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        苦丁茶多糖活性成分動(dòng)態(tài)累積及其抑菌活性

        2014-01-20 10:52:19黃敏桃黃云峰賴茂祥黃榮韶劉華鋼黃庶識(shí)
        食品科學(xué) 2014年9期
        關(guān)鍵詞:綠膿桿菌苦丁茶采收期

        蔡 鵑,黃敏桃,黃云峰,賴茂祥,黃榮韶,劉華鋼,黃庶識(shí)

        苦丁茶多糖活性成分動(dòng)態(tài)累積及其抑菌活性

        蔡 鵑1,2,黃敏桃1,2,黃云峰3,賴茂祥3,黃榮韶4,劉華鋼5,黃庶識(shí)1,*

        (1.廣西科學(xué)院生物物理實(shí)驗(yàn)室,廣西 南寧 530007;2.贛州衛(wèi)生學(xué)校藥學(xué)系,江西 贛州 341000;3. 廣西中醫(yī)研究院,廣西 南寧 530022;4.廣西大學(xué)農(nóng)學(xué)院,廣西 南寧 530 004;5.廣西醫(yī)科大學(xué)藥學(xué)院,廣西 南寧 530021)

        目的:研究苦丁茶(Ilex kudingcha C. J. Tseng.)中主要抑菌活性成分多糖在不同采收月份的動(dòng)態(tài)累積規(guī)律。方法:將不同采收期的苦丁茶葉水浴回流提取3次,用杯碟法分別測(cè)定其對(duì)大腸桿菌、金黃色葡萄球菌和綠膿桿菌3種菌的抑菌圈直徑,比較不同采收期苦丁茶水提物抑菌圈直徑大小,確定最佳采收期。通過苯酚硫酸法測(cè)定不同采收期苦丁茶提取物中多糖含量,分析多糖含量與苦丁茶抑菌能力之間相關(guān)性;同時(shí)采集不同采收期紅外光譜,分析與多糖相關(guān)的特征峰強(qiáng)度變化規(guī)律及其與抑菌活性之間的相關(guān)性。結(jié)果:在一年的不同月份生長(zhǎng)期內(nèi),苦丁茶多糖含量在1—3月份逐漸增加,4月份達(dá)到最大值96.6 mg/g,然后呈緩慢下降的趨勢(shì),7—10月變化不大,11月份后含量顯著降低,12月達(dá)到全年最低值47.7 mg/g??喽〔杷嵛飳?duì)大腸桿菌、金黃色葡萄球菌和綠膿桿菌3 種菌的抑制作用在4月份最大, 12月份最小,與苦丁茶多糖 含量的變化規(guī)律基本一致。結(jié)論:苦丁茶抑菌活性多糖成分4月份含量最高,為最佳采收期;苷類和多糖為苦丁茶抑菌活性成分。

        苦丁茶;采收期;多糖活性成分;紅外光譜;抑菌活性

        苦丁茶冬青(Ilex kudingcha C. J. Tseng.)作為一種廣西道地主產(chǎn)的藥食兩用的大宗優(yōu)勢(shì)產(chǎn)品,早已成為廣西乃至我國(guó)華南地區(qū)的傳統(tǒng)特色產(chǎn)品。研究表明,飲用苦丁茶具有清熱解毒、殺菌消炎、健胃消積、止咳化痰、生津止渴、提神醒腦、明目益智和抗輻射、抗衰老、活血脈、調(diào)節(jié)血脂等生理活性[1],民間應(yīng)用歷史悠久。利用苦丁茶的抑菌作用,民間常在飼料中添加苦丁茶葉以預(yù)防雞瘟,且常飲用苦丁茶可達(dá)到清除口腔牙周病原菌[2]、抑制幽門螺旋 桿菌生長(zhǎng),治療慢性胃炎等藥理效果[3]。隨著人類社會(huì)的發(fā)展,抗生素、激素大量不合理的使用,會(huì)對(duì)人體健康造成損害,近年來科學(xué)工作者已經(jīng)轉(zhuǎn)向中草藥中有效天然抑菌成分的研究,從天然中草藥中篩選食品添加劑也越來越受到國(guó)內(nèi)外學(xué)者的廣泛關(guān)注[4-5]??喽〔柚泻卸喾N藥效成分和營(yíng)養(yǎng)成分,主要為皂苷、黃酮、多糖等化學(xué)成分,如槲皮素、山奈素、熊果酸、齊墩果酸、苦丁茶多糖、多種微量元素等[6-9]。這些成分為苦丁茶中天然抑菌成分、天然食品添加劑的篩選提供了物質(zhì)基礎(chǔ)[10],且苦丁茶為日常飲用品,長(zhǎng)期安全使用無毒副作用。林雄平等[11]以及本實(shí)驗(yàn)前期研究表明,苦丁茶抑菌的抑菌活性與其茶多糖含量密切相關(guān),但尚未見有關(guān)苦丁茶抑菌活性和多糖含量隨季節(jié)變化規(guī)律的報(bào)道。本研究采用杯碟法測(cè)定不同采收期苦丁茶提取物的抑菌能力,比較不同采收期苦丁茶多糖含量和抑菌活性的相關(guān)性,為確定苦丁茶原材料的適宜采收期,并為更好地綜合評(píng)價(jià)苦丁茶原材料的質(zhì)量提供依據(jù)。

