顧偉 李春盛 殷文朋 張健 侯曉敏 張達

【摘要】目的 探討轉錄因子GATA-3和T-bet的表達失衡是否參與了豬心肺復蘇后的急性肺損傷機制。方法 26頭豬隨機（隨機數(shù)字法）分為假手術組（SHAM）（6只）、復蘇12 h組和復蘇24 h組（各10只）。建立室顫8 min小型豬模型；用流式細胞術檢測豬外周血淋巴細胞（PBL）中CD3⁺、CD4⁺和CD8⁺淋巴細胞亞群的分布；采用酶聯(lián)免疫吸附（ELISA）方法檢測血漿中白細胞介素-4（IL-4），腫瘤壞死因子α （TNF-α）和干擾素γ（INF-γ）的含量；采用Western-blot法檢測肺組織GATA-3和T-bet的蛋白表達；用實時熒光PCR法定量肺組織GATA-3和T-bet mRNA水平。結果 復蘇組小豬發(fā)生嚴重肺組織細胞損傷，在復蘇后的12 h和24 h，豬血清中CD4⁺細胞的比例（28，4±2，3）%，（24，1±1，6）%明顯低于假手術組（48，4±2，9）%，（51，1±5，4）%；CD4⁺/CD8⁺（1，7±0，9），（1，5±1，0）也較假手術組明顯減低（2，5±1，3），（2，7±1，1）（P<0，05）；IL-4和TNF-α 水平在2～12 h逐漸升高（P<0，01）； INF-γ水平和INF-γ /IL-4卻在2～12 h逐漸降低。復蘇組的肺組織GATA-3的蛋白表達較假手術組分別在12 h、24 h明顯升高，T-bet的蛋白表達和T-bet/GATA-3則分別在12 h、24 h明顯降低。復蘇組的肺組織GATA-3和T-bet的mRNA水平較假手術組分別在12 h、24 h明顯升高和減低。結論 轉錄因子GATA-3和T-bet的表達失衡導致的肺免疫功能障礙可能參與了心肺復蘇后急性肺組織損傷的過程。

【關鍵詞】心肺復蘇；急性肺損傷；Th1/Th2失衡；免疫功能障礙；GATA-3；T-bet

Role of imbalance between transcription factors GATA-3 and T-bet expressions in the pathogenesis of acute lung injury after resuscitation Gu Wei，Li Chunsheng，Yin Wenpeng，Zhang Jian，Hou Xiaomin，Zhang Da. Department of Emergency Medicine， Beijing Chaoyang Hospital， Capital Medical University， Beijing 100020， China

Corresponding author： Li Chunsheng， Email： banditgu@hotmail，com

【Abstract】Objective To study the role of imbalance between transcription factors GATA-3 and T-bet expressions in causing acute lung injury after resuscitation in cardiac arrest model of swine.Methods After swine model of electrically induced cardiac arrest was established for 8 minutes， animals were resuscitated to get restoration of spontaneous circulation （ROSC）. The swine with ROSC were randomly assigned to be sacrificed at 12 and 24 h after ROSC （n=8 in each group）. CD3⁺，CD4⁺ and CD8⁺ lymphocyte subsets were determined by flow cytometry， and the levels of serum IL-4，TNF-α，and IFN-γ were measured by using ELLSA. The protein levels and expressions of GATA-3/T-bet mRNA were detected in lung tissue by western blotting and quantitative real-time PCR device， respectively.Results Pulmonary function was significantly impaired after ROSC. CD4⁺ lymphocyte subsets（28，4±2，3）%，（24，1±1，6）%and CD4⁺/CD8⁺ （1，7±0，9），（1，5±1，0）were significantly lower in the post-ROSC group compared with the sham-operated group（48，4±2，9）%，（51，1±5，4）%（2，5±1，3），（2，7±1，1） （P<0，05） at 12 h and 24 h after ROSC. The levels of serum IL-4 and TNF-α were markedly increased， while IFN-γ and IFN-γ/IL-4 were significantly decreased in the post-ROSC group compared with the sham-operated group （P<0，05） at 2-12 h after ROSC. Protein level and expression of GATA-3 mRNA in lung tissue were markedly increased， while those of T-bet were significantly reduced in the post-ROSC group compared with the sham-operated group （P<0，05） at 12 and 24 h after ROSC.Conclusions The lung immune dysfunction induced by imbalance between transcription factors GATA-3 mRNA and T-bet mRNA expressions may complicate in the process of post-resuscitation lung injury in a porcine model of cardiac arrest.

