李 楊，羅廷順，代欣桃，錢(qián)金栿*

（1.大理學(xué)院，云南大理 671003；2.大理州食品藥品檢驗(yàn)所，云南大理 671000）

天南星提取物的抑菌作用研究

李 楊1，羅廷順2，代欣桃2，錢(qián)金栿1*

（1.大理學(xué)院，云南大理 671003；2.大理州食品藥品檢驗(yàn)所，云南大理 671000）

目的：研究天南星提取物的抑菌作用。方法：采用常量稀釋法測(cè)定天南星生藥和飲片的水提取物、醇提取物和乙酸乙酯提取物分別對(duì)金黃色葡萄球菌等11種供試菌的抑菌作用。結(jié)果：天南星生藥和飲片的各提取物對(duì)11種供試菌均有抑菌作用，其中乙酸乙酯部位抑菌活性最強(qiáng)。結(jié)論：天南星生藥和飲片的各提取物具有較好的抑菌作用，為其進(jìn)一步開(kāi)發(fā)利用奠定基礎(chǔ)。

天南星提取物；抑菌作用；最低抑菌濃度

天南星為天南星科天南星屬植物，以云南資源最為豐富。作為常用中藥天南星具有燥濕化痰、祛風(fēng)止痛、散結(jié)消腫等功效，用于咳嗽、眩暈、驚風(fēng)等；外用治癰腫、蛇蟲(chóng)咬傷〔1〕。天南星具有抗腫瘤、抗心律失常、抗氧化、抗驚厥等多種藥理活性〔2-7〕。中草藥抗菌成分具有不易產(chǎn)生耐藥性、廣譜抗菌、毒副作用小等優(yōu)點(diǎn)成為研究的熱點(diǎn)。本文研究了天南星生藥和飲片的水提取物、醇提取物和乙酸乙酯提取物對(duì)11種供試菌的體外抗菌作用，為從中草藥中尋找抗菌藥物及天南星的開(kāi)發(fā)利用提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。

1 材料與儀器

1.1藥材天南星采自云南大理蒼山，經(jīng)大理學(xué)院藥學(xué)與化學(xué)學(xué)院夏從龍副教授鑒定為天南星科天南星屬植物天南星（Arisaema erubescens（Wall.）Schott）。天南星飲片購(gòu)自大理集盛大藥房，經(jīng)鑒定為天南星礬制品。

1.2供試菌株金黃色葡萄球菌（S.aureas），白色葡萄球菌（S.albus），大腸埃希菌（E.coli），痢疾志賀菌（S.dysenteriae），綠膿桿菌（P.aeruginosa），枯草芽胞桿菌（B.subtilis），傷寒桿菌（S.typhi），甲型副傷寒桿菌（S.paratyphiA），乙型副傷寒桿菌（S.paratyphiB），金黃色葡萄球菌ATCC25923，大腸埃希菌ATCC25922由大理學(xué)院基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院病原微生物教研室提供。實(shí)驗(yàn)中應(yīng)用金黃色葡萄球菌ATCC25923和大腸埃希菌ATCC25922作為質(zhì)控菌株。

1.3實(shí)驗(yàn)試劑及儀器MH瓊脂（批號(hào)：090817）和MH肉湯（批號(hào)：090526）購(gòu)自杭州天和微生物試劑有限公司；旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀（R-210，瑞士步祺）；冷凍干燥機(jī)（FD-1C-80，北京博醫(yī)康實(shí)驗(yàn)儀器有限公司）；立式壓力蒸汽滅菌器（YXQ-LS-50SII，上海博訊實(shí)業(yè)有限公司醫(yī)療設(shè)備廠）；雙人單面凈化工作臺(tái)（SW-CJ-2FD，蘇州凈化設(shè)備有限公司）；隔水式恒溫培養(yǎng)箱（上海一恒科技有限公司）；電子天平（AL204-1C）。

2 實(shí)驗(yàn)方法

2.1提取物的制備取天南星塊莖經(jīng)干燥、粉碎，經(jīng)蒸餾水回流提取，過(guò)濾，減壓濃縮得天南星水提取物。天南星塊莖粉末經(jīng)95%乙醇回流提取，再經(jīng)70%乙醇回流提取，過(guò)濾，減壓濃縮得醇提取物。醇提取物加水溶解后用乙酸乙酯萃取得乙酸乙酯提取物。將上述提取物分別冷凍干燥后備用；天南星飲片處理方法同上〔8〕。

