[6]。

        本實(shí)驗(yàn)以大豆為試材,比較研究了不同品種的大豆在發(fā)芽過程中生理生化特性、蛋白質(zhì)等營養(yǎng)成分含量變化,篩選發(fā)芽率高、GABA富集量大的品種。以此品種為試材,經(jīng)減菌化處理后,正常培養(yǎng)4 d,使豆芽生長生物量大量累積,然后進(jìn)行低氧脅迫處理,研究大豆發(fā)芽條件對(duì)其蛋白質(zhì)、氨基酸和GABA含量變化,之后以GABA為指標(biāo)通過正交試驗(yàn),優(yōu)化出最適富集條件。

        1 材料與方法

        1.1 材料

        大豆:供試的大豆品種有理想M-7、95-優(yōu)1、蘇青1號(hào)和YH-NJ(表1),購自江蘇省農(nóng)業(yè)科學(xué)院;所有大豆籽粒均采收于2013年,置于-20 ℃條件下貯存,備用。

        表1 大豆品種編號(hào)、特性及產(chǎn)區(qū)Table1 Description of soybean cultivars

        1.2 試劑與儀器

        GABA標(biāo) 準(zhǔn)品(純度≥99%) 美國Sigma公司;亮氨酸、考馬斯亮藍(lán)G-250、茚三酮 國藥集團(tuán)(上海)化學(xué)試劑公司;牛血清白蛋白(bovine serum albumin,BSA) 上海藍(lán)季科技發(fā)展有限公司;三乙胺 成都市科龍化工試劑廠;乙腈 上海陸都化學(xué)試劑廠。

        Orion818型pH測(cè)試儀 美國Orion Research公司;755B型分光光度計(jì) 上海精密科學(xué)儀器有限公司;Agilent 1200液相色譜儀 安捷倫公司;TDL-40B離心機(jī)上海安亭科學(xué)儀器廠;PYX-DHS-BS型隔水電熱恒溫培養(yǎng)箱 上海躍進(jìn)醫(yī)療器械廠。

        1.3 籽粒發(fā)芽

        取30 g不同品種大豆籽粒,用1%的次氯酸鈉水溶液浸泡消毒15 min,去離子水沖洗至pH值中性,于30 ℃黑暗條件下浸泡6 h。浸泡后的籽粒置于24 ℃、相對(duì)濕度85%的發(fā)芽機(jī)中,以水為培養(yǎng)液發(fā)芽。培養(yǎng)4 d后,用去離子水清洗發(fā)芽籽粒并吸干表面水分,測(cè)定發(fā)芽率、芽長、呼吸速率和蛋白酶活性。鮮樣干燥后粉碎過篩,測(cè)定可溶性蛋白、游離氨基酸含量等。

        1.4 試驗(yàn)設(shè)計(jì)

        將30 ℃條件下發(fā)芽4 d后的大豆芽菜置于具塞培養(yǎng)瓶(d 5 cm×18.5 cm)中低氧脅迫條件下(通氣量為0.9 L/min)培養(yǎng),以檸檬酸-檸檬酸鈉緩沖溶液(10 mmol/L)作為培養(yǎng)液,培養(yǎng)期間,每隔12 h更換1 次培養(yǎng)液,直至培養(yǎng)結(jié)束。

        1.4.1 單因素試驗(yàn)

        低氧脅迫下大豆發(fā)芽富集GABA,待確定的培養(yǎng)條件有培養(yǎng)液pH值、發(fā)芽溫度和發(fā)芽時(shí)間。限定培 養(yǎng)液pH值范圍為3.0~6.5,發(fā)芽溫度為22~38 ℃,發(fā)芽時(shí)間為0~72 h,進(jìn)行單因素試驗(yàn)。

        1.4.2 培養(yǎng)條件優(yōu)化試驗(yàn)

        在單因素試驗(yàn)的基礎(chǔ)上,以低氧脅迫條件下培養(yǎng)液pH值、培養(yǎng)溫度與時(shí)間為考察因素,以GABA含量為指標(biāo),進(jìn)行正交試驗(yàn)。

