亚洲免费av电影一区二区三区,日韩爱爱视频,51精品视频一区二区三区,91视频爱爱,日韩欧美在线播放视频,中文字幕少妇AV,亚洲电影中文字幕,久久久久亚洲av成人网址,久久综合视频网站,国产在线不卡免费播放

        ?

        瘦素-下丘腦神經(jīng)肽Y軸在2型糖尿病大鼠發(fā)病過程中的變化

        2014-02-09 09:25:20楊新玲盧素玉王海芳郝慧瑤張松筠
        中國全科醫(yī)學(xué) 2014年36期
        關(guān)鍵詞:下丘腦瘦素空腹

        楊新玲,李 杰,盧素玉,王海芳,郝慧瑤,張松筠

        瘦素是一種脂肪細(xì)胞分泌的能量平衡調(diào)節(jié)激素,可抑制食欲、增加能量消耗、減輕體質(zhì)量[1]。下丘腦神經(jīng)肽Y(neuropeptide Y,NPY)是一種很強的食欲刺激因子,主要來自下丘腦弓狀核,在攝食行為和能量消耗的整合中起重要作用[2]。NPY神經(jīng)元是瘦素在中樞的作用位點,瘦素可與NPY神經(jīng)元上瘦素受體結(jié)合,抑制NPY合成與分泌[3],二者形成瘦素-下丘腦NPY軸,調(diào)節(jié)機體能量代謝。

        大量研究表明瘦素與肥胖、2型糖尿病密切相關(guān)[4-6]。筆者先前的研究也已經(jīng)證實,在2型糖尿病(正?!葝u素抵抗→2型糖尿病)發(fā)病過程中大鼠血清瘦素水平呈遞增趨勢[7]。但NPY與2型糖尿病關(guān)系的研究還很少,且主要局限于肥胖及2型糖尿病患者[8-9],2型糖尿病發(fā)生過程中NPY的變化及其與瘦素之間的關(guān)系國內(nèi)外均未見報道。本研究通過觀察在2型糖尿病大鼠模型形成過程中,瘦素、下丘腦NPY水平的變化,探討瘦素-下丘腦NPY軸在2型糖尿病大鼠發(fā)病過程中的作用。

        1 材料與方法

        1.1 材料來源 選用清潔級180~220 g雄性SD大鼠110只,由北京維通利華實驗動物技術(shù)有限公司提供。

        1.2 2型糖尿病大鼠模型的建立 本研究通過改良的高脂飲食加小劑量(15 mg/kg)鏈脲佐菌素(streptozotocin,STZ)法建立2型糖尿病大鼠模型[10]。采用隨機數(shù)字表法抽取20只作為正常對照組,喂以基礎(chǔ)飼料;90只喂以高脂飼料(在基礎(chǔ)飼料的基礎(chǔ)上加10%豬油和2%膽固醇),4周時將體質(zhì)量超過正常對照組最高體質(zhì)量的大鼠(60只)納入高脂飲食誘導(dǎo)肥胖(diet-induced obese,DIO)組,余者淘汰,該時間點設(shè)為DIO4W,采用隨機數(shù)字表法選取20只為DIO4W組;其余40只繼續(xù)喂以高脂飼料4周(此時間點設(shè)為DIO8W),采用隨機數(shù)字表法選取20只為DIO8W組;剩余大鼠腹腔注射小劑量STZ,10 d后測空腹血糖大于正常對照組大鼠均值加3個標(biāo)準(zhǔn)差 (本研究確定該值為7.8 mmol/L),且空腹血糖>7.8 mmol/L能維持3周者納入2型糖尿病組(20只)。

        1.3 空腹血清瘦素水平和下丘腦NPY水平測定 采用放射免疫法檢測空腹血清瘦素和下丘腦NPY水平,實驗大鼠禁食8 h,10%水合氯醛(3 ml/kg)腹腔麻醉后,心臟穿刺采血2 ml,4 ℃離心,取血清,檢測瘦素水平;經(jīng)心臟以0.9%氯化鈉溶液灌洗全腦,斷頭取腦,以0.2 mol/L醋酸溶液煮沸10 min以滅活酶,取下丘腦,加入上述醋酸溶液1 ml勻漿,離心,取上清液,檢測NPY水平。操作過程嚴(yán)格按照試劑盒(北京原子高科核技術(shù)應(yīng)用股份有限公司)說明書進(jìn)行,質(zhì)控標(biāo)準(zhǔn)為批內(nèi)變異系數(shù)<10%,批間變異系數(shù)<15%。

