，，，，，，，，

（1.天津市動物疫病預(yù)防控制中心，天津 300402；2.天津市武清區(qū)動物疫病預(yù)防控制中心，天津301700；3.天津市寶坻區(qū)動物疫病預(yù)防控制中心，天津 301600；4.天津農(nóng)學(xué)院，天津 300210）

天津市奶牛結(jié)核病凈化工程

劉建文1，任景江1，徐繼鵬2，何振伯3，孫 濤1，李 潔1，劉 瑩1，馬文芝4，王志成1

（1.天津市動物疫病預(yù)防控制中心，天津 300402；2.天津市武清區(qū)動物疫病預(yù)防控制中心，天津301700；3.天津市寶坻區(qū)動物疫病預(yù)防控制中心，天津 301600；4.天津農(nóng)學(xué)院，天津 300210）

為完成奶牛結(jié)核病凈化工程，天津市引進了γ-干擾素檢測新技術(shù)，結(jié)合傳統(tǒng)的檢測、撲殺、消毒、檢疫、流調(diào)、監(jiān)管等技術(shù)措施，制定了奶牛結(jié)核病凈化技術(shù)規(guī)范。根據(jù)本市奶牛結(jié)核病防治實際情況，制定了全市奶牛結(jié)核病凈化項目實施方案，確定了科學(xué)的可行的以區(qū)縣為單位分區(qū)實施的凈化技術(shù)路線。通過4年的努力，全市共完成奶牛結(jié)核病檢測71.3萬頭次，檢出陽性牛170頭，且陽性牛呈逐年下降趨勢，2013年無陽性牛檢出。至2013年底，全市所有農(nóng)業(yè)區(qū)縣均達到農(nóng)業(yè)部頒布的奶牛結(jié)核病凈化標準，并通過市畜牧獸醫(yī)局組織的考核驗收。本文對項目實施過程及成功經(jīng)驗進行了分析和探討，以期為其它地區(qū)開展奶牛結(jié)核病凈化工作提供參考。

奶牛；結(jié)核?。粌艋?；探討

牛結(jié)核?。˙ovine Tuberculosis，BTB）是由結(jié)核分枝桿菌引起的一種人畜共患慢性傳染病，以病牛貧血、消瘦、體虛乏力、精神萎靡不振和生產(chǎn)力下降為主要特征［1］。該病在世界各國廣泛分布，世界動物衛(wèi)生組織（OIE）將其列為B類動物疫病，我國也將其列為二類動物疫病。在家畜中，奶牛最易感，其次是水牛和黃牛。由于奶牛和人類關(guān)系密切，特別是牛乳及其制品消費日益廣泛，奶牛結(jié)核病嚴重威脅著人類健康。據(jù)國外學(xué)者研究報道，世界上結(jié)核病人中約有15%是通過飲用結(jié)核病牛奶而感染的［2］。楊醉宇等［3］也通過試驗發(fā)現(xiàn)，9.5%的結(jié)核病牛是由人分枝桿菌感染，而結(jié)核病人中有10.6%為牛分枝桿菌感染。據(jù)報道，我國于1985年和1987年開展了兩次全國奶牛抽樣調(diào)查，發(fā)現(xiàn)牛結(jié)核病的患病率分別為5.83%和5.43%，感染率也相當(dāng)高［4］。世界衛(wèi)生組織專家委員會早在1960年就明確提出在牛群中消除結(jié)核病的理念［5，6］。

鑒于我國奶牛養(yǎng)殖業(yè)蓬勃發(fā)展，而且奶牛養(yǎng)殖存在規(guī)?；酗曫B(yǎng)的特點，人接觸病牛流產(chǎn)物，飲用感染牛的生乳或乳制品均可被感染，所以開展奶牛結(jié)核病凈化工作勢在必行［7］。

近年來，天津市對奶牛結(jié)核病防控工作非常重視。市畜牧獸醫(yī)局于2010年專門制定了“天津市奶牛結(jié)核病凈化工程方案”，并明確詳細可行的凈化措施和技術(shù)路線，同時制定了“天津市奶牛結(jié)核病凈化考核標準及驗收辦法”。在凈化過程中，為了克服現(xiàn)行的國家奶牛結(jié)核病檢測標準PPD變態(tài)反應(yīng)試驗中存在的非特異性高和操作耗時費力等缺點，市動物疫病預(yù)防控制中心引進了當(dāng)前在歐盟和美國等已經(jīng)得到了廣泛應(yīng)用的γ-干擾素檢測技術(shù)［8-11］，通過與傳統(tǒng)的檢測、撲殺、消毒、檢疫、流調(diào)、監(jiān)管等技術(shù)集成，制定了天津市地方標準《奶牛結(jié)核病凈化技術(shù)規(guī)范》，為在全市完成奶牛結(jié)核病凈化任務(wù)提供了可靠的技術(shù)支撐。

