劉紅芳，符悅冠

椰心葉甲Brontispa longissima(Gestro)，屬于鞘翅目，葉甲總科，鐵甲科，潛甲亞科［1］.2002年6月，椰心葉甲首次在海南省海口市鳳翔路被發(fā)現(xiàn)，之后該蟲迅速傳遍全島［2］.椰心葉甲是我國重大危險性外來有害生物之一，對海南省自然生態(tài)環(huán)境造成了巨大的破壞，對海南省獨特的旅游資源構(gòu)成了嚴重的威脅［3］.

植物是生物活性化合物的天然寶庫，其產(chǎn)生的次生代謝產(chǎn)物超過40萬種，以具有應(yīng)用前景的殺蟲植物為原料進行殺蟲劑的研制與開發(fā)已成為國內(nèi)外農(nóng)藥研發(fā)的熱點［4－5］.海南省位于我國最南端，地處熱帶北緣，是我國生物資源最為豐富的地方.已發(fā)現(xiàn)的植物有4 200種，占全國植物種類的15%，有近600種為海南特有，是開展植物源農(nóng)藥研究的理想之地［6］.作者以椰心葉甲為供試昆蟲，對32種熱帶地區(qū)植物乙醇提取物進行觸殺活性測定，試圖篩選出對椰心葉甲成蟲及幼蟲具有觸殺活性的物質(zhì)，為椰心葉甲的防治研究提供理論依據(jù)，為開發(fā)新型植物性殺蟲劑奠定基礎(chǔ).

1 材料與方法

1.1 材 料

1.1.1 供試植物

供試植物樣品采自中國熱帶農(nóng)業(yè)科學院環(huán)境與植物保護研究所試驗場(以下簡稱試驗場)、昌江霸王嶺、海南熱帶植物園(以下簡稱植物園)等地.共提取獲得37份乙醇提取物，分屬于22科33種.供試植物種類、采集部位及采集地點見表1.

表1 供試植物種類Tab.1 Category of tested plants

續(xù)表1

1.1.2 供試昆蟲

椰心葉甲由中國熱帶農(nóng)業(yè)科學院環(huán)境與植物保護研究所昆蟲組養(yǎng)蟲室提供.

1.2 方 法

1.2.1 供試植物材料及提取方法

根據(jù)孫愛東的方法進行提?。?］:將采集的32種植物材料清洗干凈，避光自然陰干，用植物粉碎研磨機粉碎后，裝入高10 cm、直徑5 cm的濾紙圓筒內(nèi)，上下封口后放入索氏提取器中用95%乙醇提取24 h，提取液用4層紗布過濾后于旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器(55℃)中濃縮成膏狀物，貼上標簽保存在冰箱中備用.

1.2.2 試劑配制

分別取32種植物的37份乙醇粗提物先溶于少量乙醇溶劑中，待粗提物充分溶解后，用滅菌水配制成質(zhì)量分數(shù)為5%的處理液.對照亦配制成含有相同乙醇的混合液.

1.2.3 植物乙醇提取物對椰心葉甲的觸殺活性測定

用浸漬法測定乙醇提取物對供試害蟲的觸殺作用［8］.選擇發(fā)育整齊一致的椰心葉甲成蟲和4齡幼蟲，在配制好的粗提物溶液中浸泡試蟲3～5 s，將試蟲拿出，用濾紙吸干多余藥液后放入養(yǎng)蟲盒內(nèi)飼養(yǎng).每處理設(shè)3次重復(fù)，每次重復(fù)取10頭試蟲.置于溫度為(24±1)℃、相對濕度為(80±10)%、光周期為TL∶TD=12∶12的人工氣候箱中，24 h后檢查試蟲的存活和死亡頭數(shù)(椰心葉甲成蟲和幼蟲死亡判斷標準:用毛筆輕輕觸動椰心葉甲的觸角或蟲體，蟲體沒有任何反應(yīng)，幼蟲蟲體彎曲，體色逐漸發(fā)褐)，計算24 h死亡率和校正死亡率.

