熊孟祥

(湖北省通城縣人民醫(yī)院,湖北 通城 437400)

人類精子抗原的成分非常復(fù)雜，有位于精子膜表面的多種糖蛋白抗原，也包括自身結(jié)構(gòu)中的抗原成分，血型抗原組織相容性抗原和精子內(nèi)部本身所包含的多種酶類抗原等。這些抗原總體上可以按照以下幾種方式分類[1]：按照組織特異性分為精子特異性抗原和精子非特異性抗原；按照與生育的關(guān)系分為生育相關(guān)抗原和生育非相關(guān)抗原，按照存在部位分為包被抗原、膜固有抗原、胞漿抗原以及核抗原。精子相關(guān)抗原-9(SPAG9)是21世紀(jì)初研究新發(fā)現(xiàn)的睪丸癌抗原，SPAG9屬于JNK相互作用蛋白家族的新成員，是腫瘤睪丸抗原家族一員[2]。腫瘤睪丸抗原屬于在睪丸組織正常表達(dá)，在腫瘤組織中高度表達(dá)，在其他極少數(shù)器官中可能有微弱表達(dá)的一類腫瘤相關(guān)抗原。SPAG9高度表達(dá)與多種腫瘤，如子宮內(nèi)膜癌、腎癌等有關(guān)。SPAG9是一個(gè)定位于人體染色體上的單拷貝基因，定位區(qū)域是各種癌癥中的一個(gè)與癌基因擴(kuò)增和表達(dá)相關(guān)的區(qū)域。腫瘤抗原血清學(xué)分析顯示抗原編碼在17號(hào)染色體上的一個(gè)特定的區(qū)域，并在該區(qū)域內(nèi)增強(qiáng)表達(dá)間接反映了腫瘤的相關(guān)狀況。因此，SPAG9在體內(nèi)的表達(dá)水平能夠很好地在臨床上作為腫瘤檢測(cè)的分子依據(jù)[3]。國(guó)內(nèi)外關(guān)于SPAG9的研究近年來(lái)均有不少，顯示其在活體內(nèi)有較強(qiáng)的體液免疫反應(yīng)，研究人員就此推測(cè)SPAG9是免疫原性腫瘤抗原，具有成為腫瘤疾病早期診斷依據(jù)的潛力。子宮腺肌病為具有生長(zhǎng)功能的子宮內(nèi)膜腺體和間質(zhì)向子宮肌層行惡性浸潤(rùn)，在其中呈現(xiàn)彌漫性生長(zhǎng)。有研究表明，SPAG9在子宮腺肌病中的表達(dá)異常，顯示出兩者之間的相關(guān)性[4]。本研究回顧性分析了我院經(jīng)病理切片以及超聲、核磁共振等多種方式檢測(cè)確診的腫瘤患者的臨床資料。通過(guò)對(duì)患者血清的采集，試驗(yàn)和數(shù)據(jù)的分析對(duì)參試腫瘤患者外周血血清中SPAG9自身抗體的含量進(jìn)行檢測(cè)，旨在更好地將其作為癌癥診斷和治療的參考標(biāo)準(zhǔn)并在臨床上加以指導(dǎo)和應(yīng)用?，F(xiàn)將研究結(jié)果報(bào)道如下。

1 臨床資料

1.1一般資料 本研究回顧性分析了我院相關(guān)科室2011年3月—2012年3月共80例腫瘤患者的臨床資料，均經(jīng)過(guò)病理切片，超聲以及核磁共振等多種方式檢測(cè)確診。其中男45例，女35例；年齡32～70(51.0±1.5)歲。80腫瘤患者中，肝癌29例，肺癌32例，其他癌癥19例。健康對(duì)照組30例，其中男15例，女15例，經(jīng)過(guò)檢查未發(fā)現(xiàn)有異常。2組基本資料比較均無(wú)差異(P均>0.05)。

1.2方法 80例癌癥患者和健康對(duì)照組人員均空腹后進(jìn)行血液采集，每人采集血液3～5 mL，靜止一段時(shí)間后3 000 r/min離心10 min，取上清液血清置于-80 ℃冰箱保存。SPAG9的檢測(cè)采用APAG9重組蛋白作為抗原建立ELISA。每個(gè)板孔內(nèi)加入100 ng抗原，置于4 ℃環(huán)境下過(guò)夜；取出后洗板5次，每次1 min，加密封液后置于37 ℃環(huán)境中穩(wěn)定1.5 h后加入稀釋后的樣品100 μL，置于37 ℃環(huán)境中穩(wěn)定1.5 h后洗板5次，每次1 min。將稀釋后的酶標(biāo)記物100 μL加入體系中，37 ℃環(huán)境中穩(wěn)定1 h后洗板5次，每次1 min。加顯色液顯色，終止液終止后用酶標(biāo)儀讀數(shù)，以健康對(duì)照組最終吸光度值加二倍標(biāo)準(zhǔn)差作為陽(yáng)性判斷標(biāo)準(zhǔn)，記錄并分析所得數(shù)據(jù)。

1.3統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 用SPSS 13.0軟件對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差表示，組間比較采用卡方檢驗(yàn)。計(jì)量資料采用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差表示。2組不同時(shí)間點(diǎn)間的比較采用多因素水平重復(fù)測(cè)量的方差分析。P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié) 果