        1.4 下丘腦NPY mRNA表達(dá)水平測定 采用實時熒光定量PCR(RT-PCR)法檢測下丘腦NPY mRNA的表達(dá)。取下丘腦組織100 mg,迅速將組織置于4 ℃焦碳酸二乙酯(DEPC)水中洗去血液后,置凍存管保存于-80 ℃低溫冰箱中。用Trizol(美國 Invitrogen 公司)提取海馬組織總RNA后,用1.5%含EB的瓊脂糖凝膠鑒定RNA質(zhì)量,用核酸蛋白測定其水平及純度。引物(美國 Invitrogen 公司)序列為:上游: 5′-GCTAGGTAACAAACGAATGGGG-3′; 下游: 5′-CACATGGAAGGGTCTTCAAGC-3′。PCR擴(kuò)增條件:94 ℃預(yù)熱5 min,94 ℃ 45 s、55.5 ℃ 35 s、72 ℃ 45 s(共35個循環(huán)),72 ℃延伸5 min。取10 μl PCR擴(kuò)增產(chǎn)物進(jìn)行瓊脂糖凝膠電泳,以DNA Marker作為標(biāo)準(zhǔn)片段標(biāo)記,以GAPDH電泳條帶作為參照,結(jié)果用RT-PCR擴(kuò)增靶基因產(chǎn)物的表達(dá)水平與GAPDH表達(dá)水平積分吸光度的比值表示。

        2 結(jié)果

        2.1 4組空腹血清瘦素水平和下丘腦NPY水平比較 4組空腹血清瘦素水平和下丘腦NPY水平比較,差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。DIO4W組、DIO8W組、2型糖尿病組空腹血清瘦素水平和下丘腦NPY水平均高于正常對照組,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05);DIO8W組、2型糖尿病組空腹血清瘦素和下丘腦NPY水平均高于DIO4W組,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05);2型糖尿病組空腹血清瘦素和下丘腦NPY水平高于DIO8W組,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05,見表1)。

        Table1 Comparison of fasting serum leptin and hypothalamic NPY levels in the four groups

        組別例數(shù)血清瘦素水平(μg/L)下丘腦NPY水平(ng/L)正常對照組200 25±0 04133 5±16 9DIO4W組200 32±0 04?164 9±20 6?DIO8W組200 40±0 03?○199 4±36 9?○2型糖尿病組200 48±0 06?○△255 1±40 8?○△F值87 025270 782P值<0 001<0 001

        注:與正常對照組比較,*P<0.05;與DIO4W組比較,○P<0.05;與DIO8W組比較,△P<0.05

        2.2 4組下丘腦NPY mRNA表達(dá)水平比較 正常對照組、DIO4W組、DIO8W組、2型糖尿病組的NPY mRNA表達(dá)水平分別為(0.85±0.14)、(1.16±0.15)、(1.53±0.14)、(1.79±0.13),差異有統(tǒng)計學(xué)意義(F=173.320,P<0.05)。DIO4W組、DIO8W組、2型糖尿病組的NPY mRNA表達(dá)水平均高于正常對照組,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05);DIO8W組、2型糖尿病組的NPY mRNA表達(dá)水平均高于DIO4W組,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05);2型糖尿病組的NPY mRNA表達(dá)水平高于DIO8W組,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。

        2.3 相關(guān)性分析 4組大鼠空腹血清瘦素水平與下丘腦NPY水平、NPY mRNA表達(dá)水平均呈正相關(guān)(r=0.951、0.953,P<0.05)。

        3 討論

        2型糖尿病作為一種代謝性疾病已成為人類健康的第三大殺手,預(yù)防和治療糖尿病迫在眉睫[11]。瘦素是脂肪細(xì)胞分泌的一種調(diào)節(jié)能量平衡的重要激素,與2型糖尿病發(fā)病密切相關(guān)[12]。瘦素通過與其受體結(jié)合從而發(fā)揮中樞性和外周性生物學(xué)效應(yīng),在中樞瘦素主要通過下丘腦NPY這個中介物發(fā)揮作用[13-14]。NPY是由下丘腦弓狀核神經(jīng)元分泌和產(chǎn)生的,通過刺激進(jìn)食、抑制產(chǎn)熱和提高胰島素水平來達(dá)到能量平衡[15]。大量動物研究表明,下丘腦的NPY神經(jīng)元上含有瘦素受體,腦室注射瘦素可顯著降低下丘腦NPY mRNA的表達(dá);血清中瘦素水平減少,能使下丘腦NPY分泌增加,使大鼠出現(xiàn)多食、肥胖和血糖增高[16]。故現(xiàn)在認(rèn)為瘦素與下丘腦NPY構(gòu)成了瘦素-下丘腦NPY軸,參與攝食,影響糖脂代謝。目前對瘦素-下丘腦NPY軸的研究主要局限于肥胖及2型糖尿病患者,而本研究觀察了2型糖尿病發(fā)生過程中NPY的變化及其與瘦素之間的關(guān)系。