2 結(jié)果與分析

作者共測定了37份供試樣品對椰心葉甲成蟲和幼蟲的觸殺活性，結(jié)果見表2.

表2 供試植物對椰心葉甲觸殺活性結(jié)果Tab.2 Contact toxicity of tested plants to Brontispa longissima

從表2中可以看出不同植物提取物對椰心葉甲成蟲和幼蟲的毒殺活性表現(xiàn)出很大的差異性，同一植物提取物對椰心葉甲成蟲和幼蟲的毒殺活性亦存在很大的差異性.

對椰心葉甲成蟲的觸殺活性在30%以上的供試樣品共9份，其中觸殺活性大于70%的供試樣品有5份，分別是假蒟(根)、假蒟(葉)、假蒟(莖)、白花丹(葉)和海杧果(果)，其校正死亡率分別為100%、100%、96.67%、70%、70%;校正死亡率在30% ～50%之間的供試樣品共4份，分別是鐵芒箕(葉)、假敗醬(枝葉)、山烏桕(枝葉)、白背葉(葉)，校正死亡率分別為:43.18%、33.33%、33.33%、32.26%;其他乙醇提取物的校正死亡率均在30%以下.

對椰心葉甲幼蟲的觸殺活性達到50%以上的供試樣品有5份，其中假蒟(根)對椰心葉甲幼蟲的校正死亡率達到了100%，其次為鐵芒箕(葉)、山香(葉)、山苦楝(葉)和獅子尾(葉)，校正死亡率分別為86.67%、68.97%、56.67%和50%;校正死亡率在30% ～50%之間的供試樣品共12份，分別為假敗醬(枝葉)、山芝麻(葉)、毛背豆蔻(葉)、假蒟(莖)、吊球草(地上部分)、鳥不宿(葉)、雞蛋果(葉)、毛稔(枝葉)、假蒟(葉)、山烏桕(枝葉)、盆架子(枝葉)和白背葉(葉);其他供試樣品的校正死亡率均在30%以下.

其中，假蒟(根)的提取物對椰心葉甲成蟲和幼蟲均表現(xiàn)出很高的毒殺活性，校正死亡率均達到100%;而假蒟(葉)和假蒟(莖)的提取物對椰心葉甲成蟲表現(xiàn)出良好的毒殺活性，校正死亡率分別為100%和96.67%，但其對椰心葉甲幼蟲的毒殺活性卻明顯降低，校正死亡率只有31.03%和40%.白花丹(葉)、海杧果(果)、鐵芒箕(葉)、山苦楝(葉)、山香(葉)、獅子尾(葉)等對椰心葉甲成蟲和幼蟲的毒殺活性也存在較大差異，未表現(xiàn)出一致性.

3 討論與結(jié)論

植物中含有的一些活性物質(zhì)具備低毒、不污染環(huán)境等特點，利用天然植物中含有的活性物質(zhì)控制害蟲，對非靶標生物安全，且在環(huán)境中易于降解、無殘留［9］.椰心葉甲只危害棕櫚科植物，利用這些異源植物次生代謝物可以控制害蟲的危害［10－11］.利用異源植物次生代謝物控制椰心葉甲的危害已有諸多報道:董存柱等［12］研究發(fā)現(xiàn)山蒟粗提物對椰心葉甲成蟲、幼蟲及卵均具有較高活性;馮崗等［9］研究證明魚藤酮對椰心葉甲5齡幼蟲和卵均具有顯著的毒殺作用;覃偉權(quán)等［10］研究發(fā)現(xiàn)假藥、波羅蜜、含羞草、飛機草、白花篙、腰果等6種異源植物乙醇提取物對椰心葉甲均表現(xiàn)出不同程度的拒食作用，且具有使椰心葉甲發(fā)育歷期延長的效果，可導(dǎo)致種群增長趨勢下降;呂朝軍等［13］研究表明薇甘菊提取物對椰心葉甲成蟲和幼蟲均表現(xiàn)出一定的生物活性和防控潛力.