1 技術(shù)路線

按照農(nóng)業(yè)部《牛結(jié)核病防治技術(shù)規(guī)范》，結(jié)合天津市具體實際，我市奶牛結(jié)核病凈化工作采取以區(qū)縣為單位分區(qū)管理。依據(jù)奶牛結(jié)核病陽性率不同分為四個區(qū)域，分別為未控制區(qū)（陽性率＞0.5%）、控制區(qū)（陽性率＜0.5%）、穩(wěn)定控制區(qū)（陽性率＜0.1%）和凈化區(qū)（陽性率＜0.05%）。鑒于我市近年來奶牛結(jié)核病報告的陽性率＜0.1%，為科學(xué)開展凈化工作，我市凈化方案按三個區(qū)域劃分為控制區(qū)、穩(wěn)定控制區(qū)和凈化區(qū)，然后根據(jù)各區(qū)具體情況分步推進。檢測技術(shù)路線見圖1。

對于市內(nèi)跨區(qū)調(diào)運和外埠引進的奶牛，強化調(diào)運檢疫和監(jiān)督制度，同時加強生鮮乳銷售監(jiān)管，確保出售的生鮮乳均來自經(jīng)檢測無結(jié)核病的奶牛。通過采取嚴格的檢疫措施，切斷一切可能的結(jié)核病傳入途徑，確保凈化效果。檢疫技術(shù)路線見圖2。

圖1 天津市奶牛結(jié)核病凈化檢測技術(shù)路線圖

圖2 天津市奶牛結(jié)核病凈化檢疫技術(shù)路線圖

2 凈化措施

按照中華人民共和國國家標準《動物結(jié)核病診斷技術(shù)》（GB/T19645－2002）和農(nóng)業(yè)部《牛結(jié)核病防治技術(shù)規(guī)范》，參照牛結(jié)核病防治相關(guān)文獻［12-14］，結(jié)合天津市具體情況，主要采取了以下凈化技術(shù)措施。

2.1 檢測

檢測方法主要采用牛型結(jié)核分枝桿菌PPD皮內(nèi)變態(tài)反應(yīng)試驗，每年上下半年各檢測一次（犢牛應(yīng)于20日齡時進行第一次檢測，100～120日齡時進行第二次檢測）。第一年度全市存欄奶牛均按100%比例檢測，第二年度已進入穩(wěn)定控制區(qū)的區(qū)縣按50%的比例抽檢，未進入穩(wěn)定控制區(qū)的區(qū)縣仍按100%比例檢測；第三年度擬進入凈化區(qū)的區(qū)縣上半年按50%抽檢，下半年按10%抽監(jiān)。已進入凈化區(qū)的區(qū)縣按10%抽檢。

2.2 可疑和陽性牛處理

PPD皮內(nèi)變態(tài)反應(yīng)檢測陽性牛和可疑牛要立即隔離，限制其移動，應(yīng)用γ－干擾素檢測技術(shù)復(fù)檢。復(fù)檢結(jié)果為陽性的，則按陽性牛處理；若仍為可疑，再復(fù)檢，結(jié)果仍為可疑者，視同陽性牛處理?？梢膳４_診陰性的，勿馬上混群，隔離1個月后再檢測陰性方可混群。對于確診的陽性奶牛，應(yīng)立即采取撲殺、焚燒、深埋等無害化處理措施，并按程序做好撲殺記錄，并及時上報撲殺結(jié)果。檢出陽性牛的牛群應(yīng)進行反復(fù)檢測，每次間隔3個月，發(fā)現(xiàn)陽性牛及時處理。

2.3 消毒處理

奶牛群如檢出的陽性牛，實施處理措施后，對可能污染的場所、車輛、用具、物品進行嚴格消毒。對陰性場或假定健康場堅持經(jīng)常性消毒，飼養(yǎng)場及牛舍出入口處設(shè)置消毒池，定期更換消毒藥。牛舍內(nèi)的全部用具應(yīng)定期消毒，產(chǎn)房每周進行一次大消毒，分娩室在臨產(chǎn)牛生產(chǎn)前及分娩后各進行一次消毒。

