楊衛(wèi)花，趙浩軍*，梁 恒，陳宏鍇，董建華

（1.云南省大理白族自治州質(zhì)量技術(shù)監(jiān)督綜合檢測中心，云南大理 671000；2.大理學(xué)院農(nóng)學(xué)與生物科學(xué)學(xué)院，云南大理 671003）

·分析測試·

GC-FPD法測定蔬菜中毒死蜱殘留

楊衛(wèi)花1，趙浩軍1*，梁 恒2，陳宏鍇2，董建華1

（1.云南省大理白族自治州質(zhì)量技術(shù)監(jiān)督綜合檢測中心，云南大理 671000；2.大理學(xué)院農(nóng)學(xué)與生物科學(xué)學(xué)院，云南大理 671003）

改進了國家標(biāo)準(zhǔn)NY／T 761-2008蔬菜中殘留毒死蜱檢測方法的前處理方法。優(yōu)化的GCFPD檢測方法的回收率為80.5%～95.5%，檢出限達到0.01mg／kg，相對標(biāo)準(zhǔn)偏差在2.5%～7.2%之間。所改進的前處理方法效果顯著，優(yōu)化的檢測方法簡便、準(zhǔn)確、可靠，可應(yīng)用于蔬菜中毒死蜱殘留的檢測。

蔬菜；農(nóng)藥殘留；毒死蜱；GC-FPD

蔬菜是人們?nèi)粘Ｉ畈豢扇钡氖称罚怯行┦卟艘自馐懿∠x害，因此在種植過程中需要噴灑農(nóng)藥。有機磷農(nóng)藥毒死蜱因其具有2～4個月的持效期而經(jīng)常被使用［1］。根據(jù)中華人民共和國國家標(biāo)準(zhǔn)GB／2763-2012，毒死蜱在蔬菜中最大允許的殘留量為0.05 mg／kg［2］，但因其較長的持效期容易導(dǎo)致殘留，因此為確保食品安全，準(zhǔn)確可靠檢測蔬菜中毒死蜱成為必須。

國家標(biāo)準(zhǔn)中蔬菜中毒死蜱的檢測方法為NY／T 761-2008［3］。該方法的前處理簡單快速，但是對含色素等雜質(zhì)的提取物未做凈化處理，會對檢測造成基體干擾，也容易引起進樣口、色譜柱和檢測器的污染。目前，除國家標(biāo)準(zhǔn)NY／T 761-2008外，還有其它蔬菜中毒死蜱的檢測方法，如氣相色譜法（GC）［4-6］、氣相色譜-質(zhì)譜法（GC-MS）［1，7］、氣相色譜-質(zhì)譜-質(zhì)譜法（GC-MS／MS）［8］，但是這些方法都未專門針對蔬菜中被同時提取出來的色素進行專門凈化。近紅外光譜分析法（NIR）基本上只適用背景與模擬相似的理想樣品［9］，離實際應(yīng)用還有很大的差距。

本實驗重點改進了國家標(biāo)準(zhǔn)中蔬菜毒死蜱檢測方法的凈化方法，針對蔬菜如菜心、韭菜等色素較多的樣品，進行了優(yōu)化，使樣品處理更為徹底，提高了檢測效果。另外，結(jié)合優(yōu)化的前處理方法，建立氣相色譜-火焰光度檢測器（GC-FPD）的檢測方法并將檢測方法用于檢測市售蔬菜中的毒死蜱殘留。

1 材料與方法

1．1 材料

樣品及試劑：菜心10個，韭菜10個，芹菜10個，都為市場隨機購買；毒死蜱標(biāo)準(zhǔn)溶液（100μg／mL GSB05-1869-2008，農(nóng)業(yè)部環(huán)境保護科研監(jiān)測所）、乙腈（色譜純）、正己烷（AR）、丙酮（AR）、氯化鈉（AR）、3mL（0.25 g）活性碳柱（Supelco Analytical公司）。

儀器：GC-QP2010 plus型氣相色譜儀附火焰光度檢測器（FPD）（日本島津公司）；JYL-C020九陽料理機；AB204-E電子天秤（梅特勒-托利多儀器有限公司）；AS20500BDT型超氣波清洗器（天津澳特賽恩斯儀器公司）；M37610-33CN型MAXIMIX II渦旋振蕩器（賽默飛世爾科技公司）；MTN-2800W型氮吹儀（氮吹濃縮裝置，天津澳特賽恩斯儀器公司）。其它為實驗室常見設(shè)備。

1.2 方法

1.2.1 溶液配制

毒死蜱標(biāo)準(zhǔn)母液：吸取毒死蜱標(biāo)準(zhǔn)溶液1 mL于100mL的容量瓶內(nèi)，用丙酮定容至刻度，即配成質(zhì)量濃度為1.0mg／L的標(biāo)準(zhǔn)儲備液，于4℃冰箱中保存。用儲備液分別逐級稀釋至0.01、0.05、0.1、0.2mg／L做標(biāo)準(zhǔn)曲線。