        1 材料與方法

        1.1 材料、試劑與菌種

        苦丁茶樣品于2011年7月采自廣西南寧市地委大院,樹齡25年,經(jīng)廣西中醫(yī)藥研究院賴茂祥研究員鑒定為冬青科冬青屬苦丁茶冬青(Ilex kudingcha C. J. Tseng.),采2年枝條成熟葉,采回后陰干,取其干燥葉片粉碎、烘干,置于干燥器保存待用。

        硫酸(分析純) 廉江市愛廉化試劑有限公司;MH瓊脂培養(yǎng)基、MH肉湯、營(yíng)養(yǎng)肉湯均為廣東環(huán)凱公司;牛津杯 河北新鄉(xiāng)精密儀器廠;0.22 μm微孔濾膜天津津騰公司。

        大腸桿菌(Escherichia coli)(ATCC44102);金黃色葡萄球菌(Staphyloccocus aureus Rosenbach)(ATCC26003);綠膿桿菌(Pseudomonas aeruginosa)(ATCC27583)購(gòu)自美國(guó)模式培養(yǎng)物集存庫(kù)(American Type Culture Collection)。

        1.2 儀器與設(shè)備

        UV-2601雙光束紫外-可見分光光度計(jì) 北京瑞利分析儀器公司;SW-CJ-1FD超凈工作臺(tái) 蘇州凈化設(shè)備廠;DW-40L92藥品保存箱 青島海爾公司;RE-52AA旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器 上海亞榮生化儀器廠;SHB-III型循環(huán)水式真空泵 鄭州長(zhǎng)城科工貿(mào)有限公司;HPX-9082MBE數(shù)顯電熱培養(yǎng)箱 上海博迅實(shí)業(yè)有限公司;SIGMA 1-15P離心機(jī) 德國(guó)Sigma公司;TS-100B恒溫?fù)u床 上海天呈科技有限公司;Nicolet 5700傅里葉變換紅外光譜儀(fourier transform infrared spectrometer,F(xiàn)T-IR) 美國(guó)Thermo公司;FW-4A型壓片機(jī) 天津光學(xué)儀器廠;Mettler Toledo XS105DU超越型分析天平 瑞士梅特勒-托利多公司。

        1.3 方法

        1.3.1 苦丁茶樣品溶液的制備

        精確稱取不同采收期苦丁茶粉末5.00 g,加入300 mL水,于100 ℃水浴鍋回流提取3 次,每次2.4 h。冷卻,過濾合并濾液,濃縮,揮干,水定容于10 mL容量瓶備用,過0.22 μm微孔濾膜,得供試品,此時(shí)質(zhì)量濃度為0.5 g/mL的苦丁茶。每個(gè)采收期樣品做3 次重復(fù),結(jié)果取其平均值。

        1.3.2 杯碟法測(cè)定苦丁茶樣品溶液對(duì)細(xì)菌的生長(zhǎng)抑制作用

        將3 個(gè)菌株分別培養(yǎng)至對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期,離心,取下層,用無菌生理鹽水調(diào)至OD600nm值為0.1。大腸桿菌菌液按照1∶100(V/V)稀釋,吸取50 μL;金黃色葡萄球菌1∶1 000倍稀釋,吸取30 μL;綠膿桿菌1:100 倍稀釋,吸取40 μL。將菌液均勻涂布于MH瓊脂平板表面,稍干后將3 個(gè)牛津杯等距離放置于瓊脂表面,向牛津杯中定量加入200 μL 0.5 g/mL苦丁茶提取液,4 ℃冰箱放置10 h使其擴(kuò)散,再置于35 ℃恒溫箱培養(yǎng)18~20 h,觀察并測(cè)量抑菌圈直徑,每個(gè)藥物抑菌實(shí)驗(yàn)重復(fù)3 次,結(jié)果取其平均值。

