【摘要】 目的:探討ERCC1和TS蛋白在大腸癌中的表達(dá)及其臨床意義。方法:采用免疫組化SP法和組織芯片對(duì)196例大腸癌組織和50例正常大腸切緣組織進(jìn)行ERCC1和TS蛋白表達(dá)水平檢測(cè),分析兩者與臨床病理特征的關(guān)系。其中129例術(shù)后患者行FOLFOX4方案化療,隨訪3年。結(jié)果:在結(jié)直腸癌中ERCC1及TS表達(dá)均高于正常腸黏膜組織,而與性別、年齡、分化程度、部位無(wú)關(guān)(P>0.05),TS陽(yáng)性表達(dá)率及兩者雙陽(yáng)性表達(dá)率均在有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移者及TNM Ⅲ期、Ⅳ期患者中明顯升高。ERCC1、TS陰性表達(dá)者3年DFS均分別高于陽(yáng)性表達(dá)者(P<0.05)。結(jié)論:ERCC1和TS蛋白在大腸癌中的陽(yáng)性表達(dá)較高,可能與腫瘤的發(fā)生、轉(zhuǎn)移有關(guān)。ERCC1和TS蛋白陰性者可從FOLFOX4化療中獲益。
【關(guān)鍵詞】 ERCC1蛋白; TS 蛋白; 大腸癌; 免疫組化; 3年DFS
大腸癌是常見(jiàn)的消化道惡性腫瘤,發(fā)病率逐年上升,嚴(yán)重威脅人民健康。大腸癌治療采用手術(shù)、放化療、分子靶向治療等相結(jié)合的綜合治療,腫瘤復(fù)發(fā)和轉(zhuǎn)移是影響長(zhǎng)期生存的主要因素。目前分子生物技術(shù)的發(fā)展,為大腸癌的診斷及預(yù)后、個(gè)體化治療提供了有力的保障。筆者收集2009年1-12月安陽(yáng)市腫瘤醫(yī)院一年間行大腸癌根治術(shù)后的196例標(biāo)本,采用免疫組化及組織芯片技術(shù),檢測(cè)ERCC1和TS蛋白在大腸癌中的表達(dá),探討其與腫瘤的發(fā)生、發(fā)展關(guān)系,并對(duì)其中129例術(shù)后患者應(yīng)用FOLFOX4方案化療,進(jìn)行3年隨訪,探討ERCC1和TS蛋白的臨床意義。
1 資料與方法
1.1 一般資料 收集安陽(yáng)市腫瘤醫(yī)院2009年1-12月手術(shù)切除的結(jié)直腸癌組織石蠟標(biāo)本196例,患者術(shù)前均未接受放療和化療。其中男112例,女84例,年齡28~83歲,平均59.5歲,病理均為腺癌。129例Ⅱ期、Ⅲ期患者應(yīng)用FOLFOX4方案行術(shù)后輔助化療。其中Ⅱ期患者44例,Ⅲ期患者85例。取50例正常大腸組織作為對(duì)照。
1.2 方法
1.2.1 應(yīng)用免疫組化SP法和組織芯片技術(shù) 按照SP檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書(shū)所示步驟進(jìn)行,組織芯片由上海芯超生物科技有限公司制作。ERCC1鼠抗人單克隆抗體、TS鼠抗人單克隆抗體、SP檢測(cè)試劑盒及DAB顯色液,均購(gòu)自北京中杉金橋生物技術(shù)有限公司。
1.3 判定標(biāo)準(zhǔn) ERCC1以胞核及胞漿中出現(xiàn)棕黃色顆粒為陽(yáng)性染色,TS以胞漿中出現(xiàn)棕黃色顆粒為陽(yáng)性染色,選取5個(gè)高倍視野(400×),每個(gè)視野計(jì)數(shù)200個(gè)腫瘤細(xì)胞,計(jì)數(shù)陽(yáng)性細(xì)胞百分比,取其均值。參照Wachters等[1]的方法:陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)百分率≤10%或不表達(dá),記作陰性,>10%記作陽(yáng)性。門(mén)診復(fù)查、電話隨訪等,隨訪3年,記錄DFS。
1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 采用SPSS 13.0軟件對(duì)所得數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析,計(jì)數(shù)資料采用 字2檢驗(yàn),F(xiàn)isher精確概率法及Kaplan-Meier法,以P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
3 討論
筆者的研究顯示ERCC1及TS蛋白在大腸癌中的表達(dá)均高于正常大腸組織。在大腸癌組織中ERCC1表達(dá)與性別、年齡、分化程度、部位、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、分期無(wú)關(guān)(P>0.05),而TS蛋白陽(yáng)性表達(dá)與淋巴及轉(zhuǎn)移、腫瘤進(jìn)展分期明顯相關(guān)。Yuanming等[5]報(bào)道ERCC1在有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的結(jié)腸癌患者中的表達(dá)率降低,與筆者的研究不太一致。
本研究顯示TS蛋白在有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移和臨床分期為Ⅲ、Ⅳ期患者中陽(yáng)性表達(dá)分別高于無(wú)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移和臨床分期為Ⅰ、Ⅱ期者(P<0.05),提示TS蛋白陽(yáng)性表達(dá)率的升高,與結(jié)腸癌變進(jìn)展、轉(zhuǎn)移有關(guān)。