        本研究顯示,在2型糖尿病大鼠模型形成過程中, DIO4W組、DIO8W組、2型糖尿病組空腹血清瘦素水平高于正常對照組,DIO8W組、2型糖尿病組空腹血清瘦素水平高于DIO4W組, 2型糖尿病組空腹血清瘦素水平高于DIO8W組,提示隨著動物體質(zhì)量的逐漸增加,空腹血清瘦素水平逐漸升高,機體對瘦素的反應(yīng)減弱或無反應(yīng),即發(fā)生了瘦素抵抗,與張松筠等[10]的研究一致。本研究還發(fā)現(xiàn),DIO4W組、DIO8W組、2型糖尿病組的下丘腦NPY水平和NPY mRNA表達(dá)水平均高于正常對照組,DIO8W組、2型糖尿病組的下丘腦NPY水平和NPY mRNA表達(dá)水平均高于DIO4W組, 2型糖尿病組的下丘腦NPY水平和NPY mRNA表達(dá)水平高于DIO8W組,提示在2型糖尿病大鼠模型形成過程中,下丘腦NPY 水平及NPY mRNA表達(dá)均逐漸增強,且與血清瘦素水平呈正相關(guān)。其可能機制與瘦素抵抗有關(guān):瘦素的下游信號(如瘦素受體)出現(xiàn)結(jié)構(gòu)及功能障礙[10],使其不能正常發(fā)揮生理作用,包括對NPY神經(jīng)元的抑制,于是導(dǎo)致下丘腦NPY 水平上調(diào)。NPY是強效的食欲刺激因子,其表達(dá)上調(diào)可引起大鼠攝食與體質(zhì)量的明顯增加。

        總之,隨著2型糖尿病大鼠模型的形成,下丘腦NPY水平及血清瘦素水平顯著升高,提示瘦素-下丘腦NPY軸功能異常,出現(xiàn)瘦素抵抗。瘦素抵抗對NPY神經(jīng)元的抑制減弱,使NPY表達(dá)水平升高,食欲增加,進(jìn)一步促進(jìn)肥胖,加重胰島素抵抗,導(dǎo)致2型糖尿病的形成。但本研究只觀察了上述一種現(xiàn)象,對其具體分子通路方面,還有待進(jìn)一步研究。雖然還不清楚瘦素-下丘腦NPY軸是否為2型糖尿病的致病因素,但對其在2型糖尿病形成中的變化的研究將有助于對糖尿病發(fā)病機制的進(jìn)一步認(rèn)識,并為糖尿病的診斷及治療開辟新的途徑。

        1 桑圣剛,榮紅.AMI患者血清瘦素及外周血單個核細(xì)胞內(nèi)皮素受體mRNA的檢測[J].海南醫(yī)學(xué)院學(xué)報,2009,15(7):702-704.

        2 張劍霄,黃慧,張麗霞,等.厭食癥患兒血清神經(jīng)肽Y水平測定及臨床意義[J].疑難病雜志,2010,9(10):788.

        3 Mutschler J,Abbruzzese E,Wiedemann K,et al.Functional polymorphism in the neuropeptide Y gene promoter (rs16147) is associated with serum leptin levels and waist-hip ratio in women[J].Ann Nutr Metab,2013,62(4):271-276.

        4 Maekawa F,Fujiwara K,Toriya M,et al.Brain-derived neurotrophic factor in VMH as the causal factor for and therapeutic tool to treat visceral adiposity and hyperleptinemia in type 2 diabetic Goto-Kakizaki rats[J].Front Synaptic Neurosci,2013,5:7.

        5 Nakano M,Asakawa A,Inui A.Long-term correction of type 1 and 2 diabetes by central leptin gene therapy independent of effects on appetite and energy expenditure[J].Indian J Endocrinol Metab,2012,16(Suppl 3): S556-561.

        6 Katsiki N,Mikhailidis DP,Gotzamani-Psarrakou A,et al.Effects of improving glycemic control with insulin on leptin,adiponectin,ghrelin and neuropeptidey levels in patients with type 2 diabetes mellitus: a pilot study[J].Open Cardiovasc Med J,2011,5:136-147.

        7 Zhang S,Zhang Q,Zhang L,et al.Expression of ghrelin and leptin during the development of type 2 diabetes mellitus in a rat model[J].Mol Med Rep,2013,7(1):223-228.

