摘 要：隨著分子生物學(xué)技術(shù)的日益發(fā)展，它與醫(yī)學(xué)的聯(lián)系日益緊密，是醫(yī)學(xué)院校的重要基礎(chǔ)實驗課程。在中醫(yī)院校開設(shè)本科生分子生物學(xué)實驗也迫在眉睫。本文是根據(jù)本科生新開設(shè)分子生物學(xué)實驗的準備過程談?wù)勼w會，旨在與廣打同仁共同探討，提高實驗教學(xué)效果。

關(guān)鍵詞：中醫(yī) 分子生物學(xué) 實驗準備

中圖分類號：G642 文獻標(biāo)識碼：A 文章編號：1673-9795（2013）09（a）-0126-01

隨著分子生物學(xué)的迅猛發(fā)展，該技術(shù)已經(jīng)滲透到基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)和臨床醫(yī)學(xué)的各個領(lǐng)域，與醫(yī)學(xué)聯(lián)系日益緊密。中醫(yī)院校的實驗教學(xué)課程大多是實驗性很強的專業(yè)課，而醫(yī)學(xué)分子生物學(xué)實驗大多是蛋白質(zhì)和核酸等的定量實驗，要求更嚴格，操作更復(fù)雜，實驗難度更大，要保證實驗課有序高質(zhì)量完成，實驗準備工作起著關(guān)鍵性的作用，環(huán)環(huán)相扣，不能疏忽大意。

為在中醫(yī)院校普及和推廣分子生物學(xué)技術(shù)，培養(yǎng)學(xué)生基本實驗技能和理論聯(lián)系實際的能力，我?；A(chǔ)醫(yī)學(xué)院實驗教學(xué)中心于2012年全面開展分子生物學(xué)教學(xué)實驗的準備工作，現(xiàn)準備工作已經(jīng)完成。經(jīng)歷我校分子生物學(xué)教學(xué)實驗室從無到有的整體建設(shè)，從耗材購置到預(yù)實驗進行，結(jié)合具體工作，談一談自己的體會。

1 提高自身業(yè)務(wù)能力

個人認為扎實的業(yè)務(wù)素質(zhì)是實驗準備工作必不可少的前提，我校本科分子生物學(xué)實驗包括質(zhì)粒的提取、基因組DNA的提取、PCR、轉(zhuǎn)化等五個小實驗，這些小實驗之間具有連續(xù)性強、時間長等特點，要求實驗準備工作人員必須具有扎實全面的理論基礎(chǔ)和熟練的實驗技能，掌握實驗原理、方法步驟和試劑配制，熟悉掌握設(shè)備儀器的操作和注意事項，出現(xiàn)問題能及時解決，對不同實驗結(jié)果有合理的解釋。如電泳，膠的濃度很大程度上決定了圖片漂亮與否，任何大小的DNA片段都有一個合適的濃度的膠，做PAGE時膠的濃度更為明顯；這些是實驗準備的重點，那么怎么尋找這些實驗中的重點呢？那就要在預(yù)實驗中仔細揣摩實驗原理、步驟；再如轉(zhuǎn)化會有多次失敗，許多人認為是感受態(tài)做的不好或者是抗生素加過量，可是有一次的感受態(tài)是“粗放型”做的，最后效果卻很好，這有可能是載體自我環(huán)化沒連上，或者是熱激時間過長；對于抗生素用量多的問題，則把平板在恒溫箱里多放置一段時間仍仍然什么都沒有（這時抗生素已經(jīng)失效），這就不是抗生素的問題了，這些只有實驗之后才能體會；有時候轉(zhuǎn)化子太多，就不妨把平板室溫下放置數(shù)小時，挑大菌落（質(zhì)粒拷貝數(shù)多）去驗證。最后，作為實驗技術(shù)人員，要關(guān)注國內(nèi)外實驗技術(shù)新動態(tài)，改進實驗方法，不斷提高自身業(yè)務(wù)能力。

2 積極做好預(yù)實驗

所謂預(yù)實驗是指在進行實驗教學(xué)或者是科學(xué)研究時，經(jīng)常需要在正式實驗之前先做一次實驗，簡稱預(yù)實驗[1]。它不僅僅是一個簡單的準備過程，而且實驗準備人員能通過這一過程摸索實驗條件，確保實驗順利進行，同時許多新的實驗方法和技巧都可以由預(yù)實驗探索而來[2]。

每次實驗都會因時間、室溫、試劑批號及濃度和儀器的改變而出現(xiàn)不同的實驗結(jié)果，所以每次實驗前都要做好預(yù)實驗。做好預(yù)實驗首先需要注意環(huán)境的干凈整潔，該滅菌的儀器和器皿是否準備充足，然后認真完成所需要的各種試劑的保存條件、稀釋時的配比等。

其次是儀器設(shè)備的準備，實驗前要仔細調(diào)試設(shè)備，這樣才能確保實驗的正常進行。比如我們實驗室新買了一臺離心機，空機轉(zhuǎn)動很好，可是在預(yù)實驗時發(fā)現(xiàn)放到里面的離心管頂部與機器有摩擦，及時與廠家聯(lián)系進行維修解決了問題。其實預(yù)實驗?zāi)康木褪谴_定實驗條件，尋找存在的問題及注意事項，確保實驗課的正常進行。