        1.3.3 苯酚硫酸法測(cè)定苦丁茶不同采收期多糖含量

        1.3.3.1 葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備

        精密稱取無水葡萄糖純品,去離子水定容于100 mL容量瓶中,分別吸取葡萄糖溶液0、0.4、0.6、0.8、1.0、1.2、1.4、1.6、1.8 mL,去離子水補(bǔ)足至2.0 mL,加入6%苯酚1.0 mL及濃硫酸5.0 mL,靜置10 min,搖勻,室溫放置20 min后,480 nm波長(zhǎng)處測(cè)定吸光度,以吸光度為縱坐標(biāo),葡萄糖濃度為橫坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。

        1.3.3.2 換算因素的測(cè)定

        稱取苦丁茶10 g,置圓底燒瓶中,加水300 mL,100 ℃水浴鍋回流提取4 次,每次2.4 h。冷卻,過濾,合并濾液,濃縮至50 mL。95%乙醇沉淀多糖,用乙醚-丙酮-無水乙醇溶劑系統(tǒng)反復(fù)沖洗,真空低溫干燥。得苦丁茶粗多糖。

        1.3.3.3 苦丁茶多糖含量的計(jì)算

        精確稱取干燥至恒重的苦丁茶粗多糖3 份,定容于100 mL容量瓶,得原始質(zhì)量濃度為ρ1、ρ2、ρ3的苦丁茶多糖。取2 mL按照苯酚硫酸法測(cè)定其吸光度A1、A2、A3,根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線將A1、A2、A3換算成苦丁茶多糖換算質(zhì)量濃度ρ1*、ρ2*、ρ3*,則:

        式中:ρ*為標(biāo)準(zhǔn)品中苦丁茶多糖含量。

        1.3.3.4 苦丁茶樣品中多糖含量測(cè)定

        吸取不同采收期提取液10 μL,水稀釋至2 mL,然后按照1.3.3.3節(jié)方法測(cè)定苦丁茶樣品中多糖含量。

        1.3.4 FT-IR法測(cè)定

        采用濕法拌樣,取1.3.1節(jié)制備的不同采收期苦丁茶供試品溶液10 μL,加入200 mg光譜純KBr中攪拌均勻,再置于烘箱中,60 ℃恒溫干燥24 h,備用。壓片成厚度約1 mm的錠片,將錠片放入紅外光譜儀測(cè)定,每個(gè)片隨機(jī)掃3 個(gè)不同的點(diǎn),再取其平均譜圖作為最后的樣品譜圖。實(shí)驗(yàn)測(cè)試條件:光譜范圍4 000~400 cm-1;光譜分辨率4 cm-1;掃描次數(shù)32 次,平行實(shí)驗(yàn)3 次。紅外實(shí)驗(yàn)室環(huán)境保持恒溫恒濕,溫度25 ℃,相對(duì)濕度30%,以保證實(shí)驗(yàn)環(huán)境的穩(wěn)定性。

        1.3.5 紅外光譜數(shù)據(jù)處理

        采用OMNI E.S.P.51 智能操作軟件進(jìn)行紅外譜圖數(shù)據(jù)處理。每個(gè)樣品測(cè)定前均對(duì)背景進(jìn)行掃描,對(duì)得到的紅外光譜進(jìn)行基線校正和9點(diǎn)S-G平滑濾波,為了盡可能的消除人為因素的影響,還需對(duì)光譜數(shù)據(jù)做歸一化處理,本實(shí)驗(yàn)采用了的歸一化方法為標(biāo)準(zhǔn)正態(tài)變量,最后確定峰值和吸光度。

