【摘要】目的將診斷結(jié)核病的蛋白芯片法與金標(biāo)法及抗酸染色法三種檢測方法進(jìn)行比較，以評(píng)價(jià)三種方法在臨床中的應(yīng)用價(jià)值。方法用蛋白芯片法、金標(biāo)法及抗酸染色法檢測125例確診結(jié)核病人、50例肺部其它疾病患者的血清標(biāo)本，并進(jìn)行相關(guān)統(tǒng)計(jì)分析。結(jié)果蛋白芯片法、金標(biāo)法及抗酸染色法檢出結(jié)核分枝桿菌的靈敏度為64%，72%及22.7%，前兩者比較無顯著性差異（P>0.05，但均高于抗酸染色法（P<0.05。三者的特異性分別為90%，76.7%及96.7%。結(jié)論蛋白芯片法檢測結(jié)核分枝桿菌，與金標(biāo)法及抗酸染色法比較，具有簡便、快速、敏感性較高和特異性強(qiáng)等優(yōu)點(diǎn)，是臨床輔助診斷結(jié)核病的有效方法。

【關(guān)鍵詞】蛋白芯片；結(jié)核分枝桿菌；比較；診斷

doi：10.3969j.issn.1004-7484（x.2013.10.765文章編號(hào)：1004-7484（2013-10-6202-01

1資料與方法

1.1材料①標(biāo)本來源：125例確診結(jié)核病人血清由我院內(nèi)科肺結(jié)核確診病人提供，50例肺部其它疾病患者的血清來源于我院胸外科、內(nèi)科。②主要儀器和試劑：蛋白芯片閱讀儀、結(jié)核分枝桿菌蛋白芯片試劑盒均為（南京大淵生物技術(shù)公司提供；結(jié)核分枝桿菌免疫膠體金診斷試劑盒為（上海奧普生物醫(yī)藥有限公司提供；抗酸染色相關(guān)試劑，根據(jù)《全國臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程》（第3版由實(shí)驗(yàn)室自行配置。

1.2方法

1.2.2蛋白芯片法（PC按試劑說明書操作。

1.2.2金標(biāo)法（IGFA按試劑說明書操作。

1.2.3抗酸染色法（AFS參照《全國臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程》第3版。

1.3統(tǒng)計(jì)學(xué)分析概率的比較采用X2檢驗(yàn)。

2結(jié)果

2.1175例標(biāo)本三種檢測結(jié)果與臨床診斷的關(guān)系見表1。

3討論

為了便于結(jié)核病的臨床的檢測我們需要結(jié)核菌的特異性細(xì)胞壁進(jìn)行多糖抗原LAN和經(jīng)基因工程的NA進(jìn)行技術(shù)處理達(dá)到純化的目的，將38Ka及16Ka特異性抗原放在同一膜片上，在固相模上可以觀察到抗原抗體的快速的反應(yīng)，并且為了更好的進(jìn)行檢測需要在膜上把免疫金作為標(biāo)記。

LAN具有特異性抗原，由于LAN在分支桿菌細(xì)胞壁中的重要組成部分，具有較強(qiáng)的免疫力，具有檢測的靈敏度會(huì)增高，不只是結(jié)核桿菌才有，在其他的分支桿菌中也有LAN成分，但是其他分支桿菌的成分特異性很低。結(jié)核分枝桿菌38K抗原與16K抗原是結(jié)核分枝桿菌所特有的抗原，出現(xiàn)的診斷的特異性很高，也不與其他的非核分支桿菌出現(xiàn)交叉反應(yīng)。在診斷的125例患者中，由于一些結(jié)核病人血液中有抗原并且和相應(yīng)的抗體復(fù)合，導(dǎo)致游離的抗體降低，使檢測的靈敏度下降，所以50例患者會(huì)出現(xiàn)蛋白芯為陰性的檢測結(jié)果。如果之前設(shè)定好了疾病的檢測值時(shí)，那么就會(huì)出現(xiàn)陰性的反應(yīng)。此外還有4例患者出現(xiàn)陽性結(jié)果，導(dǎo)致出現(xiàn)陽性的原因可能是結(jié)合在進(jìn)行治療之后個(gè)別的抗體依然存在或者是有潛伏的結(jié)核受到了分枝桿菌的污染。