        8 Burgos-Ramos E,González-Rodríguez A,Canelles S,et al.Differential insulin receptor substrate-1 (IRS1)-related modulation of neuropeptide Y and proopiomelanocortin expression in nondiabetic and diabetic IRS2-/-mice[J].Endocrinology,2012,153(3):1129-1140.

        9 Lee SJ,Verma S,Simonds SE,et al.Leptin stimulates neuropeptide Y and cocaine amphetamine-regulated transcript coexpressing neuronal activity in the dorsomedial hypothalamus in diet-induced obese mice[J].J Neurosci,2013,33(38):15306-15317.

        10 張松筠,楊長春,郝詠梅,等.食源性肥胖大鼠2型糖尿病模型的建立[J].中國組織工程研究與臨床康復(fù),2010,14(28):5212-5215.

        11 邢建麗,劉瑩,張法軍, 等.2型糖尿病并發(fā)急性腦梗死患者血脂異常臨床分析[J].神經(jīng)損傷與功能重建,2013,8 (4):257-259.

        12 de Queiroz KB,Guimaràes JB,Coimbra CC,et al.Endurance training increases leptin expression in the retroperitoneal adipose tissue of rats fed with a high-sugar diet[J].Lipids,2014,49(1):85-96.

        13 Wang P,Yang FJ,Du H,et al.Involvement of leptin receptor long isoform (LepRb)-STAT3 signaling pathway in brain fat mass-and obesity-associated (FTO) downregulation during energy restriction[J].Mol Med,2011,17(5/6):523-532.

        14 Bi S,Kim YJ,Zheng F.Dorsomedial hypothalamic NPY and energy balance control[J].Neuropeptides,2012,46(6):309-314.

        15 Lee JH,Cha MJ,Yoo SB,et al.Leptin blocks the fasting-induced increase of pERK1/2 in the paraventricular nucleus of rats[J].Regul Pept,2010,162(1/3):122-128.

        16 張纓,馮美云,吳昊.有氧運動訓(xùn)練對糖尿病大鼠Leptin-下丘腦NPY軸的影響[J].中國運動醫(yī)學(xué)雜志,2002,21(3):239-243.

        猜你喜歡
        下丘腦瘦素空腹
        小而強大的下丘腦
        采血為何要空腹
        中老年保健(2021年3期)2021-08-22 06:52:12
        空腹運動,瘦得更快?
        瘦素及瘦素受體基因多態(tài)性與冠狀動脈慢血流現(xiàn)象的相關(guān)性
        科學(xué)家發(fā)現(xiàn)控制衰老開關(guān)
        中老年健康(2017年9期)2017-12-13 07:16:39
        中藥對下丘腦作用的研究進(jìn)展
        中成藥(2017年6期)2017-06-13 07:30:34
        哮喘患兒外周血單個核細(xì)胞瘦素及Foxp3的表達(dá)
        空腹喝水
        瘦素與血栓栓塞性疾病的相關(guān)性研究進(jìn)展
        回藥阿夫忒蒙丸對失眠大鼠下丘腦5-HT和5-HIAA含量的影響
        风间由美性色一区二区三区| 国产丝袜长腿美臀在线观看| 国产精品天天看天天狠| 国产精品9999久久久久| 亚洲综合久久久| 久久国产劲爆内射日本| 精品一区二区三区蜜桃麻豆| 国产精品成人aaaaa网站| 成人伊人亚洲人综合网站222| 国产亚洲精品综合99久久| 中文字幕乱码亚洲在线| 人妻无码一区二区三区免费| 国产午夜无码视频免费网站| 国产美女自拍国语对白| 人妻久久一区二区三区| 国产精品久久久久aaaa| 老熟妇仑乱一区二区视頻| 综合久久青青草免费观看视频| 国产精品专区第一页天堂2019| 97夜夜澡人人双人人人喊| 亚洲a∨天堂男人无码| 国产精品久久国产三级国| 日韩精品无码一区二区三区| 激情综合色五月丁香六月亚洲| 亚洲精品美女自拍偷拍| 国产专区亚洲专区久久| 把女人弄爽特黄a大片| 蜜桃精品免费久久久久影院| 国产美女av一区二区三区| 青草久久婷婷亚洲精品| 国产性生大片免费观看性| 囯产精品无码一区二区三区| 久久精品国产亚洲av热东京热| 无码人妻丰满熟妇啪啪网不卡| 236宅宅理论片免费| 国产成人精品蜜芽视频| 亚洲精品有码日本久久久| 成片免费观看视频大全| 骚片av蜜桃精品一区| 亚洲中文字幕第15页| 国产成人精品白浆久久69|