張 輝，陳文秋，余敏靈，薛 瓊

(1.四川省醫(yī)學(xué)科學(xué)院·四川省人民醫(yī)院皮膚病性病研究所，四川 成都610031;2.四川省樂山市食品藥品檢驗(yàn)所，四川 樂山614000)

冰硼散是由冰片、硼砂、朱砂、玄明粉組成的中藥成方制劑，收載于《中國(guó)藥典》2010 版一部。其功能主治為清熱解毒，消腫止痛。用于熱毒蘊(yùn)結(jié)所致的咽喉疼痛、牙齦腫痛、口舌生瘡［1］，也有局部外用治療宮頸糜爛和云南白藥加冰硼散調(diào)菜油外擦治療帶狀瘡疹的報(bào)道［2，3］，但無(wú)冰硼散中樟腦定量分析的報(bào)道。處方中的冰片具有開竅醒神，清熱止痛功效，《中國(guó)藥典》2010 版一部對(duì)冰片中樟腦的含量做了限量規(guī)定［1］，測(cè)定樟腦的含量對(duì)評(píng)價(jià)冰硼散的質(zhì)量有一定的臨床意義。參閱相關(guān)文獻(xiàn)［4～6］，本文采用毛細(xì)管氣相色譜法對(duì)冰硼散中的樟腦進(jìn)行了含量測(cè)定，為冰硼散的質(zhì)量控制提供一種可行方法。

1 材料與方法

1.1 儀器與試藥 浙江福立分析儀器有限公司GC 9750 氣相色譜儀;PEG 2000 石英毛細(xì)管柱(30 m×0.25 mm×0.25 μm);XS 205 電子天平(SETTLER公司);FID 檢測(cè)器;樟腦對(duì)照品來(lái)源于中國(guó)藥品生物制品檢定所(批號(hào)110747-200507);冰硼散樣品由泉州市靈源藥業(yè)有限公司提供(批號(hào):100907、100923、101025。規(guī)格:每瓶重0.6 g)。陰性對(duì)照樣品所用原料均符合藥用要求;其余試劑均為分析純。

1.2 方法 ①對(duì)照品溶液制備:精密稱取樟腦對(duì)照品60.00 mg，置100 ml 量瓶中，加乙酸乙酯溶解并稀釋至刻度，搖勻，作為對(duì)照品貯備液。②供試品溶液和陰性對(duì)照液制備:取冰硼散適量，研細(xì)，精密稱取2.0136 g，置具塞錐形瓶中，精密加乙酸乙酯10 ml，精密稱定重量，超聲處理15 min，再精密稱定重量，加醋酸乙酯補(bǔ)足減失的重量，用0.45 μm 微孔濾膜濾過，取續(xù)濾液作為供試品溶液。另取處方量藥品(除冰片外)，按質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定工藝制成陰性對(duì)照品制劑，精密稱取陰性對(duì)照品制劑2.1012 g，置具塞錐形瓶中，精加乙酸乙酯10 ml，精密稱定重量;超聲處理15 min，再精密稱定重量，用乙酸乙酯補(bǔ)足減失的重量，用0.45 μm 微孔濾膜濾過，取續(xù)濾液作為陰性對(duì)照溶液。③色譜條件:PEG2000 石英毛細(xì)管柱(30 m× 0.25 mm×0.25 μm)，柱溫:140 ℃。載氣N2;進(jìn)樣口溫度180 ℃，流速1.2 ml/min;進(jìn)樣量:1 ∶l，分流比15 ∶1。FID 檢測(cè)器溫度:180 ℃。④系統(tǒng)適應(yīng)性試驗(yàn):精密量取對(duì)照品貯備液5 ml，置10 ml 量瓶中，加乙酸乙酯稀釋至刻度，搖勻，作為對(duì)照品供試溶液，取對(duì)照品供試溶液、供試品溶液和陰性對(duì)照溶液照第③項(xiàng)色譜條件分別進(jìn)樣，結(jié)果繪圖。⑤線性關(guān)系:精密量取樟腦對(duì)照品貯備液1、2.5、4、5.5、7 和8.5 ml，分別置6 個(gè)10 ml 量瓶中，加乙酸乙酯稀釋至刻度，搖勻，分別吸取上述溶液各1 μl 注入氣相色譜儀中，按第③項(xiàng)色譜條件進(jìn)行測(cè)定。以樟腦峰面積(A)為縱坐標(biāo)與樟腦濃度(μg/ml)為橫坐標(biāo)作回歸曲線。⑥精密度試驗(yàn):精密量取對(duì)照品貯備液5 ml，分置6 個(gè)10 ml 量瓶中，加乙酸乙酯稀釋至刻度，搖勻，按第③項(xiàng)色譜條件，分別吸取上述溶液各1 μl 注入氣相色譜儀中，進(jìn)行測(cè)定。連續(xù)進(jìn)樣6 次。⑦重現(xiàn)性試驗(yàn):取冰硼散(批號(hào):100907 每1 g 冰硼散含樟腦0.436 mg)適量，研細(xì)，稱取細(xì)粉適量(約2 g)，共6 份，精密稱定，分置6 個(gè)具塞錐形瓶中，精加乙酸乙酯10 ml，精密稱定重量，超聲處理15 min，再精密稱定重量，加乙酸乙酯補(bǔ)足減失的重量;用0.45 μm 微孔濾膜濾過，取續(xù)濾液作為供試品溶液。分別吸取上述溶液各1 μl注入氣相色譜儀中，按第③項(xiàng)色譜條件進(jìn)行測(cè)定。⑧穩(wěn)定性試驗(yàn) 取供試品溶液于0、2、4、6、8、12 小時(shí)測(cè)定。⑨加樣回收試驗(yàn):取冰硼散(批號(hào):100907 每1 g 冰硼散含樟腦0.436 mg)適量，研細(xì)，稱取9 份(每份約1 g)，精密稱定，分別置于9 個(gè)10 ml 量瓶中，精密加入樟腦對(duì)照品貯備液0.60、0.60、0.60、0.75、0.75、0.75、0.90、0.90 和0.90 ml，分別加乙酸乙酯9.40、9.40、9.40、9.25、9.25、9.25、9.10、9.10 和9.10 ml，精密稱定重量，超聲處理15 min，再精密稱定重量，加乙酸乙酯補(bǔ)足減失的重量，用0.45 μm 微孔濾膜濾過，取續(xù)濾液作為供試品溶液。按第③項(xiàng)色譜條件測(cè)定，結(jié)果用第⑤線性關(guān)系回歸方程計(jì)算。⑩樣品含量測(cè)定:取冰硼散(批號(hào):100907、100923、101025)適量，研細(xì)，稱取約1 g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精加乙酸乙酯10 ml，精密稱定重量;超聲處理15 min，再精密稱定重量，用乙酸乙酯補(bǔ)足減失的重量，用0.45 μm 微孔濾膜濾過，作為供試品溶液。按第③項(xiàng)色譜條件測(cè)定，用第⑤線性關(guān)系回歸方程含量。

