【摘 要】中藥作為我國治療疾病的重要藥物，其成分分析在研制工作中尤為重要。中藥成分復雜性較高，其分離工作方面一直是研究人員長期研究的主題。在這種背景下，高效液相色譜技術(shù)應運而生，為研究打下了基礎。本文基于這類技術(shù)的作用特點，分析了三種液相色譜的應用要點，旨在提高這種技術(shù)在中藥成分分析中的應用程度，優(yōu)化中藥分析效果。

【關(guān)鍵詞】液相色譜 中藥分析 應用

高效液相色譜是基于經(jīng)典色譜與氣相色譜產(chǎn)生發(fā)展的。目前，研究者將高效液相色譜分為了幾個種類，包含高溫液相色譜、高壓液相色譜以及基于整體柱的高效液相色譜等。中藥在我國運用時間較久，從古至今，中藥通過其植物藥這種天然藥物的特點在醫(yī)藥體系中占據(jù)重要地位，但由于中藥本身成分并不簡單，因此分析時間較長，難度也較大。近年來，研究人員采用快速高效液相色譜分離技術(shù)，成功改善了傳統(tǒng)分析中的缺陷，通過色譜分離參數(shù)的改進讓中藥分析更加方便快捷。本文從這種方法的幾個方向分析了應用要點。

一、高溫液相色譜分離技術(shù)

采用高溫來對中藥展開分析是研究者長期以來使用最頻繁的方式，在高壓力狀態(tài)下，分離能夠?qū)崿F(xiàn)高效、快捷的效果。相對于此方面?zhèn)鹘y(tǒng)分離技術(shù)而言，以往不高的壓力并不能在短時間內(nèi)將成分有效分離。當溫度持續(xù)上升并達到某一程度時，流動相的黏度也會隨之產(chǎn)生改變。例如，將溫度從80攝氏度逐漸上升到200攝氏度，在這一過程中，流動相黏度會逐漸降低，直至降到原有的10%-20%。黏度下降可以讓溶質(zhì)在相液中提升擴散速度，流動阻力下降。在系統(tǒng)柱后壓沒有明顯上升的基礎上，分離可以在高流速狀態(tài)下實現(xiàn)其高效性。

在對中藥分析的中，高溫不僅可以讓分離速度明顯提升，還能夠針對中藥中含有的堿性化合物著重分析，讓其色譜峰形得以改善，從而減少實驗中需要用到的有機溶劑。在近年來的研究中，越來越多的熱穩(wěn)定性色譜原料被研發(fā)，例如氧化鋯、多孔石墨化碳以及聚合物等，這些填料的出現(xiàn)實際上為高溫液相色譜分離技術(shù)提供了一個良好的發(fā)展平臺，使得這一技術(shù)成為了色譜發(fā)展的新興代表。

二、高壓液相色譜分離技術(shù)

研究領(lǐng)域中，通過對液相色譜的速率展開分析，能夠得出一套方程式，對該方程式的分析能夠看出，對于一個固定相而言，其粒子直徑越小，理論塔板的高度就會就少，柱效越高。由此可見，中藥分離的效果很大程度上取決于研究者對固定相在粒度方面的控制狀況。柱效的流速會與每個不同的粒子直徑尺寸相對應，固定相粒度越小，其最高柱效點就會越靠近偏高部分的線速度方向，并且范圍也會變廣。

中藥中不乏復方制劑，采用此種方式對于復方制劑的分析而言效果更佳。高壓液相色譜需要與不同機器設備聯(lián)用才能夠展現(xiàn)出不同功能，甚至可以達到分析復雜生物樣本的程度。本文選取了幾個具有代表性的分析基質(zhì)做出研究，具體研究結(jié)果如下：

分析基質(zhì)分子物

大黃大黃素甲醚、蘆薈大黃素、純大黃素、大黃酸以及大黃酚

丹參四個二貼化合物、九個酚酸以及七個皂甙化合物

芍藥三個酚、八個沒食子酰基葡萄糖以及二十九個單萜苷類化合物

柴胡包括柴胡皂甙a、柴胡皂甙c、柴胡皂甙d等

赤芍十一個單萜苷類、十一個沒食子酰基葡萄糖及四個酚類化合物

瑞香狼毒香豆素類、木脂素類、黃酮等多類成分

三、基于整體柱的高效液相色譜分離技術(shù)

（一）整體柱性能優(yōu)勢

1.柱壓降方面

柱壓降會對分離速度產(chǎn)生一定影響，柱壓降越低，其分離的流速就越大。在整體柱里面存在的孔洞實際上可以看作是填充柱里面的顆粒間隙。因此柱壓降會受到填料粒直徑的影響。在實際研究中，整體柱的柱壓降實際上處于偏低狀態(tài)，這一情況為色譜分離在流速梯度方面創(chuàng)造了條件。在傳統(tǒng)分離過程中，柱壓降的高度設定容易讓流速梯度洗脫研究數(shù)據(jù)有誤差，且柱效在實驗過程中會產(chǎn)生高消耗。采用快速高效液相色譜分離這項技術(shù)，在二次試驗過程中可以不必再使用初始濃度來平衡，真正做到了實驗原料的節(jié)約。

2.保留因子

進行色譜分析實驗過程中，保留因子會受到壓力與溫度的影響，同時也會受到流動相體積影響。常規(guī)實驗中，流動相的體積能夠被看作通孔體積。色譜柱表面的化學成分會對其選擇性產(chǎn)生影響，在研究過程中發(fā)現(xiàn)，當色譜碳含量保持在同一水平的時候，在吸附容量方面整體柱能夠比填充柱多出40%。就這一結(jié)果來看，說明整體柱內(nèi)在孔洞使得表面積比填充柱略大，讓選擇性有所加強。

（二）將整體柱應用于中藥分析

中藥化合物種類含量較大，且數(shù)量具有不確定性，在此方面，整體柱的高選擇性、高柱效以及低柱壓降讓中藥成分分析結(jié)果更加可靠，并且能夠節(jié)約部分時間。采用整體柱高效液相色譜研究中藥成分，相對于傳統(tǒng)反向離子方面而言，這種分析方式能夠?qū)⒘魉僭诙虝r間內(nèi)有效提升到每分鐘3毫升，并且在短短兩分鐘的時間內(nèi)就可以將罌粟里面含有的生物堿分離出來，如嗎啡。這一優(yōu)勢讓分離速度極大提升，并且靈敏度較高，不會讓色譜峰數(shù)值難以確定。這種方式在含有生物堿的中藥成分分析上效果較為顯著，相對于傳統(tǒng)方式，分離洗脫時間有效縮短，大約在50%左右。另外，分離程度也會得以優(yōu)化。實驗中，采用整體柱方法已經(jīng)成功在兩個小時中將川穹的化合物分離出120個，當歸分離出100個。

四、結(jié)束語

在中藥產(chǎn)業(yè)不斷發(fā)展的背景下，分離技術(shù)的優(yōu)化與應用成為了研究者們長期研究的主題。對于液相色譜而言，分離的準確性是最為重要的因素，其次為時效性。本文研究的三種分離方式在準確性與時間上都存在差異性優(yōu)勢，研究者還應加大研究力度，在相關(guān)儀器設備與技術(shù)不斷創(chuàng)新發(fā)展的背景下完善分析結(jié)果，讓中藥研究更具有效性。

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