2.4 檢疫監(jiān)督

本市區(qū)域內(nèi)跨區(qū)縣調(diào)運奶牛，輸出區(qū)縣嚴格執(zhí)行產(chǎn)地檢疫規(guī)程，查驗?zāi)膛＝】禉z測合格證書，對檢疫合格且具有健康檢測合格證的奶牛出具產(chǎn)地檢疫證明。從外埠引進奶牛及其精液胚胎，要嚴格執(zhí)行檢疫審批制度?？缡≌{(diào)運奶牛必須經(jīng)指定通道進入，并接受動物衛(wèi)生監(jiān)督機構(gòu)檢查和消毒。從外埠引入的奶牛，經(jīng)隔離觀察和結(jié)核病檢測合格后方可混群飼養(yǎng)。

2.5 防疫監(jiān)管

動物衛(wèi)生監(jiān)督機構(gòu)負責(zé)監(jiān)督奶牛飼養(yǎng)場（戶）履行動物防疫法律法規(guī)規(guī)定的檢測、消毒、無害化處理、建立防疫檔案、加施畜禽標識、疫情報告、申報檢疫等義務(wù)。生鮮乳收購站必須憑奶牛健康證明收購鮮奶，不得收購經(jīng)檢測不符合健康標準或者未經(jīng)檢疫合格的奶牛生產(chǎn)的生鮮乳。

2.6 流行病學(xué)調(diào)查

在檢測或檢疫過程中發(fā)現(xiàn)陽性牛時，要立即開展緊急流行病學(xué)調(diào)查，追根查源，消滅疫源。

2.7 人員防護

從事奶牛養(yǎng)殖生產(chǎn)、診療檢疫的人員應(yīng)每年進行健康檢查，發(fā)現(xiàn)患有結(jié)核病或其他人畜共患病的員工應(yīng)立即調(diào)離崗位，進行場外治療。新員工入職前必須經(jīng)健康檢查，確認無結(jié)核病與其他傳染病的方可錄用。在奶牛結(jié)核病檢疫凈化過程中，技術(shù)人員應(yīng)按要求做好必要的個人防護。

2.8 技術(shù)培訓(xùn)

本項目引進了先進的牛結(jié)核病檢測新技術(shù)γ－干擾素檢測技術(shù)。為了促進新技術(shù)在我市示范推廣，市動物疫病預(yù)防控制中心外聘專家，專門舉辦了奶牛結(jié)核病γ－干擾素檢測技術(shù)培訓(xùn)班。另外，雖然PPD變態(tài)反應(yīng)試驗技術(shù)要求不太高，但是結(jié)果判定要求以皮皺厚度的增加值為依據(jù)，不同人操作易造成人為誤差。為此，市級和區(qū)縣級動物疫病預(yù)防控制中心均多次聘請有經(jīng)驗的專家開展不同形式的技術(shù)培訓(xùn)。同時，我們還重點對基層獸醫(yī)技術(shù)人員和奶牛場技術(shù)人員進行了針對性的防疫技術(shù)培訓(xùn)，以提高其對動物疫病危害的認識和防控水平，督促其按要求做好各項防疫工作，自覺落實各項防控措施。

3 凈化成效

在各級動物疫病防控人員的共同努力下，天津市已于2013年底完成了奶牛結(jié)核病凈化任務(wù)，檢測情況詳見表1。4年期間，全市共檢測奶牛結(jié)核病71.3萬頭次，檢出陽性牛170頭。其中，2010年檢測奶牛207781頭次，檢出陽性牛91頭；2011年檢測奶牛200205頭次，檢出陽性牛76頭；2012年檢測奶牛185601頭次，檢出陽性牛3頭；2013年檢測奶牛120021頭次，無陽性牛檢出。所有陽性牛均按要求進行了撲殺和無害化處理，并向養(yǎng)殖場戶發(fā)放了撲殺補貼。在凈化工作有序推進的基礎(chǔ)上，市畜牧獸醫(yī)局組織專家組，按照“天津市奶牛結(jié)核病凈化考核標準及驗收辦法”對申請達標區(qū)縣進行了考核驗收。2011年，塘沽、東麗、津南三個區(qū)達到凈化標準，并通過市畜牧獸醫(yī)局組織的考核驗收；2012年，西青、北辰和大港也順利達標驗收；2013年，其他區(qū)縣也陸續(xù)達到凈化標準。至2013年底，全市所有奶牛養(yǎng)殖區(qū)縣均達到凈化標準并通過考核驗收。