2 結(jié)果

2.1 系統(tǒng)適應(yīng)性 見圖1。供試品溶液色譜圖中有與對(duì)照品溶液色譜圖中樟腦色譜峰相對(duì)應(yīng)的色譜峰，并且該色譜峰與其他色譜峰的分離度大于1.5，理論塔板數(shù)大于2000;而陰性對(duì)照溶液無(wú)這一色譜峰。

2.2 線性關(guān)系 線性關(guān)系回歸曲線結(jié)果:y =79.7867x+10.0125，r=0.9999(n=6)。表明樟腦進(jìn)樣量在60 ～510 ng 線性關(guān)系良好。

2.3 精密度 精密度試驗(yàn)結(jié)果樟腦的平均峰面積為23936，RSD 為1.33%。

2.4 重現(xiàn)性 重現(xiàn)性試驗(yàn)結(jié)果樟腦平均峰面積(折算為樣品稱量2.0000 g 時(shí))為7002，RSD 為1.78%。

2.5 穩(wěn)定性 穩(wěn)定性試驗(yàn)結(jié)果樟腦峰面積變化不大，RSD 為1.96%，表明樣品溶液在室溫條件下12 h 內(nèi)穩(wěn)定，能滿足含量測(cè)定要求。

2.6 加樣回收試驗(yàn)結(jié)果 回收率平均98.9%，RSD 1.2，見表1。

圖1 氣相色譜圖 a:陰性對(duì)照;b:對(duì)照品;c:樣品;1.樟腦

表1 樟腦回收率試驗(yàn)結(jié)果 (n=6)

2.7 樣品含量 見表2。

表2 樣品含量測(cè)定結(jié)果

3 討論

①該方法快速，準(zhǔn)確，被測(cè)溶液穩(wěn)定，適合于冰硼散中樟腦的定量分析，可作為冰硼散中樟腦限量檢查的方法。②樟腦作為合成龍腦的一種雜質(zhì)，本文對(duì)樟腦定量檢測(cè)的研究可間接考察制劑所用原料質(zhì)量水平，從而促進(jìn)制劑質(zhì)量的提高。

［1］國(guó)家藥典委員會(huì).《中華人民共和國(guó)藥典》2010 年版一部［S］.北京:中國(guó)醫(yī)藥科技出版社，2010:702.

［2］師彩梅，賈守月.局部外用冰硼散治療宮頸糜爛療效觀察與分析［J］.基層醫(yī)學(xué)論壇，2010，14(8 月中旬刊):709.

［3］朱必建，劉劍秋. 云南白藥加冰硼散調(diào)菜油外擦治療帶狀瘡疹30 例療效觀察［J］.實(shí)用中西醫(yī)結(jié)合臨床，2010，10(6):13.

［4］劉亞梅，蒲旭峰，張良.毛細(xì)管氣相色譜法測(cè)定青蒿及青蒿油中石竹烯和樟腦的含量［J］.華西藥學(xué)雜志，2007，22(2):218-220.

［5］周剛，王巨才，禹鳳英，等.毛細(xì)管氣相色譜法測(cè)定復(fù)方薄荷腦滴鼻液中薄荷腦和樟腦的含量［J］. 解放軍藥學(xué)學(xué)報(bào)，2006，22(2):150-152.

［6］閻正，陳培云，曹照真，等.毛細(xì)管柱氣相色譜法測(cè)定中藥膏藥中樟腦、薄荷腦、龍腦及異龍腦含量［J］.理化檢驗(yàn)手冊(cè)-化學(xué)分冊(cè)，2008，44(12):1196-1198.