【Key words】Cardiopulmonary resuscitation；Acute lung injury；Th1/Th2 imbalance； Immune dysfunction；GATA-3；T-bet

心搏驟停后，全身性缺血導致各組織器官均出現(xiàn)嚴重的缺血缺氧，并伴有嚴重酸中毒，從而導致組織細胞的能量代謝障礙、蛋白變性、細胞損傷甚至死亡[1]。當炎性反應過度，炎癥介質產(chǎn)生異常，機體反應過激、失控，這種過度的全身炎癥反應可累及到肺引起急性肺損傷（acute lung injury，ALI）[2]，進而發(fā)展為急性呼吸窘迫綜合征[3]。目前考慮心肺復蘇（CPR）后的ALI主要與氧自由基、缺血-再灌注和凋亡等有一定的關系[4-6]。

輔助性T細胞主要有T淋巴細胞亞群l和2（Thl/Th2），Th1細胞產(chǎn)生γ-干擾素、IL-12和腫瘤壞死因子β；Th2細胞產(chǎn)生IL-4、IL-5、IL-13等細胞因子。前者與細胞免疫相關，而后者則參與體液免疫。在正常情況下，機體Thl/Th2細胞處于動態(tài)平衡狀態(tài)，維持機體正常的免疫功能[7]。轉錄因子T-bet是Thl細胞特異的轉錄因子，參與Thl的分化和轉化。而GATA-3則在Th2細胞分化過程中起關鍵作用，它是所有Th2型細胞因子轉錄所必需的，因而轉錄因子T-bet和GATA-3最終決定了Thl與Th2的分化方向。心搏驟停一旦發(fā)生，可理解成一種超常的應激反應，必將引起轉錄因子T-bet和GATA-3的失衡，從而導致Th1/Th2 的失衡， 出現(xiàn)Th2 型細胞因子發(fā)生瀑布式級聯(lián)反應， 引發(fā)和促進ARDS及多器官功能衰竭[8]。目前，有關T-bet和GATA-3的失衡進一步導致的肺免疫功能障礙在CPR后ALI中的作用在國內外并沒有報道。

本研究主要是建立小型豬室顫8 min模型，復蘇成功后通過檢測小型豬的血清中IL-4、TNF-α和INF-γ的水平和肺組織的T-bet和GATA-3蛋白表達以及mRNA水平，從而證實心肺復蘇后肺組織細胞出現(xiàn)由轉錄因子GATA-3和T-bet介導的Th1/ Th2 失衡導致的免疫功能障礙，其機制可能是導致復蘇后ALI的主要機制之一。

1 材料與方法

1，1 實驗試劑與設備

GATA-3抗體購自ab113519； Abcam Biotechnology， UK；T-bet抗體購自sc-21003； Santa Cruz Biotechnology， USA。FITC 標記的CD8單克隆抗體（Mouse anti pig，IgG1）、PE/cy5標記的CD4單克隆抗體（Mouse anti pig，IgG2b）購自尚柏生物技術有限公司，IL-4（6R019），TNF-α（6R071）和INF-γ（6R082）試劑購自Santa Cruz 公司，實時熒光定量PCR檢測試劑盒購自杭州博日科技有限公司，Q-CPRTMHeartStart MRx監(jiān)護儀/除顫器（荷蘭飛利浦醫(yī)療系統(tǒng)公司提供），GY-600A醫(yī)用程控刺激儀購自中國開封華南儀器有限公司，HP M1165多功能監(jiān)測儀（美國惠普公司提供），Line-gene 熒光定量PCR檢測系統(tǒng)（杭州博日科技有限公司提供）。

1，2 實驗動物分組

實驗用近交系五指山小型豬（WZSP Inbred s Minipig）26頭，雄性，月齡為10～12個月，體質量為（30±2）kg，由中國農業(yè)科學院畜牧獸醫(yī)研究所提供。實驗動物隨機（隨機數(shù)字法）分為假手術組（6頭），復蘇12 h組（10頭）和復蘇24 h組（10頭）。