正己烷-丙酮試劑：取200m L正己烷和50 mL的丙酮混合均勻制成。

1.2.2 儀器條件

GC-FPD色譜條件：色譜柱為Rxi-50（30m× 0.25 mm；0.25μm）。FPD檢測器，溫度：250℃；升溫程序：初溫110℃，保持10 min，以30℃／min升至210℃，保持3min，以3℃／min升至235℃，以25℃／min升至245℃，保持3 min；進樣口溫度：250℃，不分流，流速：39.8 cm／s；進樣量：1μL。

1.2.3 樣品的前處理

樣品提取凈化方法1（NY／T 761-2008［3］）：取新鮮的蔬菜樣品，取可食用部分，切碎后放入料理機中勻槳，轉(zhuǎn)入樣品瓶中，準(zhǔn)確稱取10 g樣品（精確到0.1 mg）放入100m L比色管中，加入5mL純水和50mL乙腈試劑，搖勻后放入超聲波清洗器中震蕩30 min，濾紙過濾，在濾液中加入5～7 g氯化鈉，用渦旋振蕩器振蕩使液面分層，靜置30 min。后取10.0 mL乙腈溶液，放入試管中，將試管置于氮吹儀中吹到近干，加入2.0mL丙酮。揺勻后轉(zhuǎn)入15mL帶刻度離心管中，再加約3mL丙酮分3次沖洗試管，最后定容至5.0 m L，渦旋振蕩后移至進樣瓶中待測。

方法2：（國標(biāo)改進方法）用移液管吸取10mL方法1所得的離心上清液移至試管中。60℃水浴吹氮濃縮近干，取出后向試管中加入3 mL正己烷-丙酮試劑，渦旋振蕩1 min，將所得提取液加入已預(yù)洗（5mL正己烷-丙酮試劑）的SPF活性碳小柱中并3次淋洗（每次3mL），將所得淋洗液氮吹濃縮近干，加2.0mL正己烷-丙酮試劑溶解，渦旋振蕩后移至進樣瓶中待測。

2 結(jié)果與討論

2.1 不同前處理方法結(jié)果比較

在1.2.3的基礎(chǔ)上對方法1和方法2做了進一步的優(yōu)化，以0.1mg／kg毒死蜱添加樣品為實驗樣品。得到圖1和圖2兩個比較譜圖，明顯看出經(jīng)方法2處理過的樣品信噪比更高，同時所得的測定液無任何顏色，說明活性碳已吸附了大部分的雜質(zhì)。

圖1 方法1處理色譜圖（0．1mg／kg毒死蜱添加樣品）Figure 1 Method 1 processing chromatograms（0．1mg／kg chlorpyrifos add sample）

圖2 方法2處理色譜圖（0．1mg／kg毒死蜱添加樣品）Figure 2 Method 2 processing chromatograms（0．1mg／kg chlorpyrifos add sample）

2．2 GC-FPD檢測結(jié)果

在吸附色素等雜質(zhì)的同時是否也吸附了目標(biāo)物毒死蜱？所選的方法能否滿足檢測要求？為驗證方法的可行性及準(zhǔn)確性，特做了標(biāo)準(zhǔn)曲線建立、線性關(guān)系計算、菜心樣品標(biāo)準(zhǔn)添加回收試驗、市售蔬菜制品檢測等工作。

2.2.1 標(biāo)準(zhǔn)工作曲線和檢出限

使用質(zhì)量濃度梯度為0.01mg／L、0.05mg／L、 0.1mg／L、0.2 mg／L毒死蜱標(biāo)準(zhǔn)溶液測定，以標(biāo)樣質(zhì)量濃度（mg／L）對峰面積建立標(biāo)準(zhǔn)曲線用于對實際添加樣品的定量定性的檢測方法。根據(jù)實際檢測時的信噪比（S／N）為3時作為定性檢出限。在所確定的GC-FPD實驗條件下，毒死蜱標(biāo)準(zhǔn)質(zhì)量濃度在0.01～0.2mg／L范圍內(nèi)與響應(yīng)值有良好的線性關(guān)系，相關(guān)系數(shù)r＝0.999，檢出限達到0.01mg／kg，見表1。

表1 回歸方程及檢出限Table 1 Regression equation and detection lim it

2.2.2 添加回收率及精密度實驗

按照上述GC-FPD儀器條件設(shè)置及測定步驟，對一個菜心樣品進行了添加回收試驗，結(jié)果如表2所示，3個添加質(zhì)量濃度為0.05、0.1、0.2mg／kg。要求毒死蜱添加濃度范圍內(nèi)，回收率在80%～120%之間，平行性要求相對標(biāo)準(zhǔn)偏差RSD%＜10%。結(jié)果表明，此方法的回收率達到80.5%～95.5%，相對標(biāo)準(zhǔn)偏差RSD%＜10%（n＝4）。