該試驗供試的32種植物均不屬于棕櫚科，屬于異源殺蟲植物.通過室內(nèi)測定共篩選出對椰心葉甲成蟲的觸殺活性在70%以上的供試樣品5份，分別是假蒟(根)、假蒟(葉)、假蒟(莖)、白花丹(葉)和海杧果(果)，其中假蒟(根)和假蒟(葉)的乙醇提取物對椰心葉甲成蟲的觸殺活性校正死亡率高達100%.對椰心葉甲4齡幼蟲觸殺活性校正死亡率在50%以上的供試樣品5份，分別是假蒟(根)、鐵芒箕(葉)、山香(葉)、山苦楝(葉)和獅子尾(葉)，其中假蒟(根)的乙醇提取物對椰心葉甲4齡幼蟲的觸殺活性校正死亡率達到了100%.說明這些植物中含有對椰心葉甲具有高毒殺活性的物質(zhì)，值得更深一步地去探討.

研究結(jié)果還顯示不同植物提取物對椰心葉甲成蟲和幼蟲的毒殺活性表現(xiàn)出很大的差異性，同一植物提取物對椰心葉甲成蟲和幼蟲的毒殺活性亦存在很大的差異性.假蒟(根)的乙醇提取物對椰心葉甲成蟲和幼蟲的觸殺活性校正死亡率均達100%，這與董存柱等［12］研究的同屬于胡椒科的山蒟粗提取物對椰心葉甲成蟲和幼蟲均具有較高活性的結(jié)論一致.但其他幾種表現(xiàn)出較高活性的提取物對椰心葉甲成蟲和幼蟲的觸殺活性均未表現(xiàn)出一致性，這與呂朝軍等［13］對薇甘菊提取物對椰心葉甲成蟲和幼蟲均表現(xiàn)出一定的生物活性和防控潛力的研究結(jié)果不一致，其原因還需進一步研究.

另外，乙醇對供試植物活性成分的提取比較有限，還需用不同極性溶劑進行活性成分提取.

海南植物資源異常豐富，對該地區(qū)的植物進行殺蟲活性篩選，尋找有高效殺蟲活性的植物，探索出結(jié)構(gòu)新穎的化合物用于害蟲防治，具有重要的理論意義和潛在的應(yīng)用價值，可為我國殺蟲植物資源的開發(fā)利用提供新的思路，為生物合理性殺蟲劑的仿生合成提供新的分子模板，對我國的害蟲防治和農(nóng)藥工業(yè)的發(fā)展將產(chǎn)生深遠的影響.

［1］ 張志祥，程東美，江定心，等.椰心葉甲的傳播、危害及防治方法［J］.昆蟲知識，2004，41(6):522－526.

［2］ 陳志粦，林朝森，謝森，等.熱帶觀賞植物幾種重要害蟲的藥劑防治技術(shù)［J］.植物檢疫，2002，16(5):274－277.

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［5］ 劉長令.植物殺蟲劑前景廣闊［J］.世界農(nóng)業(yè)，1998(5):36－37.

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［7］ 孫愛東，葛毅強.天然植物次生代謝產(chǎn)物的提取［J］.生物學雜志，1998，15(5):4－7.

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［9］ 馮崗，張靜，金啟安，等.魚藤酮對椰心葉甲生物活性［J］.熱帶作物學報，2010，31(4):636－639.

［10］ 覃偉權(quán)，余鳳玉，黃山春，等.植物乙醇提取物對椰心葉甲生物活性的影響［J］.熱帶作物學報，2007，28(4):84－88.

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［12］ 董存柱，王禹，徐漢虹，等.山藥對椰心葉甲的生物活性研究［J］.熱帶作物學報，2011，32(12):2316－2319.

［13］ 呂朝軍，鐘寶珠，孫曉東，等.薇甘菊粗提物在椰心葉甲上的防控潛力［J］.昆蟲學報，2010，53(3):349－353.