1，3 室顫動物模型的制備

術前晚上禁食，自由飲水。肌注氯胺酮（0，5 mg/kg），聯(lián)合耳緣靜脈注射丙泊酚2 mg/kg誘導麻醉，瑞芬太尼注射液首劑0，25 mg靜脈推注，以后以30～50 μg/（kg·h）連續(xù)靜脈滴注以鎮(zhèn)痛。麻醉維持階段，首劑使用3%戊巴比妥鈉30 mg/（kg·h）靜脈推注，以后以8 mg/（kg·h）靜脈推注。氣管切開后置入直徑6，5 F的氣管插管，連接CO₂SMOplus呼吸監(jiān)護儀及呼吸機，吸入氧體積分數(shù)為21%，通氣頻率為12次/min，潮氣量設為15 mL/kg，然后調整呼吸機參數(shù)，使呼吸末PCO₂保持在35～40 mmHg（1 mmHg=0，133 kPa）。備皮后連接心電監(jiān)護，監(jiān)測肢體導聯(lián)心電圖。將一個直徑7F的血管造影用鞘管置入右側股靜脈，并放置雙極臨時起搏電極直至右心室[9]。

將心室內電極導線外接醫(yī)用程控刺激儀GY-600A，選擇食道輸出S1S2（300/200 ms）模式，8∶ 1比例，步長-10 ms連續(xù)電刺激，直到出現(xiàn)室顫。室顫的判斷標準是動脈血壓迅速下降，心電圖顯示VF波形[10]。實驗動物隨機分為三組：12 h復蘇組（10頭）和24 h復蘇組（10頭）：人工心外按壓頻率為100次/min，每30次按壓后暫停5 s，使用空氣以人工氣囊進行通氣2次，TV 300 mL，即6次/min。使用Q-CPRTM技術監(jiān)測CPR質量，先按壓2 min，如果沒有ROSC，則開始電擊除顫，除顫能量為150 J（雙相指數(shù)截斷波），如果沒有ROSC，進行下一次復蘇周期，在試驗中不使用任何復蘇藥物；假手術組（SHAM）（6頭）：進行同樣的步驟包括麻醉，呼吸機輔助通氣和導管的留置，但不除顫不按壓。ROSC后給予持續(xù)呼吸機機械通氣，分別在復蘇前，后即刻，0，5、2、6 h留取動脈血；在復蘇前，復蘇后0，5、2、6、12、24 h留取靜脈血。ROSC后復蘇兩組分別在12、24 h將動物注射過量氯化鉀處死。將豬左側頸外靜脈剪開，經(jīng)右側頸總動脈插管勻速灌注生理鹽水至血液變清，開胸取肺，左右肺離斷，取右肺中葉分別置于10%中性緩沖福爾馬林中固定和-80 ℃液氮保存。

ROSC標準：主動脈收縮壓在50 mmHg以上，并且持續(xù)時間超過10 min；如果30 min未達到ROSC，則認為復蘇失敗，動物死亡[11]。

1，4 血氣分析和組織學

檢測復蘇前，復蘇后0、0，5、2、6 h的動脈血氣分析。肺組織標本常規(guī)切片，分別在光鏡和透射電鏡HITACHI H-7650型（北京神經(jīng)外科研究所電鏡室）下觀察。

1，5 流式細胞術檢測CD3⁺、CD4⁺、CD8⁺淋巴細胞亞群的分布

分別取復蘇后12 h和24 h的抗凝血4 mL，在6 h之內分離PBL，取至少2×10⁶個PBL 加入1，5 mL離心管中，用1 mL 熒光洗液（含2% NBS的0，15 mol/L PBS，pH 7，4）洗滌2次，洗滌時1000 r/min 離心5 min，棄上清液，用200 μL熒光洗液重懸細胞。將每個樣品的PBL進行CD3⁺、CD4⁺和CD8⁺淋巴細胞亞群的檢測：向每個樣品的其中一管細胞中加入FITC 標記的CD3 單抗2 μL和PE/cy5 標記的CD4和CD8單抗2 μL，混勻后4 ℃避光放置30 min，用1 mL熒光洗液洗滌2次，管底細胞用500 μL 熒光保存液（含2%葡萄糖、1%甲醛和0，1% NaN3的0，15 mol/L PBS，pH 7，4）重懸，分析至少5000個單個核細胞群，確定CD3⁺、CD4⁺、CD8⁺的百分比，計算CD4⁺/CD8⁺。