由2.2.1～2.2.3的結(jié)果得出，優(yōu)化的方法線性良好，檢出限低，回收率達到要求。

表2 回收率和精密度檢測結(jié)果（n＝4）Table 2 Recovery and precision test results（n＝4）

2.2.3 市售蔬菜樣品檢測

使用此方法對市售30個蔬菜樣品進行了實際檢測，檢測結(jié)果見表3。

表3 市售蔬菜樣品毒死蜱檢測結(jié)果Table 3 Actual comm ercial vegetable sam p les chlorpyrifos test result tab le

通過實際樣品的檢測，可知部分蔬菜中尤其是菜心樣品中有較高濃度的毒死蜱檢出現(xiàn)象出現(xiàn)，因此，農(nóng)戶在種植菜心的時候應(yīng)該考慮農(nóng)藥的噴灑量及殘留時間［10］，消費者在購買菜心的時候，應(yīng)認(rèn)真清洗后方可食用。［11］

3 結(jié)論

針對市銷售蔬菜中有農(nóng)藥殘留毒死蜱檢出的現(xiàn)象，對蔬菜中毒死蜱的檢測方法進行了研究。先對國家標(biāo)準(zhǔn)方法NY／T 761-2008［10］的前處理方法進行了改進，改變了原來凈化方法過于簡單或根本末經(jīng)凈化的作法，用了活性碳小柱對雜質(zhì)的吸附，達到了樣品凈化的目的，為后邊順利進行毛細(xì)管氣相色譜分離檢測奠定了良好基礎(chǔ)。另外，采用了GC-FPD的檢測方法，方法的線性、回收率、檢出限都可達要求。同時，還對市售的一些樣品進行隨機購買檢測，毒死蜱時有檢出且超標(biāo)現(xiàn)象也有發(fā)生，因此應(yīng)加大對市售蔬菜尤其是菜心中毒死蜱抽查檢測的力度，本方法可作為檢測的推廣方法。

［1］ 汪軍.GC-MS定性定量分析出口西蘭花樣品中毒死蜱的農(nóng)藥殘留量［J］.現(xiàn)代農(nóng)藥，2002（1）：23-24.

［2］ GB 2763-2012食品安全國家標(biāo)準(zhǔn)食品中農(nóng)藥最大殘留限量［S］.

［3］ NY／T 761-2008，蔬菜和水果中有機磷、有機氯、擬除蟲菊酯和氨基甲酸酯類農(nóng)藥多殘留的測定［S］.

［4］ 陸小磊，吳慧明，金紹強，等.毒死蜱在4種作物中殘留量的氣相色譜分析方法［J］.浙江農(nóng)業(yè)科學(xué)，2009（1）：168-172.

［5］ 陸勛元，蔣永祥.氣相色譜法同時檢測和分析蔬菜中毒死蜱、氯氰菊酯和氰戊菊酯的殘留量［J］.理化檢驗：化學(xué)分冊，2006，42（9）：737-739.

［6］ 喻龍，李光義，鄧曉，等.蔬菜中殘留毒死蜱的檢測方法［J］.植物保護科學(xué)，2007，23（12）：338-340.

［7］ 安捷倫科技有限公司.氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)同時分析蔬菜或水果中189種農(nóng)藥殘留化合物［J］.環(huán)境化學(xué)，2001，20（5）：517-520.

［8］ 凌云，王菡，雍煒，等.氣相色譜-質(zhì)譜／質(zhì)譜法檢測蔬菜中的毒死蜱及其代謝物［J］.色譜，2009，27（1）：78-81.

［9］ 劉翠玲，隋淑霞，孫曉榮，等.近紅外光譜技術(shù)用于菠菜中毒死蜱殘留的定量分析研究［J］，食品科學(xué)，2008，29（7）：356-358.

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［11］ 劉振龍，王開運，夏曉明，等.小白菜中毒死蜱殘留去除方法的研究［J］.農(nóng)業(yè)環(huán)境科學(xué)學(xué)報，2007，26（2）：729-733.

Determ ination of Pesticide Residue Chlorpyrifos in Vegetable by GC／FPD

YANG W ei-hua1，ZHAO Hao-jun1*，LIANG Heng2，CHENG Hong-kai2，Dong Jian-hua1

（1.Dali Quality and Technical Supervision Comprehensive Inspection Centre，Dali，671000，China；2.College of Agriculture and Bioscience，Dali University，Dali671003，China）

The pretreatmentmethods of NY／T 761－2008 for detecting pesticide residues chlorpyrifos in vegetable have been optimized.At the same time GC－FPD detection method was built.The results showed that the recovery of the optim ized GC－FPD detectionmethod ranged between 80.5%－95.5%，detection limits reached 0.01mg／kg，the relative standard deviation ranged between 2.5%－7.2%.The optimized pretreatmentmethod has good result and the new detectionmethod built is accurate，and easy to operate.

vegetable；pesticide residue；Chlorpyrifos；GC－FPD

O657

： A

： 1004-275X（2014）01-0038-04

12.3969／j.issn.1004-275X.2014.01.010

收稿：2013-07-08

楊衛(wèi)花（1979-），女，云南麗江人，碩士，工程師，主要從事食品質(zhì)量安全檢測研究。

*通信作者：趙浩軍962721345＠qq.com