4 分析與討論

天津市奶牛結(jié)核病凈化工作的順利完成，不但得益于奶牛養(yǎng)殖的普遍規(guī)?；蜆藴驶业靡嬗陧椖繉嵤┻^程中強有力的組織保障、法律保障、技術(shù)保障、體系保障，以及農(nóng)業(yè)部領(lǐng)導(dǎo)、專家、基層機構(gòu)、防疫隊伍和養(yǎng)殖業(yè)主的強力支持，現(xiàn)總結(jié)經(jīng)驗如下。

表1 天津市奶牛結(jié)核病凈化檢測情況

4.1 科學(xué)決策，有力協(xié)調(diào)，分工明確，執(zhí)行到位

市級和區(qū)縣級均成立了奶牛結(jié)核病凈化工作領(lǐng)導(dǎo)小組、專家組及專項工作組，加強奶牛結(jié)核病凈化工作的領(lǐng)導(dǎo)和組織實施，明確目標和任務(wù)，把責(zé)任落實到部門、人員，確保了工作有計劃按步驟開展。天津市奶牛結(jié)核病凈化項目涉及全市12個有農(nóng)業(yè)的區(qū)縣和市農(nóng)墾集團，包括所有的奶牛養(yǎng)殖小區(qū)和場（戶），凈化團隊包括奶牛結(jié)核病凈化工作領(lǐng)導(dǎo)小組、專家組和專項工作組，職能部門包括畜牧獸醫(yī)管理部門、動物疫病預(yù)防控制機構(gòu)、動物衛(wèi)生監(jiān)督機構(gòu)和基層畜牧獸醫(yī)站。在如此龐大的團隊中，凈化工作能有條不紊順利開展，主要歸結(jié)以下幾點：一是市畜牧獸醫(yī)局作為凈化工作領(lǐng)導(dǎo)決策機構(gòu)，宏觀統(tǒng)籌，組織協(xié)調(diào)項目穩(wěn)步推進；二是市和區(qū)縣兩級疫病預(yù)防控制中心部署縝密，組織有力，指導(dǎo)到位；三是動物衛(wèi)生監(jiān)督機構(gòu)通過加強養(yǎng)殖和調(diào)運環(huán)節(jié)的防疫監(jiān)管，保證了凈化工作的成效。

4.2 完善的法律制度并有力執(zhí)行為項目實施奠定了堅實的法律基礎(chǔ)

《中華人民共和國動物防疫法》是奶牛結(jié)核病凈化工作的根本法律，農(nóng)業(yè)部和天津市頒布的《動物檢疫管理辦法》《天津市動物防疫條例》《乳品質(zhì)量安全監(jiān)督管理條例》和《動物疫情報告管理辦法》是我市奶牛結(jié)核病凈化工作的法律文本。為推進我市奶牛結(jié)核病凈化工作的開展，市級和區(qū)縣級獸醫(yī)主管部門每年均制定具體的奶牛結(jié)核病凈化工作實施方案，并以正式文件下達，為凈化工作目標的完成奠定了堅實的法定基礎(chǔ)。

4.3 科學(xué)的技術(shù)規(guī)范和標準體系為項目開展提供了理論指導(dǎo)

引入牛結(jié)核分枝桿菌γ-干擾素檢測技術(shù)，通過優(yōu)化條件建立牛結(jié)核病單克隆抗體夾心ELISA檢測方法的標準化規(guī)程，制定γ-干擾素檢測技術(shù)規(guī)范；參照中華人民共和國國家標準《動物結(jié)核病診斷技術(shù)（GB/T19645－2002）》，通過優(yōu)化試驗條件制定適于奶牛結(jié)核病檢疫的PPD變態(tài)反應(yīng)試驗技術(shù)規(guī)范；以新型檢測技術(shù)為載體，通過檢疫與撲殺相結(jié)合的技術(shù)策略，構(gòu)建奶牛結(jié)核病凈化集成技術(shù)平臺，制定奶牛結(jié)核病凈化技術(shù)規(guī)范。上述規(guī)范的制定，完善了項目實施的技術(shù)標準體系，為我市奶牛結(jié)核病凈化工作的開展提供理論指導(dǎo)，同時為國內(nèi)其他省市開展該項工作提供重要的參考資料。