        1.5 測(cè)定指標(biāo)與方法

        發(fā)芽率:按照國家標(biāo)準(zhǔn)GB/T 5520—85《糧食、油料檢驗(yàn) 種子發(fā)芽試驗(yàn)》測(cè)定;芽長:采用游標(biāo)卡尺測(cè)量,每30 粒發(fā)芽大豆作為一個(gè)樣本;呼吸速率:采用小籃子法測(cè)定[7];蛋白酶活力:參照文獻(xiàn)[8]方法測(cè)定,以鮮質(zhì)量計(jì);水分含量:用105 ℃恒質(zhì)量法測(cè)定;可溶性蛋白含量:采用考馬斯亮藍(lán)法測(cè)定,以BSA為標(biāo)準(zhǔn)蛋白[7];游離氨基酸:采用茚三酮溶液顯色法測(cè)定,以亮氨酸為標(biāo)準(zhǔn)[7];GABA產(chǎn)量:參照Bai Qingyun等[9]的方法測(cè)定,以干質(zhì)量計(jì)。

        1.6 數(shù)據(jù)處理與統(tǒng)計(jì)分析

        每組實(shí)驗(yàn)設(shè)3 次重復(fù),結(jié)果以±s表示,數(shù)據(jù)采用SAS 9.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析,設(shè)置顯著性水平為P<0.05。

        2 結(jié)果與分析

        2.1 大豆品種篩選

        表2 大豆發(fā)芽過程中主要生理生化指標(biāo)變 化Table2 Changes in primary physiological and biochemical indexes during soybean germination

        發(fā)芽率、芽長、呼吸速率及蛋白酶活力反映了大豆的生長狀況。由表2可知,YH-NJ在發(fā)芽4 d后發(fā)芽率顯著高于其他品種,比發(fā)芽率最低的蘇青1號(hào)高28.84%。發(fā)芽4 d后各品種大豆芽長均大于10 cm,且YH-NJ最長,蘇青1號(hào)最短。YH-NJ呼吸速率是理想M-7和蘇青1號(hào)的1.79 倍、95-優(yōu)1的1.48 倍。供試各品種大豆發(fā)芽后蛋白酶活力均顯著增強(qiáng),其中YH-NJ的蛋白酶活力增加量最大,達(dá)到310.01 U/g,其次為理想M-7、95-優(yōu)1和蘇青1號(hào)。由此可見,YH-NJ的生命活動(dòng)代謝最為旺盛。

        由表3可知,供試各大豆品種在發(fā)芽4 d后含水量均達(dá)到較高值,YH-NJ、理想M-7、95-優(yōu)1和蘇青1號(hào)分別為86.91%、82.45%、81.61%和79.18%。可溶性蛋白在發(fā)芽前后變化不同,理想M-7、95-優(yōu)1和蘇青1號(hào)在發(fā)芽4 d后可溶性蛋白含量均高于其未發(fā)芽大豆,而YH-NJ則在發(fā)芽4 d后比未發(fā)芽的可溶性蛋白含量減少了9.37 mg/g。由此可見,大豆發(fā)芽過程中可溶性蛋白既有合成也有分解。發(fā)芽4 d后,各品種游離氨基酸含量明顯增加,其增加量以YH-NJ最高,達(dá)到9.39 mg/g;同時(shí),發(fā)芽后YH-NJ的游離氨基酸含量也顯著高于其他品種,比發(fā)芽后95-優(yōu)1中高5.62 mg/g。在發(fā)芽0 d時(shí),各品種GABA產(chǎn)量均較低,在發(fā)芽4 d后均有顯著提高,其中YH-NJ發(fā)芽后GABA產(chǎn)量是發(fā)芽前的29.17 倍,達(dá)到840.81 ?g/g,這也顯著高于其他品種發(fā)芽后的含量。表明發(fā)芽過程有利于大豆體內(nèi)GABA的積累。綜上所述,4 個(gè)品種大豆在培養(yǎng)4 d后,YH-NJ的發(fā)芽率、芽長和呼吸強(qiáng)度顯著高于其他品種。與原料相比,發(fā)芽4 d后YH-NJ的蛋白酶活力、游離氨基酸含量的增加量也顯著高于其他品種,GABA產(chǎn)量及增加量均為最大。因此,YH-NJ是大豆發(fā)芽富集GABA的良好品種。

        表3 大豆發(fā)芽過程中水和主要含氮物質(zhì)含量變化Table3 Change in nitrogenous components during soybean germination

        2.2 培養(yǎng)條件優(yōu)化

        2.2.1 培養(yǎng)液pH值的選擇

        表4 培養(yǎng)液pH值對(duì)大豆芽菜GABA富集的影響Table4 Effect of pH of buffer solution on GABA accumulation in germinating soybean

