鄭國文

(四川省樂山市中區(qū)人民醫(yī)院病理科，四川 樂山614000)

Livin 是近年新發(fā)現(xiàn)的IAP(inhibitor of apoptosis protein)家族中的一種細胞凋亡抑制基因，具有抗凋亡作用，其表達陽性與腫瘤的發(fā)生、發(fā)展、轉(zhuǎn)移和預后密切相關［1］。Survivin 是IAP 家族的一個新成員，有學者研究也證實Survivin 在腫瘤發(fā)病中起重要作用，與凋亡指數(shù)呈負相關［2］。本研究應用免疫組織化學SP 法檢測40 例大腸癌組織Livin 和Survivin 的表達情況，進一步探討Livin 和Survivin 的相關性，現(xiàn)報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選擇2011 年8 月至2012 年8 月就診于我院的40 例經(jīng)病理檢查證實的大腸癌患者的癌組織及其癌旁組織標本。標本的獲取均經(jīng)患者知情同意，并簽署知情同意書。其中高、中分化28例，低分化l2 例;A-B 期16 例，C-D 期24 例;有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移25 例，無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移15 例。

1.2 方法 采用免疫組化SP 法檢測組織中Livin和Survivin 蛋白的表達。SP 試劑盒及兔抗人Livin多克隆抗體、羊抗人Survivin 多克隆抗體購于北京中杉生物技術有限公司。實驗過程按照產(chǎn)品說明書進行，以PBS 緩沖液分別代替一抗作為陰性對照。

1.3 結(jié)果判定 嚴格按照試劑盒說明書的診斷標準執(zhí)行。Livin、Survivin 陽性細胞是指細胞質(zhì)內(nèi)出現(xiàn)棕黃(褐)色顆粒。采用半定量積分法判定免疫組化染色結(jié)果:細胞無著色或陽性細胞的比例＜5%為陰性(-)，陽性細胞比例5% ～25%為弱陽性(+);陽性細胞比例～50%為中等陽性(++);陽性細胞比例＞50%為強陽性(+++)。由兩名富有經(jīng)驗的擁有高級職稱的病理醫(yī)師獨立對免疫組化染色結(jié)果分別進行評分［3］。

1.4 統(tǒng)計學方法 應用SPSS 12.0 軟件進行數(shù)據(jù)分析。率的比較采用χ2檢驗。P＜0.05 為差異有統(tǒng)計學意義。

2 結(jié)果

2.1 Livin 和Survivin 在大腸癌組織及癌旁組織中的表達 大腸癌組織中Livin 蛋白的陽性表達率為75%，Survivin 蛋白的陽性表達率為70%，均高于癌旁組織的陽性表達率(分別為20.0%和2.5%)，差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)，見圖1、圖2、表1。

2.2 Livin 和Survivin 在大腸癌組織中的表達及相關性分析 40 例大腸癌組織中，Livin 和Survivin蛋白表達均為陽性共26 例，均為陰性8 例。Livin和Survivin 在大腸癌組織中的表達有關(χ2=15.87，P＜0.05)，見表2。

圖1 Livin 蛋白表達(SP×100) a:在大腸癌旁組織中的表達(-);b:在大腸癌組織中的表達(+)

圖2 Survivin 表達(SP×100) a:在大腸癌組織中的表達(-);b:在大腸癌組織中的表達(+)

表1 Livin 和Survivin 在大腸癌及癌旁組織中的表達

表2 Livin 和Survivin 在大腸癌組織中的表達及相關性分析

3 討論

大腸癌是最常見的惡性腫瘤之一，近年來發(fā)病率呈逐年上升趨勢。對大腸癌的發(fā)生、發(fā)展分子作用機制的研究將有助于大腸癌的早期診斷、早期治療及預后判斷［4］。大腸癌的發(fā)病除了與飲食因素有關外，還與抑癌基因失活、癌基因突變、細胞凋亡周期失控、細胞增殖異常關系密切。

Livin 基因是一種新發(fā)現(xiàn)抗凋亡作用最強的凋亡抑制基因，大量的Livin 蛋白出現(xiàn)抑制了細胞的凋亡，延長了腫瘤細胞的生存期，增加了細胞發(fā)生基因突變的機會，從而有利于大腸癌的發(fā)生［5］。本研究中，大腸癌組織中存在Livin 過度表達(75%)，而正常組織中不表達或低表達(20%)，說明在大腸癌發(fā)生過程中Livin 的異常表達可能參與了大腸癌的發(fā)生，且對于大腸癌的惡性程度和預后的預測有一定的價值。

研究證實，Survivin 蛋白過表達是大腸癌發(fā)生中的一種獨立事件［6］。本研究結(jié)果顯示，Survivin 蛋白在大腸癌中表達的陽性表達率為70%，Survivin在正常組織中的陽性表達率2.5%，Survivin 在大腸癌中的高表達與其發(fā)生、發(fā)展、分期和轉(zhuǎn)移等相關［9］，這種高表達的差異使它有望成為新的腫瘤標志物和預后因子，其表達水平與治療的敏感性相關，提示它是一個潛在的治療靶點［7］。

本研究中表2 結(jié)果顯示，Livin 和Survivin 蛋白在大腸癌組織的表達呈正相關，說明Livin 和Survivin 在大腸癌中具有協(xié)同作用［8］，聯(lián)合檢測Livin及Survivin 蛋白具有重要的臨床意義。

［1］Takashima H，Nakajima T，Moriguchi M，et al. In Vivo expression patterns of survivin and its splicing variants in chronic liver disease and hepatoce1lu1ar carcinoma［J］.Liver Int，2005，25(1):77-84.

［2］東星，于波，周衛(wèi)東. Livin 與Caspase-9 在大腸癌組織中的表達及臨床意義［J］. 中國現(xiàn)代普通外科進展，2010，13(12):933-934.

［3］張韶光，郭世洲.Survivin、COX-2 在大腸癌中的表達及意義［J］.中國醫(yī)藥導報，2007，4(18):48-49.

［4］張翔，劉益飛. Livin 和Smac 蛋白在人大腸癌中的表達和意義［J］.交通醫(yī)學，2009，23(5):476-477.

［5］張曉雨，周建農(nóng)，高長明. Survivin 與大腸癌關系的研究進展［J］.中華腫瘤防治雜志，2006，13(5):391-392.

［6］牛劍祥，張俊晶，孟興凱. Survivin 與大腸癌關系研究進展［J］.醫(yī)學信息，2012，25(3):630-631.

［7］曹俐，吳君輝，李定軍.Survivin 在大腸癌組織中的表達及臨床意義［J］.中國現(xiàn)代普通外科進展，2006，9(4):247-248.

［8］陸娜娜，尹玉，曹立宇，等. 大腸癌中Livin 和Survivin 的表達及相關性研究［J］.中國組織化學與細胞化學雜志，2012，21(3):250-251.

［9］唐志蓉，劉欣雅，王平. 抗凋亡基因蛋白Survivin 與P53 蛋白在結(jié)直腸腺瘤中的表達及意義［J］. 實用醫(yī)院臨床雜志，2009，6(2):61-62.