3 加強各方面的協(xié)調(diào)工作是實驗準備的保證

實驗準備工作特點是接觸面廣，與學(xué)校教務(wù)處、設(shè)備科、學(xué)科教師、學(xué)生的關(guān)系密切，處理好以上幾個方面的關(guān)系是搞好實驗工作的重要保證。（1）設(shè)備科：分子生物學(xué)實驗是一門新開實驗，作為采購部門的設(shè)備科第一次采購某些耗材就有可能會發(fā)生理解上的錯誤，這就需要和設(shè)備科老師有良好的溝通，比如填寫的購置計劃只寫著封口膜（全名叫無菌培養(yǎng)容器封口膜），在領(lǐng)取時設(shè)備科老師就先讓供貨商拿來一包樣品（Para film），發(fā)現(xiàn)不對我們及時調(diào)貨最終確保了實驗的順利進行；（2）學(xué)科教師：實驗教學(xué)是教師和實驗人員共同完成的教學(xué)任務(wù)，二者相互依賴，缺一不可，在實驗準備中要常征求學(xué)科教師意見，互相尊重，密切配合；（3）學(xué)生：每次實驗課前都要給本實驗室的負責(zé)人交代清楚實驗過程中的注意事項，有些必要的要打印出來貼在醒目處請學(xué)生注意。

4 加強日常管理

良好的實驗室管理是保證實驗順利進行的基礎(chǔ)。在實驗過程中要做到以下幾點。

4.1 實驗儀器的管理

分子生物學(xué)操作中會涉及一系列儀器，管理不當(dāng)或者使用不當(dāng)導(dǎo)致實驗失敗、減少儀器使用壽命或損壞儀器，因此在進行操作前細致地了解各種儀器的使用方法及注意事項，是使后繼實驗事半功倍的一個必要準備。比如超低溫冰箱和可調(diào)微量移液器，在超低溫冰箱內(nèi)儲存的物品包裝盒材質(zhì)應(yīng)為不銹鋼、鋁質(zhì)或耐低溫的硬質(zhì)塑料。禁止使用紙盒、橡膠器皿、玻璃器皿以及軟質(zhì)塑料袋；盡量減少開門的次數(shù)和開門時間，以保證箱內(nèi)溫度的穩(wěn)定；存取樣品時動作應(yīng)迅速，不能長時間打開冰箱。離開時務(wù)必確認冰箱已經(jīng)關(guān)嚴?？烧{(diào)微量移液器在使用過程中動作要緩慢平穩(wěn)，不使用時要調(diào)至最大值的刻度，使彈簧處于松弛狀態(tài)以保護彈簧。實驗結(jié)束后督促學(xué)生填寫儀器使用情況表，如有故障要寫明原因，以便及時聯(lián)系維修人員進行檢修。

4.2 實驗材料的管理

實驗室的安全最重要，分子生物學(xué)實驗經(jīng)常與毒性強，甚至是致癌的試劑接觸，像氯仿、異戊醇、甲醛、乙醚等許多溶劑，都應(yīng)在通風(fēng)櫥中使用，并且注意保護皮膚和呼吸道。另外一些致癌物或誘變劑，像溴化乙錠等，在操作中要注意防護，并注意使用后的處理。特別是一些試劑盒，一定要掌握相關(guān)知識后方可使用。實驗室工作人員要列出每次實驗的材料清單，每次實驗課前組長按照清單一一清點，對于有毒及需要特殊處理的試劑要對學(xué)生交代清楚，同時要明確下課后按時把所有實驗材料整理歸位，老師檢查合格后方可離開。

4.3 實驗室衛(wèi)生管理

從第一次上課就要強調(diào)實驗室環(huán)境衛(wèi)生的重要性，促使學(xué)生養(yǎng)成良好的衛(wèi)生習(xí)慣。每次實驗結(jié)束后值日生認真打掃衛(wèi)生，并將實驗室儀器、物品擺放整齊，為下一次實驗創(chuàng)造良好的氛圍。

分子生物學(xué)的準備工作繁瑣而復(fù)雜，即使有幾年的工作經(jīng)驗也難免會有疏漏，這就要求我們平時的經(jīng)驗非常重要。注意總結(jié)實驗中注意事項，每次的物品準備都要有詳細的記錄，每學(xué)期實驗項目一旦確定就不會改變，準備教師可以提前熟悉實驗程序。嫻熟的操作技能是保證實驗準備得以順利進行的重要條件，只有做到正確使用、熟練和規(guī)范操作，才能得到正確結(jié)果[3]。長此以往，可以改正不足，逐漸完善實驗準備工作。

參考文獻

[1]孫蕊，于洪帥，丁寧，等.預(yù)實驗在培養(yǎng)大學(xué)生綜合素質(zhì)中的作用[J].現(xiàn)代醫(yī)藥衛(wèi)生，2008（22）：151-152.

[2]吳玉秀，董小青，王玉祥，等.做好微生物學(xué)實驗準備工作的幾點體會[J].山西醫(yī)科大學(xué)學(xué)報：基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)教育版，2006（6）：70-71.

[3]沈澄，葉知秋.重視實驗準備工作保證實驗教學(xué)質(zhì)量[J].現(xiàn)代醫(yī)藥衛(wèi)生，2006（23）：150.