ERCC1、TS、MMR單一指標(biāo)的檢測(cè)能否作為判斷結(jié)腸癌Ⅱ、Ⅲ期患者預(yù)后的指標(biāo),研究報(bào)道不一[6-9]。筆者的研究顯示ERCC1和TS共同陽(yáng)性表達(dá)(表4)與結(jié)腸癌的淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、病理分期有明顯相關(guān)性,其表達(dá)率的升高提示腫瘤的侵襲、轉(zhuǎn)移性增加。Ohrling等[10]報(bào)道在Ⅲ期結(jié)腸癌患者中聯(lián)合檢測(cè)錯(cuò)配修復(fù)蛋白(MMR)和TS表達(dá)情況相比檢測(cè)單一指標(biāo)對(duì)5-Fu為基礎(chǔ)的化療方案的敏感預(yù)見(jiàn)性更好。聯(lián)合檢測(cè)ERCC1蛋白和TS蛋白表達(dá)可能對(duì)結(jié)腸癌術(shù)后的FOLFOX輔助化療更有指導(dǎo)意義,筆者的研究顯示:ERCC1和TS蛋白陰性者輔助化療后的3年DFS分別明顯高于ERCC1和TS蛋白陽(yáng)性者,能從FOLFOX4化療中獲益。Li等[11]報(bào)道ERCC1陰性者大腸癌的5年生存率高于陽(yáng)性者,與筆者的3年DFS隨訪結(jié)果一致。
隨著腫瘤分子學(xué)的研究深入,結(jié)直腸癌的病理生理特點(diǎn)及其預(yù)后判斷和個(gè)體化診療,將會(huì)有更進(jìn)一步的發(fā)展。
參考文獻(xiàn)
[1] Wachters F M,Wong L S M,Timens W,et al.ERCC1,hRad51,and BRCA1 protein expression in relation to tumour response and survival of stage Ⅲ/IV NSCLC patients treated with chemotherapy[J].Lung Cancer,2005,50(2):211-219.
[2]徐光輝,李玉,葉勝龍,等.結(jié)腸癌組織中ERCC1和BRCA1的表達(dá)及其與鉑類(lèi)化療療效的相關(guān)性[J].復(fù)旦學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版),2011,38(4):315-318.
[3]鐘瓊,李邦華,朱惠東,等.結(jié)腸癌組織中ERCC1表達(dá)及其意義[J].實(shí)用癌癥雜志,2009,24(3):261-264.
[4]程慧敏,劉靜,唐采白,等.大腸癌CD133(+)、Musashi-1(+)干細(xì)胞與臨床病理學(xué)因素及MGMT、ERCC1、TS關(guān)系的研究[J].徐州醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào),2010,30(2):104-110.
[5] Yuanming L,Lineng Z,Baorong S,et al.BRCA1 and ERCC1 mRNA levels are associated with lymph node metastasis in Chinese patients with colorectal cancer[J].BMC Cancer,2013,13(1):103.
[6] Chen Y,Yi C,Liu L,et al.Thymidylate synthase expression and prognosis in colorectal cancer:a meta-analysis of colorectal cancer survival data[J].Int J Biol Markers,2012,27(3):203-211.
[7] Ohrling K,Edler D,Hallstrm M,et al.Mismatch repair protein expression is an independent prognostic factor in sporadic colorectal cancer[J].Acta Oncol,2010,49(6):797-804.
[8] Sarasqueta A F,van Lijnschoten G,Lemmens V E P P,et al.Pharmacogenetics of Oxaliplatin as Adjuvant Treatment in Colon Carcinoma[J].Mol Diagn Ther,2011,15(5):277-283.
[9] Kaira K,Okumura T,Ohde Y,et al.Prognostic significance of thymidylate synthase expression in the adjuvant chemotherapy after resection for pulmonary metastases from colorectal cancer[J].Anticancer Res,2011,31(9):2763-2771.
[10] Ohrling K,Karlberg M,Edler D,et al.A Combined Analysis of Mismatch Repair Status and Thymidylate Synthase Expression in Stage Ⅱ and Ⅲ Colon Cancer[J].Clin Colorectal Cancer,2012,12(2):128-135.
[11] Li P,F(xiàn)ang Y J,Li F,et al.ERCC1,defective mismatch repair status as predictive biomarkers of survival for stage Ⅲ colon cancer patients receiving oxaliplatin-based adjuvant chemotherapy[J].Br J Cancer,2013,108(6):1238-1244.
(收稿日期:2013-05-13) (本文編輯:歐麗)