由80例腫瘤患者采集的血清分析知道，其中SPAG9免疫反應(yīng)的總體陽(yáng)性率為31%，29例肝癌患者的陽(yáng)性率為40%，32例肺癌患者的陽(yáng)性率20%，其他19例癌癥患者的陽(yáng)性率為43%；健康對(duì)照組的陽(yáng)性率僅為6%，與癌癥患者比較有顯著性差異(P<0.05)。研究結(jié)果還顯示，肝癌組和其他癌癥組的OD值均比較分散，出現(xiàn)有較強(qiáng)的免疫反應(yīng)患者；相反，肺癌組患者的OD值顯示較為集中且無(wú)強(qiáng)免疫反應(yīng)患者出現(xiàn)。

3 討 論

癌癥又被稱為惡性腫瘤，是控制細(xì)胞生長(zhǎng)增殖機(jī)制的失控而引起的一類疾病。癌細(xì)胞除了自身失去控制不斷增殖外，還會(huì)局部侵入周圍正常的組織并經(jīng)體內(nèi)循環(huán)系統(tǒng)或淋巴系統(tǒng)在全身轉(zhuǎn)移。導(dǎo)致癌癥發(fā)生的原因非常復(fù)雜：當(dāng)機(jī)體處于化學(xué)污染，電離輻射以及代謝毒素，內(nèi)分泌功能紊亂等各種復(fù)雜環(huán)境時(shí)，機(jī)體正常細(xì)胞就可能因?yàn)檫@些致癌因素的影響而出現(xiàn)癌變，出現(xiàn)機(jī)體局部組織細(xì)胞異常增生以及局部腫塊。因此，癌癥是機(jī)體正常細(xì)胞在多種復(fù)雜因素，多個(gè)不同階段以及基因出現(xiàn)多次突變引起的一類疾病[5]。癌癥的致死率多年來(lái)一直占據(jù)疾病死亡的首位，而癌癥的治療主要是基于早期的診斷和預(yù)防，在癌癥早期診斷過(guò)程中，腫瘤標(biāo)志物是一個(gè)重點(diǎn)，對(duì)其的研究近年來(lái)也逐漸成為熱門。研究人員希望開(kāi)發(fā)出抗腫瘤抗原的自身抗體，從而取代使用血清抗原作為標(biāo)記。腫瘤相關(guān)抗原大多數(shù)為自身蛋白質(zhì)，其免疫原性較弱[6]。近年來(lái)，研究人員發(fā)現(xiàn)SPAG9，SPAG9屬于JNK相互作用蛋白家族的新成員，是腫瘤睪丸抗原家族一員。在腫瘤組織中表達(dá)的陽(yáng)性率很高且SPAG9抗原免疫原性也較強(qiáng)，能使患者出現(xiàn)較強(qiáng)的體液免疫反應(yīng)并產(chǎn)生相應(yīng)的抗體。有研究報(bào)道抗SPAG9抗體在癌癥患者血清中的陽(yáng)性檢出率達(dá)到70%，在活體內(nèi)多種組織類型的早期階段均表現(xiàn)出較高的抗SPAG9免疫活性，相反，健康人的血清中則沒(méi)有[7]。

本研究結(jié)果顯示，健康人外周血中抗SPAG9自身抗體的表達(dá)遠(yuǎn)低于腫瘤患者外周血中抗SPAG9自身抗體的表達(dá)。肝癌患者的體液免疫反應(yīng)性較肺癌和其他癌癥強(qiáng)，可能與組織器官自身的特點(diǎn)相關(guān)。馬延磊等[8]對(duì)SPAG9在肺癌中的表達(dá)做過(guò)詳細(xì)的研究，結(jié)果顯示：SPAG9在肺癌的早中期表達(dá)比在晚期中表達(dá)強(qiáng)，同樣顯示出SPAG9跟腫瘤的發(fā)生和發(fā)展關(guān)系密切，可以作為一種腫瘤發(fā)生發(fā)展甚至轉(zhuǎn)移的一個(gè)生物學(xué)指標(biāo)。因其在肺癌中高度表達(dá)，因此尤其可以作為肺癌發(fā)生發(fā)展的一個(gè)標(biāo)志物。SPAG9的免疫原性已經(jīng)得到證實(shí)，其自身抗體在各種腫瘤患者外周血中均有表達(dá)，但是表達(dá)的程度略有不同。從結(jié)果上來(lái)看，SPAG9自身抗體的陽(yáng)性率還是不高，可能是由于實(shí)驗(yàn)條件還有待于繼續(xù)優(yōu)化，標(biāo)本的處理過(guò)程對(duì)結(jié)果有些許的影響；也可能因?yàn)椴糠只颊叻前┌Y的初次診斷患者，前期的治療因素對(duì)本試驗(yàn)的結(jié)果有影響；此外，參與研究的癌癥患者人數(shù)，健康對(duì)照組人數(shù)和組別的級(jí)別分類等都可能會(huì)影響試驗(yàn)結(jié)果，理論上擴(kuò)大研究樣本數(shù)在進(jìn)行檢測(cè)效果會(huì)更好[9]。

總之，SPAG9在人體多種常見(jiàn)腫瘤疾病中均有顯著地表達(dá)，其表達(dá)的程度與腫瘤的發(fā)生和發(fā)展有密切的關(guān)系，其較高的免疫原性使得其在腫瘤的早期診斷和治療中都起到了積極的作用。相信SPAG9的相關(guān)研究會(huì)是醫(yī)學(xué)領(lǐng)域未來(lái)研究的重點(diǎn)，SPAG9的具體作用機(jī)理和與其相關(guān)的分子水平的研究也將會(huì)有越來(lái)越多的成果問(wèn)世。

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