        2 結(jié)果與分析

        2.1 不同采收期苦丁茶多糖含量及其抗菌活性

        由表1可知,苦丁茶多糖含量隨著氣溫回升不斷增加,4月份達(dá)到最高,平均達(dá)96.6 mg/g,然后呈緩慢下降的趨勢(shì),7—10月之間多糖含量差異不顯著,11月份后,苦丁茶多糖含量顯著降低,并于12月達(dá)到全年最低值,只有47.7 mg/g。在一年的不同月份生長(zhǎng)期內(nèi),苦丁茶提取物對(duì)大腸桿菌的抑菌活性1月較大,2、3月份減小,4月顯著增加,并達(dá)到全年最高值,之后逐月減小,11月略有增加,12月達(dá)到全年最低值;金黃色葡萄球菌和綠膿桿菌的抑菌活性與大腸桿菌的抑菌活性類似,4月份最大,之后逐月減小,12月份最低,與苦丁茶多糖含量的變化規(guī)律基本一致。對(duì)苦丁茶提取物的抗菌活性與多糖含量測(cè)定結(jié)果進(jìn)行相關(guān)性分析,結(jié)果顯示,苦丁茶提取物多糖含量與大腸桿菌、金黃色葡萄球菌抑菌活性相關(guān)系數(shù)均大于0.836,與綠膿桿菌抑菌活性相關(guān)系數(shù)是0.726(表2),表明苦丁茶中的多糖與其抗大腸桿菌和抗金黃色葡萄球菌的能力密切相關(guān),與抗綠膿桿菌的能力有較大的相關(guān)性,多糖是苦丁茶主要的抑菌活性成分。

        表1 不同采收期苦丁茶提取物多糖含量及其對(duì)3種菌的抑菌活性Table 1 Diameters of the inhibition zones of three bacteria when exposed to aqueous extract of Kudingcha harvested in different growth phases

        表2 不同采收期苦丁茶提取物多糖含量及紅外光譜特征峰與其抑菌作用的相關(guān)性分析

        Table 2 Correlation of antibacterial activity with polysaccharide content as well as IR characteristic peaks for aqueous extract of Kudingcha harvested in different growth phases

        注:*. P<0.05水平上顯著相關(guān);**. P<0.01水平上顯著相關(guān)。

        2.2 苦丁茶不同采收期紅外光譜分析

        由于4 000~2 000 cm-1波數(shù)范圍內(nèi)存在著明顯的H2O和CO2的吸收峰,且在這區(qū)域內(nèi)的吸收峰多為合頻峰,特征性不強(qiáng)。按吸收峰的來源,可以將4 000~400 cm-1的紅外光譜圖大體上分為特征頻率區(qū)(4 000~1 300 cm-1)以及指紋區(qū)(1 300~400 cm-1)兩個(gè)區(qū)域。其中特征頻率區(qū)中的吸收峰基本是由基團(tuán)的伸縮振動(dòng)產(chǎn)生,數(shù)目不是很多,但具有很強(qiáng)的特征性,主要用于鑒定官能團(tuán)。指紋區(qū)的情況不同,該區(qū)峰多而復(fù)雜,沒有強(qiáng)的特征性。當(dāng)分子結(jié)構(gòu)稍有不同時(shí),該區(qū)的吸收就有細(xì)微的差異。指紋區(qū)對(duì)于區(qū)別結(jié)構(gòu)類似的化合物很有幫助。故本實(shí)驗(yàn)紅外光譜數(shù)據(jù)分析時(shí)主要采用1 800~400 cm-1區(qū)波段。由圖1可知,根據(jù)相似相溶原理,水提物中所含物質(zhì)極性比較大,根據(jù)紅外光譜吸收峰的歸屬,1 735 cm-1為羰基吸收峰[12],1 601 cm-1附近為芳環(huán)骨架振動(dòng)吸收峰[13],其中1 601 cm-1的芳環(huán)為非極性結(jié)構(gòu),結(jié)合相似相容原理的結(jié)論推測(cè)該物質(zhì)可能為芳環(huán)骨架與強(qiáng)極性物質(zhì)結(jié)合,例如糖基,以苷類形式存在。故1 735、1 601 cm-1表征了苦丁茶水提物中可能含有黃酮苷、皂苷等苷類物質(zhì)。1 523、1 454、1 392 cm-1是來甲基、亞甲基C—H彎曲振動(dòng)的結(jié)果[14-16],1 277、1 124 cm-1部分來自C—C伸縮振動(dòng)的吸收部分來自C—N伸縮振動(dòng)的吸收[17]。1 083、991 cm-1的強(qiáng)吸收峰是C—O振動(dòng)的吸收峰[16],900 cm-1以下的吸收峰則是糖環(huán)骨架振動(dòng)吸收峰[18]。綜上所述,苦丁茶水提物中主要含有多糖類、苷類物質(zhì),這與前人研究結(jié)果一致[14-16]。