1，6 ELISA 法檢測血清IL-4、TNF-α 和INF-γ的濃度

取2 mL靜脈血，3000 r/min高速離心，取血清25 μL加入相應的樣品孔中，每孔加入25 μL Biotin Anti 豬IL-4、TNF-α 和INF-γ，輕輕混勻30 s，室溫溫育0，5 h，洗板，每孔加入50 μL HRP，再次輕輕混勻30 s，室溫溫育30 min，再次洗板，每孔加入50 μL顯色液，輕輕混勻10 s，室溫溫育15 min，每孔加入50 μL終止液，輕輕混勻30 s，30 min內在450 nm處讀吸光度A值，根據(jù)吸光度A值在標準曲線上讀出細胞因子的濃度。

1，7 Western-blot法檢測肺組織 GATA-3和T-bet的蛋白表達

配12%分離膠，并用dd H₂O封膠，配 4%的濃縮膠灌膠，開始電泳。濃縮膠電泳電壓為80 V，分離膠電泳電壓為120 V。轉膜完畢后用TBST配制5%脫脂奶粉，將膜浸入后，室溫放置4 h。用1%的封閉液將一抗GATA-3和T-bet分別按1∶ 200和1∶ 500稀釋，將膜與一抗一起孵育，4 ℃過夜。二抗孵育結束，TBS-T洗3次，每次5 min。使用ECL化學發(fā)光顯色液，將顯色后的膜或底片照相，并用LabWorks軟件對圖像進行灰度分析。

1，8 實時熒光定量PCR法檢測肺組織GATA-3和T-bet mRNA水平

利用Primer express 3，0軟件及oligo 6等生物軟件分析。按GATA-3和T-bet基因序列設計并合成引物，引物序列為：T-bet（118 bp）：上游引物：5 -ACAAACCCGATATGGCTGA- GA-3 ，下游引物：5 -CCTGCTTGCTTCTCCTGTTC-3 ，GATA-3（240 bp）：上游引物5 -T- GCGGGCTCTACCACAA

AAT-3 ，下游引物：5 -TCGGTTTCTGGTCTGGAT

GC-3 ，GAPDH：上游引物：5 -CCATCACTGCC

ACTCAGAAGACT-3 ，下游引物：5 - GTCAGATC

CACAACGGATACATTG -3 。反應體系： Mix 5 μL， cDNA 2 μL，上/下游引物（10 pmol/L）1 μL，2XSYBR Mix （with 4 mmol Mg2+） 25 μL，反應總體積為10 μL，反應條件為：95 ℃預變性2 min，95 ℃變性20 s， 65 ℃退火45 s，72 ℃延伸30 s，擴增45個循環(huán)，60 ℃延伸結束時采集熒光信號，并作溶解曲線檢測引物特異性。將各樣本Ct值代入公式基因表達量 = 2-ΔΔCt計算，其中ΔΔCt = [目的基因的平均Ct值（樣本組）-管家基因的平均Ct值（樣本組）]-[目的基因的平均Ct值（校正組）-管家基因的平均Ct值（校正組）]。

1，9 統(tǒng)計學方法

應用SPSS 17，0統(tǒng)計軟件進行數(shù)據(jù)處理， 計量資料以均數(shù)±標準差（x±s）表示，多組均數(shù)比較用方差分析，組間兩兩比較采用LSD-t檢驗和相關性分析，以P<0，05為差異具有統(tǒng)計學意義。

2 結果

復蘇12 h組和24 h組分別各有2頭動物復蘇失敗死亡，死亡的4頭動物被排除而不納入統(tǒng)計分析。

2，1 動脈血氣分析

SHAM組和CPR組的血氣分析指標在心搏驟停前差異無統(tǒng)計學意義。復蘇后各時相組pH值較SHAM組明顯降低（P<0，05），而PaCO₂雖然較SHAM組有所升高，但差異無統(tǒng)計學意義（P>0，05），在復蘇后即刻和0，5 h，CPR組PaO2較SHAM組明顯降低（P<0，05），復蘇后其余各時相組與SHAM組相比，差異無統(tǒng)計學意義。見表1。

2，2 組織形態(tài)學

光鏡下SHAM組無明顯病理改變（圖1A）；CPR組光鏡下可見肺泡腔狹窄，肺泡壁增厚，肺泡壁毛細血管擴張，肺泡內有明顯出血，并有水腫液滲出，肺泡腔內有脫落上皮細胞和中性粒細胞浸潤（ 圖1B）。電鏡顯示，SHAM組肺內毛細血管內皮細胞無腫脹，上皮細胞完整（ 圖1C）；CPR組肺內毛細血管內皮細胞腫脹，上皮細胞壞死崩解（圖1D）。