從上述的結(jié)果來看，結(jié)核分枝菌蛋白特異性可到90%，與國內(nèi)的報(bào)道相一致。

金標(biāo)法顯示的靈敏度和特異性分別為72%，76.7%，從上述的結(jié)果中我們發(fā)現(xiàn)，膠體金結(jié)核抗體假陰性和假陽性的問題。如果患者是出現(xiàn)了假陽性，那么很多人群也會(huì)感染上結(jié)核，則是由于體內(nèi)對(duì)結(jié)核反應(yīng)所強(qiáng)所致，出現(xiàn)假陰性與每個(gè)人的機(jī)體的反應(yīng)有關(guān)，由于臨床上每個(gè)患者所處的情況是不同的，因此免疫抑制因子和抗原抗體的復(fù)合物使得血清中的結(jié)核抗體有所不同，最終造成假陽性，此外金標(biāo)法采用的是結(jié)核分枝桿菌抗原外膜，有可能和其他的非結(jié)核分枝桿菌交叉反應(yīng)，針對(duì)這一情況，我們要結(jié)合患者的具體的癥狀，并且在對(duì)患者進(jìn)行膠體金結(jié)核抗體的檢查時(shí)還要迅速的做出臨床的診斷。

根據(jù)多年的結(jié)核病的檢查經(jīng)驗(yàn)，我們通過對(duì)結(jié)核菌進(jìn)行抗菌染色簡單、快速。這種方法由于具備特異性高的特點(diǎn)，因此也是目前結(jié)核診斷最主要的方法，但是針對(duì)陽性率比較低和大部分的涂片陰性的問題還是不能高效的檢測出來。

在30例陽性標(biāo)本中我們發(fā)現(xiàn)2例檢測蛋白芯為陰性，這就證實(shí)了蛋白芯是很特異的，抗酸菌檢查方法檢查和蛋白芯檢查方法相比，蛋白芯檢查出現(xiàn)陽性的概率為50%顯然要高于抗酸菌，這就說明了這種檢測方法的高度的靈敏，因此在診斷不容易區(qū)別是結(jié)核病病上有很重要的臨床意義。

從表2可見，由于每個(gè)人體內(nèi)結(jié)核分枝桿菌的種類、數(shù)量有所不同，這就導(dǎo)致了結(jié)核分枝桿菌在對(duì)不同的病人時(shí)檢測出來的結(jié)果也是不同的。

從而表現(xiàn)出不同的抗原譜所致。其中單一抗體陽性率是17.6%（22125，兩種抗體陽性率是35.2%（44125，三種抗體陽性率是11.2%（14、125，所有抗體陽性檢出率是64%（80、125。因此，針對(duì)結(jié)核多種抗原的蛋白芯片法在保證特異性的基礎(chǔ)上提高了檢測的靈敏度。

綜上所述，結(jié)合分枝桿菌在蛋白芯的檢查上值得臨床推廣，可以對(duì)結(jié)核病進(jìn)行輔助的治療，并且快速有效。金標(biāo)的檢測方法在對(duì)結(jié)合血清的臨界水平做了調(diào)整的基礎(chǔ)上，符合結(jié)核病體液檢查的規(guī)律，并且對(duì)特異性的蛋白有很高的免疫性對(duì)肺結(jié)核的有一定的檢查作用，雖然目前金標(biāo)法靈敏度不是很高，但是可以有效的將既往的感染和現(xiàn)癥感染區(qū)別出來值得一用。

抗酸染色法檢測結(jié)核桿菌的特異性高，但靈敏度很低，故一般用于臨床以確診病人的排菌監(jiān)測。

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