        圖1 1-12月苦丁茶水提物的紅外光譜圖Fig.1 FT-IR spectra of aqueous extract of Kudingcha

        圖2 1-12月苦丁茶水提物紅外光譜特征峰強(qiáng)度變化趨勢(shì)Fig.2 FT-IR characteristic peaks of aqueous extract of Kudingcha

        1 735 cm-1為羰基吸收峰,1 523 cm-1為甲基、亞甲基彎曲振動(dòng)吸收峰[19],1 277 cm-1為C—C伸縮振動(dòng)的吸收[20],也可能有部分來源于C—N伸縮振動(dòng)吸收[21],806 cm-1為糖環(huán)骨架振動(dòng)吸收峰[22],這4 個(gè)吸收峰均能指代多糖中的各特征基團(tuán),比較圖2與表1中多糖含量的結(jié)果可知,這4 個(gè)特征峰強(qiáng)度變化的趨勢(shì)與苦丁茶水提物對(duì)大腸桿菌、金黃色葡萄球菌和綠膿桿菌的抑菌活性的變化趨勢(shì)基本一致,都是4月為全年最高,而12月為全年最低。其中1 735 cm-1在6—10月變化較小,呈緩緩下降的趨勢(shì),與大腸桿菌的抑菌圈直徑變化趨勢(shì)一致。1 523 cm-1在7月有較強(qiáng)減弱趨勢(shì),其余月份變化平緩,這與金黃色葡萄球菌的抑菌圈直徑變化趨勢(shì)相似。1 277 cm-1在6、8月處于穩(wěn)定期,但5、7月下降趨勢(shì)明顯,這與綠膿桿菌的抑菌圈直徑變化趨勢(shì)一致。806 cm-1在5月有下降之后,直到10月變化都不明顯,但與其他峰一致的是4月為全年最高值,12月為全年最低值,這與3 種菌的抑菌圈直徑結(jié)果一致。同時(shí)1 735、1 523、1 277、806 cm-14 個(gè)特征峰也是苦丁茶中苷類成分和多糖成分的特征峰。

        通過SPSS17.0軟件對(duì)不同采收期紅外特征峰1 735 、1 523、1 277、806 cm-1的峰強(qiáng)度與其對(duì)大腸桿菌、金黃色葡萄球菌和綠膿桿菌的抑菌圈直徑進(jìn)行雙變量相關(guān)分析,結(jié)果顯示(表2),806 cm-1特征峰與金黃色葡萄球菌的抑菌圈直徑顯著相關(guān),與大腸桿菌抑菌圈直徑低度相關(guān),與綠膿桿菌的抑菌圈直徑?jīng)]有相關(guān)性。1 277、1 523 cm-1特征峰與金黃色葡萄球菌的抑菌圈直徑極顯著正相關(guān),與大腸桿菌中度相關(guān),與綠膿桿菌抑菌圈直徑也具有弱相關(guān)性。1 735 cm-1特征峰與大腸桿菌、金黃色葡萄球菌的抑菌圈直徑相關(guān)性顯著,與綠膿桿菌抑菌圈直徑的相關(guān)性較弱。雙變量相關(guān)分析結(jié)果表明多糖,或連接有多糖的苷類物質(zhì)為苦丁茶的抑菌活性成分。

        3 結(jié) 論

        通過不同采收期苦丁茶提取物對(duì)3種菌的抑菌圈直徑比較可知,苦丁茶水提物對(duì)大腸桿菌的抑菌圈直徑在1、4、8、11月有顯著增長(zhǎng),對(duì)金黃色葡萄球菌的抑菌圈直徑在4、9月有顯著增長(zhǎng),對(duì)綠膿桿菌的抑菌圈直徑在3、4、8月有顯著增長(zhǎng)。雖然3 種菌的抑菌圈直徑全年增長(zhǎng)月份不相同,但均為4月份為抑菌圈直徑最高月,且對(duì)3種菌的抑菌圈直徑全年最低值均為12月。