2，3 CD3⁺、CD4⁺淋巴細胞亞群的分布

流式細胞儀檢測結果顯示，在復蘇后的12 h和24 h，豬PBL中CD3⁺細胞（32，8±4，1）%， （21，1±5，7）%和CD4⁺細胞的比例（28，4±2，3）%， （24，1±1，6）%分別明顯低于SHAM組（65，2±8，5）%， （63，9±9，1）%和（48，4±2，9）%， （51，1±5，4）%， CD4⁺/CD8⁺（1，7±0，9）， （1，5±1，0）也較SHAM組降低（2，5±1，3）， （2，7±1，1） （P<0，05）。見表2。

2，4 血清IL-4a、TNF-α和INF-γ的水平

如圖2所示，與SHAM組比較，CPR組的IL-4水平在2 h開始明顯升高，隨復蘇后時間的延長而呈增加趨勢，在12 h達到高峰，在24 h開始下降；而INF-γ水平則在2 h開始明顯降低，在12 h達到最低，并且INF-γ/IL-4 比值也在2 h開始明顯下降。此外，TNF-α水平則在復蘇后0，5 h就開始明顯升高，在2 h達到高峰，然后逐漸降低。

2，5 肺組織GATA-3和T-bet的蛋白表達

CPR組（12 h和24 h組）和SHAM組的肺組織GATA-3蛋白表達分別是0，52±0，07，0，69±0，04和0，29±0，06，CPR組比SHAM組明顯增加；而T-bet的蛋白表達分別是0，30±0，02，0，16±0，04和0，47±0，09，CPR組比SHAM組明顯減少（圖3）。

2，6 肺組織GATA-3和T-bet的mRNA水平

CPR組的肺組織GATA-3的mRNA水平在分別為2，54±0，13， 3，42±0，15和0，81±0，06，較SHAM組明顯升高，而T-bet的mRNA水平分別為0，56±0，05， 0，29±0，15和0，91±0，04，較SHAM組明顯減低（圖4）。

3 討論

本實驗發(fā)現(xiàn)在復蘇后的早期（6 h內），單從血氣分析來看，CPR組的小豬短期內肺功能似乎改變并不嚴重，但在光鏡和電鏡下觀察較SHAM組不論是肺臟的組織結構還是細胞超微結構都有著較為明顯的損傷。復蘇后肺組織細胞的病理改變不僅可見肺組織細胞的水腫、滲血，同時也可見I型肺泡上皮和Ⅱ型肺泡上皮細胞及肺泡隔等功能性結構的損傷。這主要是由于在自主循環(huán)恢復以后，缺血后代謝產(chǎn)物使微血管通透性增加、液體外滲、血小板聚集、阻滯微循環(huán)導致血流分布異常、組織缺血-再灌注損傷、血管收縮和舒張異常， 導致血管擴張， 加劇液體外滲， 血流分布紊亂， 引起肺灌注失常，肺表面活性物質減少，毛細血管通透性增加，血漿蛋白滲出，進而導致急性肺損傷[12]。

T細胞亞群CD4⁺、CD8⁺均是T細胞重要的表面抗原標志，作為免疫效應細胞在直接殺傷靶細胞進行免疫調節(jié)等方面發(fā)揮著重要的功能。CD4⁺細胞為輔助T淋巴細胞，在細胞免疫的效應階段和變態(tài)反應中能產(chǎn)生多種淋巴因子，導致炎癥反應，從而加速消除抗原物質。CD8⁺細胞可對靶細胞產(chǎn)生細胞介導的細胞毒作用，對CD4⁺細胞具有調節(jié)性抑制作用，CD4⁺/CD8⁺比值可反映機體的免疫功能狀態(tài)，CD4⁺/CD8⁺比值降低反映機體細胞免疫功能的抑制[13]。在本研究中發(fā)現(xiàn)，CPR組的CD4⁺細胞亞群和CD4⁺/CD8⁺比值都較SHAM組明顯降低，這可能與抗炎細胞因子的升高，抑制淋巴細胞的增殖以及誘導T淋巴細胞發(fā)生FAS和FAS-L的結合，通過Caspase級聯(lián)反應，導致T淋巴細胞彼此殺傷或直接“自殺”，使T細胞總數(shù)和活化的T細胞數(shù)量下降[14]。這反映在心肺復蘇后機體存在嚴重的免疫失調和抑制，這種過度的免疫失調和全身炎癥反應往往可造成多器官功能障礙，而肺往往是最先受累的器官。

