張萍 李小梅

探討影響脂肪組織病理切片質(zhì)量的因素

張萍 李小梅

脂肪組織；病理切片

在病理制片工作中, 常常會遇到脂肪組織, 由于其組織結(jié)構(gòu)特殊, 如果將這些按常規(guī)程序的脫水、浸臘等處理時,其中含有豐富脂肪組織的標(biāo)本難以將其完全溶出, 而使切片不順利, 經(jīng)常出現(xiàn)破碎、擠壓或切片不完整等現(xiàn)象, 直接影響病理切片質(zhì)量, 造成病理診斷的困難。所以湖北省荊州市第三人民醫(yī)院在處理組織過程中通過調(diào)整脫水、浸臘的時間,來保證脂肪組織切片的完整?，F(xiàn)將改進(jìn)后的方法整理如下。

1 取材和固定

由于脂肪組織具有大量脂肪細(xì)胞聚集而成, 而疏松的結(jié)締組織將成群的脂肪細(xì)胞分隔成許多脂肪小葉, 僅有少量的膠原纖維、血管和神經(jīng), 因此對組織固定要充分。取材時組織厚薄要均勻, 一般大小為2 cm×1.5 cm×0.3 cm為宜, 標(biāo)本固定的好壞直接影響制片的各個環(huán)節(jié), 標(biāo)本離體后應(yīng)及時的固定, 防止組織發(fā)生干縮變硬或自容、腐敗。所以固定對于制作脂肪組織切片至關(guān)重要［1］。本科是每天下午3點(diǎn)取材放入10%福爾馬林液固定至第二天上午8點(diǎn)。

2 脫水、透明、浸蠟

因為脂肪組織大部分為脂肪滴, 不利于液體與這些組織的相互滲透。乙醇脫水必須徹底, 盡量使脂肪溶解, 與常規(guī)組織同步用全自動脫水機(jī)對組織進(jìn)行處理, 全自動的病理組織脫水機(jī)是用甲醛、乙醇、二甲苯、石蠟對組織進(jìn)行處理的, 乙醇脫水、二甲苯透明、石蠟浸蠟。同步處理完后將脂肪組織再移至杯中進(jìn)入65℃恒溫箱中繼續(xù)浸蠟2～3 h(石蠟：溶點(diǎn)為56～58℃,內(nèi)加入少量蜂蠟, 比例20：1), 以盡可能除去組織中的透明劑,使脂肪細(xì)胞內(nèi)充滿蠟以增加組織的硬度, 達(dá)到支掌組織的作用［2］。這樣處理的脂肪組織可以保證脂肪組織切片完整。

3 切片和染色

作為脂肪組織的切片不能切的太薄、過薄的切片脂肪含量較少, 影響對中性脂肪的顯示［3］。在切片時要注意水溫控制一般以43℃為宜, 因為水溫過高或浸蠟不足都可使攤片時組織向四周散開, 不僅造成撈片困難、且使組織結(jié)構(gòu)松散融化, 為了使脂肪組織顯示結(jié)構(gòu)完整, 組織切片厚度5～6 μm為宜。

在進(jìn)行HE染色時, 組織要先在69℃烤箱內(nèi)烤10 min, 再用1000～1500 W的電熱吹風(fēng)距離載玻片2～3 cm吹3～5 min, 這樣即能使組織內(nèi)的蠟融化、又使組織與載玻片粘貼牢固不易脫片。進(jìn)入蘇木素染色顏色宜深一些。本科一般在蘇木素中染10 min,染色過程中鹽酸乙醇的分化較為關(guān)鍵, 分化一定要恰到好處［2］。

3 結(jié)果

提高脂肪組織切片質(zhì)量的關(guān)鍵是脫水或浸蠟。脂肪組織脫水、透明后要加倍延長浸蠟時間, 使組織得以充分浸蠟增加組織硬度, 使組織不變形, 才能保證切片平整、組織連片順利且易攤平、無皺折, 塌陷現(xiàn)象, 不易破碎、脂肪細(xì)胞框架完整。使鏡下脂肪組織結(jié)構(gòu)清晰, 層次分明, 無假象。切片質(zhì)量是指導(dǎo)醫(yī)師作出準(zhǔn)確診斷的重要保證。

［1］ 周顯.脂肪組織制片的改良方法.臨床與實(shí)驗病理學(xué)雜志, 2009,25(2):216.

［2］ 邵凌波,陳宇中.提高皮膚脂肪組織切片質(zhì)量的體會.現(xiàn)代實(shí)用醫(yī)學(xué), 2002,14(12):669.

［3］ 胥維勇,楊群,范小莉.顯示神經(jīng)內(nèi)分泌細(xì)胞的方法.中國組織化學(xué)與細(xì)胞化學(xué)雜志, 2006, 15(1):106-107.

434000 湖北省荊州市第三人民醫(yī)院