        由表4可知,在培養(yǎng)液pH值為3.0~6.5時(shí),大豆芽長無顯著差別,這表明培養(yǎng)液pH值對(duì)大豆芽長無顯著影響。可溶性蛋白含量隨培養(yǎng)液pH值的增加呈先降低后增加再降低的趨勢(shì),在pH 3.0和pH 5.5時(shí)可溶性蛋白含量較高,在pH 4.0時(shí)含量最低,僅為39.87 mg/g。游離氨基酸含量在pH 3.0~6.5之間呈先增大后減小的變化趨勢(shì),在pH 4.5時(shí)達(dá)到最大值30.69 mg/g,顯著高于其他pH值條件下的含量。不同培養(yǎng)液pH值對(duì)GABA富集的影響不同,低pH 3.0~4.0對(duì)GABA的積累有抑制作用,而高pH 6.0~6.5也不利于GABA的富集。當(dāng)培養(yǎng)液pH值為5.0時(shí),發(fā)芽大豆GABA產(chǎn)量最高(1 580 μg/g)。因此,確定低氧脅迫下大豆發(fā)芽富集GABA培養(yǎng)液pH值為5.0。

        2.2.2 發(fā)芽溫度的選擇

        表5 低氧發(fā)芽溫度對(duì)大豆芽菜GABA富集的影響Table5 Effect of germination temperature on GABA accumulation in germinating soybean

        由表5可知,隨發(fā)芽溫度的升高,發(fā)芽大豆芽長呈現(xiàn)先增高后降低的趨勢(shì),在38℃時(shí)大豆芽長最短,表明34℃以上的高溫條件并不適合大豆生長。在發(fā)芽溫度為22~38℃之間時(shí),可溶性蛋白含量呈上升趨勢(shì),在38℃時(shí)含量最多,是22℃時(shí)的1.97倍。表明發(fā)芽溫度的升高,有利于可溶性蛋白的積累。GABA產(chǎn)量變化與游離氨基酸相似,均隨發(fā)芽溫度的升高呈現(xiàn)先升高后降低的趨勢(shì),在30℃時(shí),GABA產(chǎn)量也達(dá)到最大值,而在38℃時(shí)其產(chǎn)量最低。表明GABA產(chǎn)量變化和游離氨基酸含量變化基本一致。

        2.2.3 發(fā)芽時(shí)間的選擇

        表6 發(fā)芽時(shí)間對(duì)大豆芽菜GABA富集的影響Table6 Effect of germination time on GABA accumulation in germinating soybean

        由表6可知,隨大豆發(fā)芽時(shí)間的延長其芽長逐漸增長,在72 h時(shí)值最大;同時(shí),隨著芽長的不斷增長,大豆芽菜腐敗和褐變現(xiàn)象也逐漸明顯。在大豆生命活動(dòng)中可溶性蛋白是一個(gè)合成代謝與分解代謝共同進(jìn)行的過程,在發(fā)芽0~60 h過程中逐漸降低,60 h時(shí)可溶性蛋白含量僅為發(fā)芽0 h的30%,而72 h含量又變?yōu)樵黾?,表明在發(fā)芽60 h前,大豆分解代謝大于合成代謝,而60 h后合成代謝大于分解代謝。隨發(fā)芽時(shí)間的延長,大豆芽菜中游離氨基酸含量逐漸增加。發(fā)芽72 h時(shí)游離氨基酸含量分別為發(fā)芽0、24、48 h的2.65、1.62、1.37 倍。表明增加發(fā)芽時(shí)間,更多的大分子蛋白質(zhì)逐漸分解為氨基酸等小分子物質(zhì)。GABA產(chǎn)量在發(fā)芽0~72 h呈現(xiàn)先升高后降低的趨勢(shì),在發(fā)芽48 h時(shí)達(dá)到最大值,是發(fā)芽0 h的1.98 倍,是未發(fā)芽大豆的58.35 倍。表明低氧脅迫下發(fā)芽48 h有利于GABA的富集。

        2.2.4 培養(yǎng)條件優(yōu)化

        2.2.4.1 正交試驗(yàn)設(shè)計(jì)及結(jié)果

        以GABA產(chǎn)量為指標(biāo),選擇影響大豆發(fā)芽富集GABA的主要因素,培養(yǎng)液pH值、發(fā)芽溫度和發(fā)芽時(shí)間,進(jìn)行三因素三水平正交試驗(yàn)。