4.4 農(nóng)業(yè)部領(lǐng)導(dǎo)和國內(nèi)知名專家的支持和指導(dǎo)為項目開展提供了強大后盾

項目開展之初，由于我市是在全國率先開展此項工作而經(jīng)驗不足，市局和市疫控中心領(lǐng)導(dǎo)多次就結(jié)核病凈化工作向農(nóng)業(yè)部領(lǐng)導(dǎo)匯報并征求意見。農(nóng)業(yè)部有關(guān)領(lǐng)導(dǎo)在對我們的項目給予充分肯定的同時，也提出了許多建設(shè)性的建議。此外，為了提升檢測技術(shù)水平，我們查閱了大量國內(nèi)外文獻，虛心向中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院哈爾濱獸醫(yī)研究所和華中農(nóng)業(yè)大學(xué)等國內(nèi)知名專家請教，獲得了寶貴的理論知識和經(jīng)驗心得，為項目的順利完成提供了有力的技術(shù)支持。

4.5 區(qū)縣領(lǐng)導(dǎo)的支持和基層獸醫(yī)工作者的努力是項目完成的有力保障

區(qū)縣獸醫(yī)部門領(lǐng)導(dǎo)對奶牛結(jié)核病凈化工作高度重視，由局長親自掛帥，主任、所長等親自組織，圍繞市級部署，制定完善的凈化方案，集中技術(shù)骨干組成了凈化工作專家組和行動小組，通過積極宣傳和多方位培訓(xùn)的形式，充分調(diào)動奶牛養(yǎng)殖業(yè)主的積極性，科學(xué)組織開展凈化工作，為項目的順利完成提供了有力保障。

4.6 養(yǎng)殖業(yè)主的高度覺悟和良好配合是項目完成的根本

結(jié)核病凈化工作的主體還是養(yǎng)殖場（戶）。凈化場的建立需要通過檢測淘汰陽性牛來實現(xiàn)。由于財政補貼偏低，撲殺陽性牛會給養(yǎng)殖場（戶）造成較大的經(jīng)濟損失。在凈化過程中，絕大多數(shù)養(yǎng)殖場（戶）都表現(xiàn)較高的覺悟性，積極配合開展檢測凈化工作，特別是以農(nóng)墾集團嘉立荷奶牛場為代表的規(guī)?；B(yǎng)殖場，利用自身較高的技術(shù)力量和較強的經(jīng)濟實力，主動自行開展檢測凈化工作，為我市奶牛結(jié)核病凈化工作全面達標做出了卓越貢獻。

總之，天津市奶牛結(jié)核病凈化項目的完成，在國內(nèi)率先達到農(nóng)業(yè)部頒布的奶牛結(jié)核病凈化標準，制定完善了奶牛結(jié)核病凈化技術(shù)規(guī)范，為我市其它動物疫病的凈化和消滅工作打下良好基礎(chǔ)，也為我國其他省市開展動物疫病凈化工作提供了經(jīng)驗。

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Tuberculosis Eradication in Dairy Cow in Tianjin

Liu Jianwen1，Ren Jingjiang1，Xu Jipeng2，He Zhenbo3，Sun Tao1，Li Jie1，Liu Ying1，Ma Wenzhi4，Wang Zhicheng1

Tianjin Center for Animal Disease Prevention and Control，Tianjin 300402；2.Tianjin Wuqing Center for Animal Disease Prevention and Control，Tianjin 301700；3.Tianjin Baodi Center for Animal Disease Prevention and Control，Tianjin 301600；4.Tianjin Agricultural College，Tianjin 300210 ）

In order to accomplish the dairy cow tuberculosis eradication project in Tianjin，the technology standards for bovine tuberculosis eradication in dairy cow were developed in combination with traditional technical measures，such as detection，culling，disinfection，quarantine，epidemiological investigation and supervision. The implementation schemes were worked out according to the actual bovine tuberculosis situation in Tianjin，and the scientifc and feasible technical route was determined by eradication of the disease in county（district） as a unit. During the past four years，0.713 million dairy cows were detected and 170 of them was positive，and the number of positive cows was reduced year by year. In 2013，no positive dairy cow was detected and all the counties with agriculture met the bovine tuberculosis freedom standard issued by Ministry of Agriculture and get through the examination conducted by Tianjin Animal Husbandry and Veterinary Bureau. This article analyzes and discusses the implementation process and the successful experiences，hoping to provide advices on dairy cow tuberculosis eradication.

dairy cow；Tuberculosis；cleaning；discuss

R516

：B

1005-944X（2014）08-0058-05

天津市農(nóng)業(yè)科技示范推廣項目，項目編號：201301020

王志成