Thl/Th2分化失衡涉及多種疾病，如腫瘤、自身免疫性疾病、變態(tài)反應性疾病、內分泌疾病、感染性疾病、移植排斥反應等。本實驗證實TNF-α在CPR后0，5 h即大量出現(xiàn)，并持續(xù)升高，2～4 h達高峰，6 h有所下降，但仍在較高水平。這說明在CPR后，機體啟動了炎癥反應系統(tǒng)，ROSC后產(chǎn)生的代謝產(chǎn)物可引起促炎、抗炎反應失去平衡，導致Thl細胞因子（INF-γ）表達降低及Th2細胞因子（IL-4）表達上升。INF-γ主要促進Th0細胞分化為Th1細胞，抑制Th2細胞增殖；IL-4主要促進Th0細胞向Th2細胞分化，抑制Th0細胞向Th1細胞分化，繼而引起Th1向Th2大量分化，促成了Th細胞向Th2方向極化，從而導致Th1和Th2的失衡[15]，引起免疫抑制，可進一步發(fā)展為免疫失調[7]，導致發(fā)生MODS。筆者認為復蘇后的早期，機體經(jīng)歷了缺血-再灌注過程。復蘇后全身各臟器的再灌注損傷產(chǎn)生大量氧自由基、乳酸、花生四烯酸的代謝產(chǎn)物等炎性介質，隨血流到達肺組織細胞，從而造成再灌注損傷，這些炎性細胞因子相互影響，進一步引起炎癥反應失控，加重肺組織的免疫功能障礙。

GATA-3是屬于GATA轉錄因子家族的一種細胞譜系特異性因子，是Th2細胞的特異性轉錄因子，參與幾乎所有Th2類細胞因子的轉錄；并且在Th2類細胞因子的基因的啟動子區(qū)存在GATA-3的結合位點，對Th2細胞的分化起主導作用[16]。而T-bet 則是屬于T-box家族的一種新型轉錄因子，可以調節(jié)Th0向Th1發(fā)育、正調控Th1類細胞因子的表達，它的主要作用是抑制GATA-3表達，進而阻止Th1細胞向Th2分化[17，18]。此外，T-bet也是INF-γ基因強有力的轉錄激活劑。T-bet和GATA-3的共同作用引起Th1/Th2兩類細胞因子在表達水平上的差異，是決定Thl/Th2極性分化的決定性因素，而且兩者具有交互抑制作用，T-bet正調節(jié)Thl型細胞因子。GATA-3正調節(jié)Th2型細胞因子。本實驗發(fā)現(xiàn)小型豬CPR組的肺組織GATA-3和T-bet的蛋白表達和mRNA水平均較SHAM組分別有著明顯的升高和降低，GATA-3的高表達和T-bet的低表達，會誘導IL-4的升高和INF-γ的降低，從而使Th1細胞向Th2細胞的漂移，引起機體的免疫失衡，進一步引發(fā)的MODS可能是導致復蘇后肺組織細胞損傷的首要因素。因此在ROSC后，既可能存在免疫亢進，也可能存在免疫抑制，兩者可同時存在，其強弱也處于不斷變化之中，機體處于一種復雜的免疫紊亂和失衡狀態(tài)。因此，相應的免疫治療也不應只強調抑制炎癥反應這一個方面，而在于重建患者的免疫平衡穩(wěn)態(tài)。

綜上所述，在心肺復蘇后的早期，CPR組小豬的肺組織細胞受到了明顯的損傷，同時出現(xiàn)肺組織轉錄因子GATA-3的上調和T-bet的下調，進一步引起了Th1和Th2類細胞因子的失衡，導致肺組織的免疫功能的抑制，這可能是導致心肺復蘇后急性肺損傷的機制之一。

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（收稿日期：2013-05-11）

（本文編輯：鄭辛甜）

DOI：10，3760/cma，j，issn，1671-0282，2014，01，004

基金項目：國家自然科學基金（30972863）；2012北京市優(yōu)秀博士學位論文專項資金項目（2012-1002501）

作者單位：100020 北京，首都醫(yī)科大學北京朝陽醫(yī)院急診科

通信作者：李春盛，Email：banditgu@hotmail，com

P8-14