        表7 正交試驗(yàn)結(jié)果及分析Table7 Orthogonal array design results and analysis

        由表7可知,極差分析表明培養(yǎng)液pH值、發(fā)芽溫度和發(fā)芽時(shí)間三因素對(duì)大豆發(fā)芽富集GABA影響大小順序依次為發(fā)芽時(shí)間>培養(yǎng)液pH值>發(fā)芽溫度。大豆發(fā)芽富集GABA最適培養(yǎng)條件為:培養(yǎng)液pH 5.0、發(fā)芽溫度30 ℃、發(fā)芽時(shí)間48 h。

        表8 正交試驗(yàn)結(jié)果方差分析Table8 Analysis of variance

        由方差分析(表8)可知,培養(yǎng)液pH值和發(fā)芽時(shí)間對(duì)GABA產(chǎn)量影響顯著(P<0.05),發(fā)芽溫度對(duì)GABA積累的影響極顯著(P<0.10)。

        2.2.4.2 驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)結(jié)果

        根據(jù)正交試驗(yàn)結(jié)果,分析得到發(fā)芽大豆富集GABA的最佳培養(yǎng)條件為:發(fā)芽機(jī)中正常培養(yǎng)4 d,再低氧脅迫培養(yǎng)48 h,培養(yǎng)液pH 5.0,發(fā)芽溫度30 ℃。為了驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性,在正交試驗(yàn)設(shè)計(jì)的各因素范圍之內(nèi),隨機(jī)選擇一組試驗(yàn)組合(發(fā)芽機(jī)中正常培養(yǎng)4 d,再低氧脅迫培養(yǎng)60 h,培養(yǎng)液pH 4.5,發(fā)芽溫度34 ℃),與正交試驗(yàn)所得最佳試驗(yàn)組合進(jìn)行驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)。最佳組合在芽長、游離氨基酸和GABA產(chǎn)量上均高于隨機(jī)組合,其中GABA產(chǎn)量也高于正交試驗(yàn)中的最高含量(1.88 mg/g)。驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)結(jié)果進(jìn)一步證明試驗(yàn)結(jié)果是可靠的。

        3 討論與結(jié)論

        籽粒萌發(fā)時(shí),酶系統(tǒng)形成及激活,貯藏物質(zhì)降解,為呼吸等生理活動(dòng)提供底物,表現(xiàn)為籽粒內(nèi)物質(zhì)組成和含量發(fā)生變化。薛云皓等[10]研究得出,玉米發(fā)芽期間可溶性蛋白質(zhì)含量逐漸增加。糙米隨著發(fā)芽時(shí)間的延長,可溶性蛋白含量先增加后減少,游離氨基酸含量增加,增加的可溶性蛋白來自于貯藏蛋白的水解和新蛋白合成[11]。本實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,大豆發(fā)芽4 d后,不同品種大豆發(fā)芽率、含水量、呼吸速率呈顯著差異,蛋白酶活力升高,可溶性蛋白降低,游離氨基酸含量升高。YH-NJ的生命活動(dòng)最為旺盛,蛋白酶活力變化大,可溶性蛋白含量高,游離氨基酸合成量多。

        籽粒發(fā)芽過程中,蛋白酶活性增強(qiáng),使難溶的蛋白水解為易溶的小分子蛋白、肽或氨基酸,再將氨基酸運(yùn)轉(zhuǎn)到胚的生長部位,然后以不同的方式加以利用,使氨基酸含量和比例以及蛋白質(zhì)組成發(fā)生變化,此時(shí)對(duì)人體的營養(yǎng)價(jià)值大為提高[1]。GABA作為一種功能性氨基酸,在發(fā)芽過程中得到了積累。發(fā)芽顯著地提高了糙米的GABA產(chǎn)量[12]。房克敏等[13]研究了16 個(gè)品種稻米,測(cè)定其GABA產(chǎn)量,結(jié)果表明發(fā)芽后糙米GABA產(chǎn)量顯著增加,也證實(shí)了糙米品種對(duì)發(fā)芽后GABA產(chǎn)量變化有很大影響。本實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,發(fā)芽能夠增加大豆體內(nèi)GABA產(chǎn)量,但不同品種大豆間GABA增幅存在差異,YH-NJ增幅量最大,最適宜作為富GABA大豆芽菜食品原料。

        植物體內(nèi)可溶性蛋白和游離氨基酸含量是反映植物代謝情況較為敏感的指標(biāo)[14]。盧太白等[15]發(fā)現(xiàn),小麥在低溫脅迫下的生長狀況與游離氨基酸的積累正相關(guān)。不同條件下大豆芽菜可溶性蛋白與游離氨基酸含量不同反應(yīng)了其體內(nèi)代謝情況不同。