2.2細(xì)菌懸液的制備將供試菌株分別接種于MH瓊脂平板上，置37℃恒溫培養(yǎng)箱活化24 h。挑取瓊脂平板上形態(tài)相同的菌落，用滅菌生理鹽水調(diào)濃度至0.5麥?zhǔn)蠁挝?，再用MH肉湯稀釋至含菌量約107CFU∕mL。稀釋后的菌液在15 min內(nèi)接種〔9-10〕。

2.3各提取物最低抑菌濃度的測(cè)定取滅菌小試管15支進(jìn)行編號(hào)。其中每組第13、14、15管分別標(biāo)上“肉湯對(duì)照”、“菌液對(duì)照”、“溶劑對(duì)照”。每支試管分別加入MH肉湯2 mL。配制天南星各提取物濃度為50 mg∕mL。用吸管吸取藥液2 mL放入第1管內(nèi)，混勻后吸取2 mL放入第2管，同樣混勻后吸出2 mL放入第3管，依此法逐管進(jìn)行稀釋至第12管。各管藥物濃度分別為25、12.5、6.25、3.125、1.56、0.78、0.39、0.20、0.10、0.05、0.025、0.0125 mg∕mL，除“肉湯對(duì)照”管外其余各管均加入菌液0.1 mL，放入37℃恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24 h，取出，觀察生長(zhǎng)情況。在對(duì)照管符合要求的情況下，以肉眼未見(jiàn)細(xì)菌生長(zhǎng)的最低藥物濃度為天南星對(duì)細(xì)菌的最低抑菌濃度（Mini?mal inhibitory concentration，MIC）〔9-11〕。

3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果

天南星生藥及飲片的醇提取物部分、乙酸乙酯提取物部分、水提取物部分均有抑菌活性，抑菌活性為乙酸乙酯提取物＞醇提取物≥水提取物。天南星飲片提取物較天南星生藥提取物MIC有所降低，提示天南星飲片抑菌活性較強(qiáng)。見(jiàn)表1。

表1 天南星生藥及飲片的各提取物對(duì)11種供試菌的MIC

4 討論

本研究表明，天南星生藥和飲片的各提取物具有較好的抑菌作用，天南星飲片較天南星生藥抑菌作用強(qiáng)，其原因可能是飲片為礬制品，明礬〔12〕入藥后有解毒殺蟲(chóng)、燥濕止癢、止血止瀉、清熱消痰的功效。明礬是否與天南星生藥中含有的抑菌成分產(chǎn)生協(xié)同作用有待進(jìn)一步研究。

中國(guó)是抗生素濫用嚴(yán)重的國(guó)家之一，隨著抗生素的濫用，細(xì)菌的耐藥性越來(lái)越強(qiáng)。植物以及中藥抗菌藥以其不易產(chǎn)生耐藥性、廣譜抗菌、毒副作用小等優(yōu)點(diǎn)成為研究開(kāi)發(fā)的熱點(diǎn)〔13-14〕。本實(shí)驗(yàn)研究了天南星提取物的抑菌活性，為其抑菌成分的進(jìn)一步分離及新藥的開(kāi)發(fā)奠定基礎(chǔ)。

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*通信作者：錢(qián)金栿，教授.

（責(zé)任編輯 李 楊）

Antibacterial Activity of the Extracts from Arisaema erubescens（Wall.）Schott

LI Yang1,LUO Tingshun2,DAI Xintao2,QIAN Jinfu1*
（1.Dali University,Dali,Yunnan 671003，China;2.Dali Institute for Food and Drug Control,Dali,Yunnan 671000，China）

Objective:To explore the antibacterial activity of the extracts from Arisaema erubescens（Wall.）.Methods:Solution dilution method was applied to measure the antibacterial effects of aqueous extract,ethanol extract and ethyl acetate extract from Arisaema erubescens（Wall.）against 11 experimental bacteria include Staphylococcus aureus.Results:All extracts showed antibacterial activity on 11 experimental bacteria.Ethyl acetate extract exhibited best antibacterial activity in 3 extracts.Conclusion:All the extracts of Arisaema erubescens（Wall.）exhibited good antibacterial effect.The research provided a scientific basis for the developing and utilizingof Arisaemaerubescens（Wall.）.

extracts in Arisaema erubescens;antibacterial activity;minimal inhibitory concentration（MIC）

R285

A

1672-2345（2014）02-0009-03

10.3969∕j.issn.1672-2345.2014.02.004

云南省教育廳研究生基金資助項(xiàng)目（2011J057）

2013-12-04

2013-12-17

李楊，助理編輯，主要從事藥物分析及活性研究.