        苦丁茶抑菌活性成分4月份含量最高,苦丁茶花期為4、5月份,這證明了中藥葉類采收多在植物光合作用旺盛期,開花期采收的合理性。12月溫度低,苦丁茶生長(zhǎng)不活躍,植物代謝能力降低,故苦丁茶的抑菌能力為全年最低值。

        雖然中藥混合物中各種成分的疊加譜相互之間有干擾,但從總體變化趨勢(shì)來看,苦丁茶多糖含量、苦丁茶水提物紅外光譜特征峰強(qiáng)度變化趨勢(shì)與苦丁茶對(duì)3 種菌抑菌圈直徑的變化趨勢(shì)基本一致,苦丁茶中抑菌活性成分可能為苷類成分和多糖,這與前人研究結(jié)果一致[10]。

        綜上,廣西苦丁茶冬青中抑菌活性成分含量在春季較高,在冬季較低。因此,苦丁茶的最佳采收期應(yīng)該為春季。本實(shí)驗(yàn)初步揭示了不同生長(zhǎng)季節(jié)苦丁茶中抑菌活性成分含量的變化規(guī)律,結(jié)果提示在苦丁茶的利用上,應(yīng)重視其不同季節(jié)所含的成分變化,根據(jù)苦丁茶不同有效成分的功效,合理安排采收時(shí)間以利于苦丁茶資源開發(fā)及臨床應(yīng)用。

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        Dynamic Change in Bioactive Polysaccharides and Antimicrobial Activity of Kudingcha (Ilex kudingcha C. J. Tseng.)

        CAI Juan1,2, HUANG Min-tao1,2, HUANG Yun-feng3, LAI Mao-xiang3, HUANG Rong-shao4, LIU Hua-gang5, HUANG Shu-shi1,*
        (1. Biophysics Laboratory, Guangxi Academy of Sciences, Nanning 530007, China; 2. Department of Pharmacy, Ganzhou Health School, Ganzhou 341000, China; 3. Guangxi Academy of Traditional Chinese Medicine, Nanning 530022, China; 4. Department of Agronomy, Guangxi University, Nanning 530004, China; 5. College of Pharmaceutical Sciences, Guangxi Medical University, Nanning 530021, China)

        Purpose: To investigate the dynamic accumulation pattern of the main antibacterial constituent, polysaccharides in Kudingcha collected at different months. Methods: Kudingcha was subjected to reflux extraction on a hot water bath and the process was repeated for three times. The cylinder plate method was used to measure the antimicrobial capacity. The diameter of inhibition zone was used to determine the optimal harvest time for Kudingcha. The sugar content was determined by the phenol sulfuric acid method. The correlation between polysaccharides and a ntibacterial activity was evaluated. The fingerprint spectra of Kudingcha aqueous extract obtained by Fourier transform infrared spectroscopy (FTIR) were studied and the correlation between characteristic peaks and antibacterial activity was evaluated. Results: The polysac char ide content in Kudingcha increased gradually during the first three months, and reached the peak of 96.6 mg/g in April. Then, it declined gradually to the lowest le vel of 47.7 mg/g in December. The greatest diameters of inhibition zone of Escherichia coli, Staphyloccocus aureus Rosenbach, Pseudomonas aeruginosa were observed when exposed to aqueous extract of Kudingcha harvested in April, and the lowest level when exposed to Kudingcha harvested in December. This trend was similar to the observation for polysaccharide content. Conclusion: The content of antibacterial components is at the highest level in Kudingcha harvested in April, and the best harvest period is in April. Glycosides and polysaccharides are antibacterial components in Kudingcha.

        Ilex kudingcha C. J. Tseng; harvest period; bioactive polysaccharides; Fourier transform infrared spectrometer (FT-IR); antibacterial activity

        R285.5

        A

        1002-6630(2014)09-0043-05

        10.750 6/spkx1002-6630-201409010

        2013-04-23

        “十二五”國(guó)家科技支撐計(jì)劃項(xiàng)目(2011BAI01B04);廣西科學(xué)研究與技術(shù)開發(fā)計(jì)劃項(xiàng)目(0992003A-20)

        蔡鵑(1988—),女,碩士研究生,主要從事中藥質(zhì)量控制研究。E-mail:cjlzl123@126.com

        *通信作者:黃庶識(shí)(1964—),男,研究員,博士,主要從事中藥質(zhì)量控制研究。E-mail:hshushi@gxas.cn

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