        溫度影響籽粒發(fā)芽,還影響酶蛋白質(zhì)構(gòu)象、酶與激活劑的親和力及參與酶促反應(yīng)功能團(tuán)的解離等[16]。大多數(shù)植物GAD的最適溫度范圍在35~40 ℃,DAO最適溫度為40 ℃[16-17]。糙米發(fā)芽期間隨溫度升高GAD活性被激活,GABA得到積累[18]。通常植物中GAD的最適反應(yīng)pH值在5.5~6.0之間,DAO的最適反應(yīng)pH值在6.5左右,表明植物體內(nèi)GAD在酸性環(huán)境下活性高。由于植物體內(nèi)L-Glu脫羧,造成反應(yīng)體系pH值升高,偏離了GAD的最適pH值,使GABA富集速率下降[19-20]。Bai Qingyun等[9]研究表明,粟谷富集GABA的最適pH值為5.8,與GAD的最適pH值相近。李巖等[21]則采用pH 3.19的檸檬酸-磷酸緩沖液富集蠶豆GABA。Carroll等[22]的實(shí)驗(yàn)表明,酸性環(huán)境激活了胡蘿卜細(xì)胞的GAD活性,導(dǎo)致GABA積累,當(dāng)胞質(zhì)pH值恢復(fù)正常后GAD活性降低,這些實(shí)驗(yàn)為植物細(xì)胞質(zhì)pH值變化影響GABA合成提供了證據(jù)。本研究篩選出大豆芽菜富集GABA的最優(yōu)溫度為30 ℃,低于最適溫度,是因?yàn)榇蠖拱l(fā)芽是生命活動(dòng)的過程,過高溫度不利生長;最適pH值為5.0,表明植物在微酸性環(huán)境下GAD活性提高。

        大豆籽粒發(fā)芽4 d后,YH-NJ的發(fā)芽率、芽長和呼吸強(qiáng)度顯著高于理想M-7、95-優(yōu)1和蘇青1號(hào)品種。發(fā)芽4 d后YH-NJ的蛋白酶活力,游離氨基酸增加量也顯著高于其他品種,GABA增加量為最大。YH-NJ是大豆發(fā)芽富集GABA的合適品種。大豆富集GABA的最佳培養(yǎng)條件為:正常培養(yǎng)4 d后,低氧脅迫培養(yǎng)48 h,培養(yǎng)液pH 5.0,發(fā)芽溫度30 ℃。在此條件下,GABA產(chǎn)量達(dá)到1.97 mg/g,是隨機(jī)組的1.56 倍。

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        Cultivar Selection and Culture Condition Optimization for γ-Amino Butyric Acid (GABA) Accumulation in Germinating Soybean under Hypoxia Stress

        WANG Shu-fang, YANG Run-qiang, GU Zhen-xin*
        (College of Food Science and Technology, Nanjing Agricultural University, Nanjing 210095, China)

        After 4-day germination, t he germination percentage, sprout length and respiratory rate of the soybean cultivar YH-NJ were higher than those of all other cultivars tested. The increment of soluble protein, free amino acids and protease activity in YH-NJ sprouts were higher than those of the other cul tivars. The content of (GABA) was increased and its level in YH-NJ sprouts was the highest. Thus, the cultivar YH-NJ was selected for GABA accumulation in further experiments. Using orthogonal design method, the optimal culture conditions for GABA accumulation in 4-day germinated YH-NJ sprouts were determined as germination in a culture solution at pH 5.0 for another 48 h under hypoxia stress at 30 ℃. Under these conditions, the content of GABA was 1.97 mg/g DW, which was 1.56 times higher than the contro l.

        soybean; germination; γ-aminobutyric acid (GABA); accumulation; cultivar selection; condition optimization; hypoxia stress

        TS214.2

        A

        1002-6630(2014)21-0159-05

        10.7506/spkx1002-6630-201421031

        2014-06-03

        國家自然科學(xué)基金青年科學(xué)基金項(xiàng)目(31401614);江蘇高校優(yōu)勢(shì)學(xué)科建設(shè)工程資助項(xiàng)目

        王淑芳(1989—),女,碩士研究生,研究方向?yàn)槭称分泄δ艹煞值母患夹g(shù)。E-mail:2013808120@njau.edu.cn

        *通信作者:顧振新(1956—),男,教授,博士,研究方向?yàn)樯锛夹g(shù)與功能食品。E-mail:guzx@njau.edu.cn

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