摘要：目前國內有很多HIV 抗體診斷試劑種類，大部分都采用ELISA法檢測抗體。迄今已開發(fā)研制的抗原抗體聯(lián)合的第四代HIV診斷試劑。筆者通過對第三代診斷試劑盒和第四代診斷試劑盒的診斷效果的研究發(fā)現(xiàn)，第四代診斷試劑盒具有更高的靈敏性，但特異性較差。

關鍵詞：ELISA法檢測抗體；第四代HIV診斷試劑；靈敏性；特異性

中圖分類號：R818.052 文獻標識碼：C 文章編號：1005-0515（2013）10-056-01

引言

目前國內有很多HIV 抗體診斷試劑種類，大部分臨床科室都采用第三代診斷試劑，即目前國內流行的ELISA法檢測抗體。迄今已開發(fā)研制的第四代HIV診斷試劑，它采用抗原抗體聯(lián)合檢測。本血站使用第三代診斷試劑盒和第四代診斷試劑盒對獻血者的血液進行檢測， 并對兩種試劑盒的診斷效果進行對比。

1材料的選取

材料全部取自于本血站2013年1月1日到2013年4月30日的獻血者，共5800份，由衛(wèi)生部臨檢中心給出5份HIV室間質評獻血者的血清以及由康徹思坦有限公司提供的室內質控血清。

2 試劑

第三代與第四代HIV診斷試劑盒分別購于英科新創(chuàng)試劑股份有限公司和北京萬泰生物藥業(yè)有限公司，均被中國藥品生物制品檢定所批批檢定合格， 在有效期內使用，符合國家質量標準。

3方法

嚴格按照國家標準和試劑盒說明書，對所有血清標本同時使用第三代與第四代HIV診斷試劑進行檢測， 并將初次檢測為反應性的標本進行雙孔復查， 任一種試劑檢測結果為反應性及兩種試劑為反應性的標本送湖南省疾病預防控制中心性病艾滋病檢測中心確認。室間質評標本與質控血清和樣本一同進行檢測。

4 統(tǒng)計學處理

采用spss6.0統(tǒng)計軟件進行統(tǒng)計學處理，兩組結果的比較采用χ2 檢驗。

5 結果

對5800份標本采用兩種試劑進行檢測， 第三代HIV診斷試劑檢測出7例是陽性，但用第四代試劑檢測出18 例是陽性的， 其中有3例標本兩種試劑均為陽性最后確認陽性， 有1例標本第四代試劑檢測為陽性， 但第三代試劑檢測為陰性， 最后確認為疑是陽性，電泳條帶為P24抗原。

從表1 可以看出，在特異性方面，第四代試劑稍遜于第三代試劑， 這與文獻報道一致。另外還有1例經(jīng)第四代HIV診斷試劑檢測為有反應性， 但第三代試劑檢測為陰性， 經(jīng)P24抗原檢測為陽性， 經(jīng)NAT檢測為陽性， 說明此標本為窗口期樣本。

從表2 看， 兩種診斷試劑平行檢測室間質評血清， 結果全部達標， 但對于比較弱的陽性標本， 第四代試劑反應性更靈敏些， 即第四代試劑敏感性較強。

討論

自從1981 年，人們首次發(fā)現(xiàn)艾滋病，研究人員從艾滋病患者體內成功分離出其病原體，并發(fā)展了血清學抗體檢測、唾液檢測和尿液測檢等常規(guī)使用的標準診斷項目。血清學抗體檢測從20世紀上葉就得到長足的發(fā)展，到現(xiàn)在已經(jīng)有四代試劑。第一代試劑然敏感性、特異性均較低，它采用病毒裂解抗原包被的ELISA 間接法，。第二代試劑是運用DNA 重組和多肽合成技術，避免細胞培養(yǎng)蛋白導致的非特異性反應，是一種重組抗原的HIV 抗體初篩試劑。1986 年， 在西非的艾滋病病人標本中又分離出另外一種被稱為HIV-2的HIV。HIV-2陽性標本用HIV-1篩查試劑抗體檢測常常出現(xiàn)漏檢的。在1992 年2 月14 日，第一個HIV-1/ HIV-2抗體ELISA 試劑被FDA批準了。1994年發(fā)展了起來的第三代H IV 抗體篩查試劑提高試劑的檢測敏感性，它是用雙抗原夾心法， 以特異性的H IV 抗原作為酶標記物，而不是抗人IgG，這種試劑不需要將標本過度稀釋來保證反應的特異性就可以檢測包括IgA、I gM、IgG等不同的HIV 抗體亞類。國際上出現(xiàn)的第4 代HIV檢測試劑， 它可同時檢測HIV-1/ HIV-2兩種抗體和p24 抗原， 又稱為HIV 抗原/抗體診斷試劑，較第三代試劑每個測試的費用相似， 但敏感性高， 窗口期縮短。這種試劑能夠檢測早期的血清陽轉， 縮短了檢測的窗口期， 進一步提高了輸血的安全性。

我國國產(chǎn)三代的ELISA試劑和四代HIV檢測試劑起步較晚， 但是近年來隨著我國科技的迅速發(fā)展。到1994 年， 衛(wèi)生部檢定并批準了國產(chǎn)二代HIV-1/ HIV-2 抗體酶標診斷試劑盒。目前國內主要流行的第三代試劑，但是有很多廠家已經(jīng)推出自己研制的第四代試劑。從1998 年起，根據(jù)衛(wèi)生部要求， 中國疾病預防控制中心性病艾滋病預防控制中心國家艾滋病參比實驗室對國內的HIV診斷試劑進行臨床質量評估， 為國內的HIV診斷試劑用戶提供質量信息，診斷試劑進行了連續(xù)8年的試劑考評， 得出國產(chǎn)HIV抗體診斷試劑質量的總體水平在逐年提高的結論； 特別是從2000年開始， 國產(chǎn)HIV 診斷試劑從第二代ELISA 間接法篩查試劑提升到第三代雙抗原夾心法篩查試劑， 敏感性和特異性已接近國外同類產(chǎn)品水平。目前第四代試劑可同時檢測血清中HIV的p24 抗原和抗體。

結論

當今血液安全的最大隱患是HIV窗口期感染。研究表明， 使用第四代HIV試劑可使窗口期可縮短4到5天。同時第四代試劑在檢測低滴度的血清標本時其反應性更強，意味著有更高的靈敏度，可以有效的避免漏檢， 從而及時篩查出可疑的HIV感染者。但是第四代試劑特異性低于第三代試劑， 使得檢測結果出現(xiàn)很多的假陽性，從而增加了工作的復雜性，可對于血液安全卻是非常重要的。

參考文獻

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